| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略语中英文对照(Abbreviation) | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-28页 |
| 1. 热应激 | 第14-20页 |
| 1.1. 奶牛热应激 | 第14-15页 |
| 1.2. 热休克蛋白 | 第15页 |
| 1.3. 热休克蛋白的结构与分类 | 第15-16页 |
| 1.4. HSP70 | 第16-17页 |
| 1.5. HSP70对线粒体通路的调控 | 第17-18页 |
| 1.6. 热应激对细胞的影响 | 第18-20页 |
| 2. 乳腺氨基酸代谢 | 第20-23页 |
| 2.1. 乳腺发育与奶牛乳腺上皮细胞系的建立 | 第20-21页 |
| 2.2. 氨基酸对乳蛋白合成的影响 | 第21-22页 |
| 2.3. 乳腺氨基酸的代谢 | 第22-23页 |
| 3. 蛋氨酸的抗应激作用 | 第23-28页 |
| 3.1. 蛋氨酸概述 | 第23-25页 |
| 3.2. 蛋氨酸与乳腺上皮细胞 | 第25页 |
| 3.3. 蛋氨酸与细胞应激 | 第25-28页 |
| 第二章 蛋氨酸对热处理及非热处理奶牛乳腺上皮细胞增殖、抗氧化性能的影响 | 第28-42页 |
| 1. 材料与方法 | 第28-29页 |
| 1.1. 试验地点及时间 | 第28-29页 |
| 1.2. 试验材料与方法 | 第29页 |
| 1.3. 试验动物 | 第29页 |
| 1.4. 试剂 | 第29页 |
| 1.5. 主要仪器 | 第29页 |
| 2. 试验方法 | 第29-33页 |
| 2.1. 奶牛乳腺上皮细胞的培养 | 第29-30页 |
| 2.2. 乳腺上皮细胞的纯化、传代 | 第30页 |
| 2.3. 奶牛乳腺上皮细胞的角蛋白18的鉴定 | 第30-31页 |
| 2.4. 实验分组及处理 | 第31页 |
| 2.5. MTT法测蛋氨酸对热应激下乳腺细胞增殖的影响 | 第31-32页 |
| 2.6. 奶牛乳腺上皮细胞自由基的检测 | 第32页 |
| 2.7. 奶牛乳腺上皮细胞抗氧化酶活性测定 | 第32-33页 |
| 3. 数据分析 | 第33页 |
| 4. 结果与分析 | 第33-40页 |
| 4.1. 奶牛乳腺上皮细胞的形态学鉴定 | 第33-35页 |
| 4.2. 细胞免疫化学检测乳腺上皮细胞表面标志 | 第35页 |
| 4.3. 蛋氨酸对热处理及非热处理乳腺上皮细胞活力的影响 | 第35-36页 |
| 4.4. 蛋氨酸对热处理及非热处理乳腺上皮细胞自由基的影响 | 第36-38页 |
| 4.5. 蛋氨酸对热处理及非热处理乳腺上皮细胞抗氧化酶活性的影响 | 第38-40页 |
| 5. 讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 蛋氨酸对热处理及非热处理乳腺上皮细胞凋亡、相关基因及蛋白表达的影响 | 第42-62页 |
| 1. 材料与方法 | 第42-44页 |
| 1.1. 试验地点及时间 | 第42页 |
| 1.2. 试验材料与方法 | 第42页 |
| 1.3. 试验动物 | 第42-43页 |
| 1.4. 试剂 | 第43页 |
| 1.5. 主要仪器 | 第43-44页 |
| 2. 试验方法 | 第44-49页 |
| 2.1. 流式细胞仪检测奶牛乳腺上皮细胞凋亡 | 第44页 |
| 2.2. Hoechst33342/PI荧光染色 | 第44页 |
| 2.3. 实时荧光定量PCR分析HSF-1mRNA、HSP70mRNA和Bax/Bcl-2mRNA的表达 | 第44-47页 |
| 2.4. Western blot检测HSP70蛋白的表达 | 第47-48页 |
| 2.5. Caspase-3活性分析 | 第48-49页 |
| 3. 数据分析 | 第49页 |
| 4. 结果与分析 | 第49-59页 |
| 4.1. 蛋氨酸对热处理及非热处理乳腺上皮细胞凋亡的影响 | 第49-53页 |
| 4.2. Hoechst33342/PI荧光染色 | 第53-54页 |
| 4.3. 蛋氨酸对热处理及非热处理乳腺上皮细胞HSF-1mRNA、HSP70mRNA和Bax/Bcl-2mRNA表达的影响 | 第54-56页 |
| 4.4. 蛋氨酸对热处理及非热处理乳腺上皮细胞HSP70蛋白表达的影响 | 第56-58页 |
| 4.5. 蛋氨酸对热处理及非热处理乳腺上皮细胞Caspase-3活性的影响 | 第58-59页 |
| 5. 讨论 | 第59-62页 |
| 全文结论 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-80页 |
