| 摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 符号说明 | 第15-17页 |
| 前言 | 第17-24页 |
| 1. 肿瘤多药耐药性( MDR)的现状与治疗策略 | 第17-21页 |
| 1.1. P-gp与MDR | 第18-19页 |
| 1.2. P-gp与克服肿瘤多药耐药 | 第19-20页 |
| 1.3. PTEN/Akt信号通路与MDR | 第20-21页 |
| 2. 长春新碱及其临床应用现状 | 第21-22页 |
| 2.1. 长春新碱与口腔癌 | 第21页 |
| 2.2. 长春新碱与肿瘤耐药 | 第21-22页 |
| 3. 微管蛋白抑制剂 | 第22-23页 |
| 3.1. 微管蛋白抑制剂与细胞周期 | 第22-23页 |
| 3.2. 秋水仙碱类微管蛋白抑制剂 | 第23页 |
| 4. 本课题的研究内容 | 第23-24页 |
| 实验材料 | 第24-32页 |
| 1. 化合物与药物 | 第24-25页 |
| 2. 细胞株 | 第25页 |
| 3. 试剂 | 第25-27页 |
| 4. 试剂配制 | 第27-30页 |
| 5. 仪器设备 | 第30-32页 |
| 实验方法 | 第32-39页 |
| 1. 细胞培养 | 第32页 |
| 2. 抗肿瘤耐药细胞活性筛选实验 | 第32-33页 |
| 2.1. 耐药倍数测定实验 | 第32页 |
| 2.2. 6a与秋水仙碱抑制耐药细胞生长的活性筛选 | 第32-33页 |
| 3. 细胞生长抑制实验 | 第33页 |
| 4. 克隆形成抑制实验 | 第33-34页 |
| 5. 裸鼠移植瘤生长抑制实验 | 第34页 |
| 6. 罗丹明123胞内蓄积实验 | 第34-35页 |
| 7. 微管蛋白免疫荧光染色实验 | 第35-36页 |
| 8. 细胞周期检测 | 第36页 |
| 9. Hoechst 33342染色实验 | 第36页 |
| 10. Annexin V-FITC/PI双染实验 | 第36-37页 |
| 11. JC-1染色检测线粒体膜通透性实验 | 第37页 |
| 12. Western blotting实验 | 第37-38页 |
| 12.1 蛋白提取实验 | 第37-38页 |
| 12.2 电泳及显影实验 | 第38页 |
| 13. 统计学数据分析 | 第38-39页 |
| 实验结果 | 第39-58页 |
| 1. 抗耐药细胞株的活性筛选 | 第39-41页 |
| 1.1. 耐药倍数的测定结果 | 第39-40页 |
| 1.2. 6a和秋水仙碱对耐药细胞株的生长抑制作用 | 第40-41页 |
| 2. 6a对KB细胞及KB/V细胞的生长抑制作用 | 第41-42页 |
| 3. 6a抑制KB/V细胞的克隆形成 | 第42-44页 |
| 4. 6a抑制裸鼠KB/V移植瘤的生长 | 第44-46页 |
| 5. 6a对KB/V细胞内耐药蛋白P-gp功能和表达的影响 | 第46-48页 |
| 5.1. 6a对KB/V细胞内P-gp外排功能的影响 | 第46-47页 |
| 5.2. 6a对P-gp蛋白表达水平的影响 | 第47-48页 |
| 6. 6a抑制KB/V细胞内微管蛋白的聚合 | 第48-50页 |
| 7. 6a对KB/V细胞周期分布的影响 | 第50-51页 |
| 7.1. 6a 诱导KB/V细胞G2/m期阻滞 | 第50-51页 |
| 7.2. 6a调节KB/V细胞周期相关蛋白的表达 | 第51页 |
| 8. 6a诱导KB/V细胞凋亡 | 第51-55页 |
| 8.1. Hoechst 33342染色法观察细胞核形态学变化 | 第51-52页 |
| 8.2. Annexin V-FITC/PI双染法定量检测细胞凋亡作用 | 第52-53页 |
| 8.3. 6a诱导KB/V细胞凋亡作用的机制研究 | 第53-55页 |
| 9. 6a抑制KB/V细胞内的PTEN/Akt/NF-κB信号通路 | 第55-58页 |
| 讨论 | 第58-63页 |
| 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第76-77页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第77页 |
