| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 缩略词 | 第12-13页 |
| 第一篇: 文献综述 | 第13-33页 |
| 第一章: 异种器官移植研究 | 第13-25页 |
| 1 异种器官移植 | 第13-14页 |
| 2 免疫排斥 | 第14-15页 |
| 3 诱导型多能性干细胞 | 第15-16页 |
| 4 糖尿病与胰腺癌 | 第16-18页 |
| 参考文献 | 第18-25页 |
| 第二章: 胰腺发育相关基因与信号通路 | 第25-33页 |
| 1 PDX1基因 | 第25页 |
| 2 HEs1基因 | 第25-27页 |
| 3 NOTCH信号通路 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-33页 |
| 第二篇: 试验部分 | 第33-67页 |
| 第一章: 胰腺特异性表达载体的构建及体外验证 | 第33-55页 |
| 1 材料与方法 | 第33-48页 |
| 1.1 实验材料 | 第33-36页 |
| 1.1.1 质粒与细胞 | 第33页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第33-34页 |
| 1.1.3 实验试剂 | 第34-35页 |
| 1.1.4 试剂配制 | 第35-36页 |
| 1.2 试验方法 | 第36-48页 |
| 1.2.1 引物 | 第36-37页 |
| 1.2.2 家兔DNA的提取 | 第37-38页 |
| 1.2.3 Rabbitβ-globin 3'flanking sequence的扩增与纯化 | 第38-39页 |
| 1.2.4 eGFP的扩增与纯化 | 第39页 |
| 1.2.5 T-A克隆方法 | 第39-40页 |
| 1.2.6 质粒小量提取方法 | 第40-41页 |
| 1.2.7 质粒的酶切和连接 | 第41-42页 |
| 1.2.8 无内毒素质粒大提 | 第42-43页 |
| 1.2.9 载体PDX1-eGFP和PDX1-Hes1的构建 | 第43-44页 |
| 1.2.10 细胞培养与转染 | 第44页 |
| 1.2.11 eGFP荧光观测 | 第44页 |
| 1.2.12 细胞总RNA提取与反转录 | 第44-46页 |
| 1.2.13 细胞蛋白的裂解和蛋白浓度的测定 | 第46页 |
| 1.2.14 Western Blot分析 | 第46-48页 |
| 2 试验结果 | 第48-52页 |
| 2.1 载体PDX1-eGFP和PDX1-Hes1的构建 | 第48-49页 |
| 2.1.1 载体PDX1-eGFP和PDX1-Hes1的结构示意图 | 第48页 |
| 2.1.2 载体PDX1-eGFP的酶切验证 | 第48-49页 |
| 2.2 PDX1介导eGFP胰腺特异性表达的细胞体外试验结果 | 第49-51页 |
| 2.2.1 荧光观察 | 第49页 |
| 2.2.2 RT-PCR半定量检测 | 第49-50页 |
| 2.2.3 Western Blot分析 | 第50-51页 |
| 2.3 PDX1介导Hes1胰腺特异性表达的细胞体外试验结果 | 第51-52页 |
| 2.3.1 RT-PCR半定量检测 | 第51页 |
| 2.3.2 实时荧光定量PCR检测 | 第51页 |
| 2.3.3 Western Blot分析 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-55页 |
| 第二章: 载体PDX1-EGFP和PDX1-HES1在小鼠体内的表达研究 | 第55-67页 |
| 1 材料与方法 | 第55-58页 |
| 1.1 实验材料 | 第55-57页 |
| 1.1.1 试验动物和质粒 | 第55页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第55-56页 |
| 1.1.3 实验试剂 | 第56页 |
| 1.1.4 试剂配制 | 第56-57页 |
| 1.2 试验方法 | 第57-58页 |
| 1.2.1 多模式活体成像系统荧光观察 | 第57页 |
| 1.2.2 组织DNA提取 | 第57页 |
| 1.2.3 组织总RNA提取与反转录 | 第57-58页 |
| 1.2.4 组织蛋白的裂解和蛋白浓度的测定 | 第58页 |
| 1.2.5 Western Blot分析 | 第58页 |
| 2 试验结果 | 第58-62页 |
| 2.1 转基因小鼠的生产及DNA鉴定结果 | 第58-59页 |
| 2.2 PDX1介导eGFP胰腺特异性表达的小鼠体内试验结果 | 第59-60页 |
| 2.2.1 多模式活体成像系统荧光观察 | 第59页 |
| 2.2.2 RT-PCR半定量检测 | 第59页 |
| 2.2.3 Western Blot分析 | 第59-60页 |
| 2.3 PDX1介导Hes1胰腺特异性表达的小鼠体内试验结果 | 第60-62页 |
| 2.3.1 解剖观察 | 第60-61页 |
| 2.3.2 RT-PCR半定量检测 | 第61页 |
| 2.3.3 实时荧光定量PCR检测 | 第61-62页 |
| 2.3.4 Western Blot分析 | 第62页 |
| 3 讨论 | 第62-65页 |
| 参考文献 | 第65-67页 |
| 全文结论 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69-71页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第71页 |
