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木犀草素-7-O-葡萄糖苷对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌肥厚的作用及机制研究

中文摘要第10-13页
ABSTRACT第13-15页
符号说明第16-18页
前言第18-25页
    1. 心肌肥厚的现状第18-19页
    2. 心肌肥厚和自噬第19-21页
        2.1 自噬第19-20页
        2.2 心肌肥厚与自噬第20-21页
    3. 氧化应激、心肌肥厚和自噬第21-22页
    4. Ang Ⅱ诱导的心肌肥厚中的自噬第22-23页
    5. 自噬在逆转心肌肥厚中的作用第23-24页
    6. 化合物LUTG第24-25页
实验材料和方法第25-38页
    1. 实验材料第25-27页
        1.1 化合物第25页
        1.2 细胞株第25页
        1.3 试剂第25-27页
        1.4 仪器设备第27页
        1.5 实验动物第27页
    2. 实验方法第27-38页
        2.1 细胞培养第27-28页
        2.2 不同浓度LUTG对大鼠心肌H9c2细胞活力影响第28页
        2.3 LUTG对Ang Ⅱ诱导的心肌肥厚的影响第28-31页
            2.3.1 吉姆萨染色检测细胞面积第28页
            2.3.2 总蛋白浓度检测第28-29页
            2.3.3 RT-PCR检测ANP mRNA表达第29-31页
        2.4 LUTG对Ang Ⅱ诱导的氧化应激的影响 2.4.1 ROS水平检测2.4.2 细胞脂质过氧化物MDA的检测第31-32页
        2.5 LUTG对Ang Ⅱ诱导自噬的影响第32-34页
            2.5.1 AO染色检测自噬第32-33页
            2.5.2 溶酶体绿色荧光探针试验第33页
            2.5.3 Western blotting检测LC3B、P62、Beclin1蛋白的表达第33页
            2.5.4 LUTG和3-MA对Ang Ⅱ诱导的自噬的作用第33-34页
        2.6 LUTG对p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR蛋白表达的影响第34页
        2.7 NAC对Ang Ⅱ诱导的心肌细胞的影响第34-35页
            2.7.1 NAC对Ang Ⅱ诱导的心肌细胞氧化应激的影响第34页
            2.7.2 NAC对Ang Ⅱ诱导的心肌细胞自噬的影响第34-35页
            2.7.3 Western blotting检测p-Akt、Akt、p-mTOR和mTOR蛋白的表达第35页
        2.8 NAC联合LUTG对Ang Ⅱ诱导的心肌细胞的影响第35-36页
            2.8.1 NAC联合LUTG对心肌细胞自噬水平的改变第35-36页
            2.8.2 Western blotting检测p-Akt、Akt、p-mTOR和mTOR蛋白的表达第36页
        2.9 LUTG对Ang Ⅱ诱导C57BL/6J鼠心肌肥厚的影响第36-37页
        2.10 统计学分析第37-38页
实验结果第38-56页
    3.1 不同浓度LUTG对大鼠心肌H9c2细胞活力影响第38页
    3.2 LUTG对Ang Ⅱ诱导的心肌肥厚的作用第38-41页
        3.2.1 LUTG对心肌细胞表面积的影响第38-39页
        3.2.2 LUTG对细胞内总蛋白浓度的影响第39-40页
        3.2.3 LUTG对Ang Ⅱ诱导的心肌细胞ANP mRNA表达的影响第40-41页
    3.3 LUTG对Ang Ⅱ诱导的氧化应激的作用第41-43页
        3.3.1 LUTG对Ang Ⅱ诱导的ROS的影响第41-42页
        3.3.2 LUTG对Ang Ⅱ诱导的脂质过氧化的影响第42页
        3.3.3 LUTG对γ-H2AX、Nrf2蛋白表达的影响第42-43页
    3.4 LUTG对Ang Ⅱ诱导的自噬的影响第43-47页
        3.4.1 AO染色观察自噬的变化第43-44页
        3.4.2 溶酶体绿色荧光探针染色观察自噬的变化第44-45页
        3.4.3 自噬相关蛋白的变化第45-46页
        3.4.4 LUTG和3-MA对Ang Ⅱ诱导的自噬的作用第46-47页
    3.5 LUTG对p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR蛋白表达的影响第47-48页
    3.6 NAC对Ang Ⅱ诱导的心肌细胞的影响第48-52页
        3.6.1 NAC对Ang Ⅱ诱导的心肌细胞氧化应激的影响第48-50页
        3.6.2 NAC对Ang Ⅱ诱导的心肌细胞自噬的影响第50-51页
        3.6.3 NAC对p-Akt、Akt、p-mTOR和mTOR表达的作用第51-52页
    3.7 NAC联合LUTG对Ang Ⅱ诱导的心肌细胞的影响第52-54页
        3.7.1 NAC联合LUTG对心肌细胞自噬水平的改变第52-54页
        3.7.2 NAC联合LUTG对细胞内的p-Akt、Akt、mTOR和p-mTOR蛋白表达的影响第54页
    3.8 LUTG对Ang Ⅱ诱导的小鼠心肌肥厚的作用第54-56页
讨论第56-60页
结论第60-61页
参考文献第61-68页
致谢第68-69页
攻读硕士期间发表的论文第69-70页
附件第70-80页
学位论文评阅及答辩情况表第80页

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