中文摘要 | 第10-13页 |
ABSTRACT | 第13-15页 |
符号说明 | 第16-18页 |
前言 | 第18-25页 |
1. 心肌肥厚的现状 | 第18-19页 |
2. 心肌肥厚和自噬 | 第19-21页 |
2.1 自噬 | 第19-20页 |
2.2 心肌肥厚与自噬 | 第20-21页 |
3. 氧化应激、心肌肥厚和自噬 | 第21-22页 |
4. Ang Ⅱ诱导的心肌肥厚中的自噬 | 第22-23页 |
5. 自噬在逆转心肌肥厚中的作用 | 第23-24页 |
6. 化合物LUTG | 第24-25页 |
实验材料和方法 | 第25-38页 |
1. 实验材料 | 第25-27页 |
1.1 化合物 | 第25页 |
1.2 细胞株 | 第25页 |
1.3 试剂 | 第25-27页 |
1.4 仪器设备 | 第27页 |
1.5 实验动物 | 第27页 |
2. 实验方法 | 第27-38页 |
2.1 细胞培养 | 第27-28页 |
2.2 不同浓度LUTG对大鼠心肌H9c2细胞活力影响 | 第28页 |
2.3 LUTG对Ang Ⅱ诱导的心肌肥厚的影响 | 第28-31页 |
2.3.1 吉姆萨染色检测细胞面积 | 第28页 |
2.3.2 总蛋白浓度检测 | 第28-29页 |
2.3.3 RT-PCR检测ANP mRNA表达 | 第29-31页 |
2.4 LUTG对Ang Ⅱ诱导的氧化应激的影响 2.4.1 ROS水平检测2.4.2 细胞脂质过氧化物MDA的检测 | 第31-32页 |
2.5 LUTG对Ang Ⅱ诱导自噬的影响 | 第32-34页 |
2.5.1 AO染色检测自噬 | 第32-33页 |
2.5.2 溶酶体绿色荧光探针试验 | 第33页 |
2.5.3 Western blotting检测LC3B、P62、Beclin1蛋白的表达 | 第33页 |
2.5.4 LUTG和3-MA对Ang Ⅱ诱导的自噬的作用 | 第33-34页 |
2.6 LUTG对p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR蛋白表达的影响 | 第34页 |
2.7 NAC对Ang Ⅱ诱导的心肌细胞的影响 | 第34-35页 |
2.7.1 NAC对Ang Ⅱ诱导的心肌细胞氧化应激的影响 | 第34页 |
2.7.2 NAC对Ang Ⅱ诱导的心肌细胞自噬的影响 | 第34-35页 |
2.7.3 Western blotting检测p-Akt、Akt、p-mTOR和mTOR蛋白的表达 | 第35页 |
2.8 NAC联合LUTG对Ang Ⅱ诱导的心肌细胞的影响 | 第35-36页 |
2.8.1 NAC联合LUTG对心肌细胞自噬水平的改变 | 第35-36页 |
2.8.2 Western blotting检测p-Akt、Akt、p-mTOR和mTOR蛋白的表达 | 第36页 |
2.9 LUTG对Ang Ⅱ诱导C57BL/6J鼠心肌肥厚的影响 | 第36-37页 |
2.10 统计学分析 | 第37-38页 |
实验结果 | 第38-56页 |
3.1 不同浓度LUTG对大鼠心肌H9c2细胞活力影响 | 第38页 |
3.2 LUTG对Ang Ⅱ诱导的心肌肥厚的作用 | 第38-41页 |
3.2.1 LUTG对心肌细胞表面积的影响 | 第38-39页 |
3.2.2 LUTG对细胞内总蛋白浓度的影响 | 第39-40页 |
3.2.3 LUTG对Ang Ⅱ诱导的心肌细胞ANP mRNA表达的影响 | 第40-41页 |
3.3 LUTG对Ang Ⅱ诱导的氧化应激的作用 | 第41-43页 |
3.3.1 LUTG对Ang Ⅱ诱导的ROS的影响 | 第41-42页 |
3.3.2 LUTG对Ang Ⅱ诱导的脂质过氧化的影响 | 第42页 |
3.3.3 LUTG对γ-H2AX、Nrf2蛋白表达的影响 | 第42-43页 |
3.4 LUTG对Ang Ⅱ诱导的自噬的影响 | 第43-47页 |
3.4.1 AO染色观察自噬的变化 | 第43-44页 |
3.4.2 溶酶体绿色荧光探针染色观察自噬的变化 | 第44-45页 |
3.4.3 自噬相关蛋白的变化 | 第45-46页 |
3.4.4 LUTG和3-MA对Ang Ⅱ诱导的自噬的作用 | 第46-47页 |
3.5 LUTG对p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR蛋白表达的影响 | 第47-48页 |
3.6 NAC对Ang Ⅱ诱导的心肌细胞的影响 | 第48-52页 |
3.6.1 NAC对Ang Ⅱ诱导的心肌细胞氧化应激的影响 | 第48-50页 |
3.6.2 NAC对Ang Ⅱ诱导的心肌细胞自噬的影响 | 第50-51页 |
3.6.3 NAC对p-Akt、Akt、p-mTOR和mTOR表达的作用 | 第51-52页 |
3.7 NAC联合LUTG对Ang Ⅱ诱导的心肌细胞的影响 | 第52-54页 |
3.7.1 NAC联合LUTG对心肌细胞自噬水平的改变 | 第52-54页 |
3.7.2 NAC联合LUTG对细胞内的p-Akt、Akt、mTOR和p-mTOR蛋白表达的影响 | 第54页 |
3.8 LUTG对Ang Ⅱ诱导的小鼠心肌肥厚的作用 | 第54-56页 |
讨论 | 第56-60页 |
结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第69-70页 |
附件 | 第70-80页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第80页 |