摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
英文缩写说明 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-22页 |
1.1 骨骼肌生长发育研究进展 | 第14-16页 |
1.1.1 骨骼肌的形成及发育 | 第15页 |
1.1.2 影响骨骼肌发育的因素 | 第15-16页 |
1.1.3 基因芯片在骨骼肌生长发育研究中的应用 | 第16页 |
1.2 microRNA研究进展 | 第16-22页 |
1.2.1 miRNA的生物学特性及形成 | 第16-17页 |
1.2.2 miRNA与靶基因的作用机理 | 第17-18页 |
1.2.3 miRNA在骨骼肌发育过程中的作用及研究进展 | 第18-19页 |
1.2.4 高通量测序在microRNA研究中的应用 | 第19-22页 |
第二章 湖羊、杜泊×湖羊F1代肌肉组织差异表达miRNA筛选与分析 | 第22-50页 |
2.1 试验动物与样品采集 | 第22页 |
2.2 主要仪器与试剂 | 第22-24页 |
2.2.1 主要仪器设备 | 第22-23页 |
2.2.2 主要试剂 | 第23-24页 |
2.2.3 相关试剂配制 | 第24页 |
2.3 试验方法 | 第24-35页 |
2.3.1 肌肉样品总RNA的提取及质检 | 第24-26页 |
2.3.2 miRNA测序 | 第26-32页 |
2.3.3 定量PCR验证及数据分析 | 第32-35页 |
2.4 结果与分析 | 第35-47页 |
2.4.1 总RNA质检结果 | 第35-37页 |
2.4.2 文库的混合方案及质控 | 第37-39页 |
2.4.3 测序结果 | 第39-44页 |
2.4.4 miR-1、miR-133和oar-miR-299-5p的定量PCR验证 | 第44-47页 |
2.5 讨论 | 第47-50页 |
2.5.1 MicroRNA及其研究方法 | 第47页 |
2.5.2 湖羊、杜泊×湖羊F1代2倍差异表达miRNA及定量结果讨论 | 第47-48页 |
2.5.3 茎-环RT-PCR法定量检测绵羊3种miRNA的表达体系的建立 | 第48-50页 |
第三章 湖羊、杜泊×湖羊F1代肌肉组织总RNA芯片检测及分析 | 第50-86页 |
3.1 试验动物与样品采集 | 第50页 |
3.2 主要仪器与试剂 | 第50-52页 |
3.2.1 主要仪器 | 第50-51页 |
3.2.2 主要试剂 | 第51-52页 |
3.2.3 相关试剂配制 | 第52页 |
3.3 实验方法 | 第52-65页 |
3.3.1 肌肉样品总RNA的提取及质检 | 第52页 |
3.3.2 芯片检测 | 第52-59页 |
3.3.3 差异表达基因的序列分析 | 第59-63页 |
3.3.4 实时荧光定量PCR验证差异表达基因 | 第63-65页 |
3.4 结果与分析 | 第65-82页 |
3.4.1 总RNA的质检结果 | 第65-66页 |
3.4.2 总RNA的混池方案及质控 | 第66页 |
3.4.3 芯片检测结果 | 第66-76页 |
3.4.4 湖羊及杜泊×湖羊F1代羊ACTG2基因的克隆与分析 | 第76-79页 |
3.4.5 ACTG2和 M7ZJ基因的定量PCR验证 | 第79-82页 |
3.5 讨论 | 第82-86页 |
3.5.1 基因芯片的选择 | 第82页 |
3.5.2 信号通路中差异表达基因的定量及影响肌肉发育的因素分析 | 第82-86页 |
第四章 结论 | 第86-88页 |
创新点 | 第88-90页 |
参考文献 | 第90-102页 |
附录 | 第102-118页 |
致谢 | 第118-120页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第120页 |