首页--生物科学论文--分子生物学论文--基因工程(遗传工程)论文

小鼠受精卵显微注射技术的优化以及Trex1敲除小鼠的构建

中文摘要第2-3页
Abstract第3-4页
中文文摘第5-11页
绪论第11-19页
    一、转基因动物概述第11-13页
        (一) 转基因动物制备方法第11页
        (二) 基因动物的应用与进展第11-13页
    二、显微注射技术概述第13-14页
    三、CRISPR/Cas9基因编辑系统概述第14-16页
    四、Trex1基因概述第16-18页
    五、研究目的及意义第18-19页
        (一) 研究目的第18页
        (二) 研究意义第18-19页
第一章 材料与方法第19-41页
    1.1 实验动物第19页
    1.2 细胞系第19页
    1.3 实验仪器第19-21页
    1.4 实验试剂及药品第21-22页
        1.4.1 载体构建及验证阶段主要试剂第21-22页
        1.4.2 注射阶段主要试剂第22页
    1.5 主要试剂的配制第22-24页
        1.5.1 载体构建及验证阶段主要试剂的配制第22-24页
        1.5.2 注射阶段主要试剂的配制第24页
    1.6 实验方法第24-34页
        1.6.1 敲除载体的制备第24-27页
        1.6.2 敲除载体在细胞水平上的验证第27-34页
        1.6.3 sg1RNA及Cas9 mRNA的体外转录第34页
    1.7 制作不育雄鼠的输精管切除术第34页
    1.8 受精卵的获取第34-36页
    1.9 显微注射第36-37页
        1.9.1 显微注射前的准备第36-37页
        1.9.2 显微注射操作第37页
    1.10 输卵管内胚胎移植第37-39页
    1.11 术后小鼠的饲养第39页
    1.12 转基因小鼠的鉴定第39-41页
        1.12.1 基因型鉴定第39页
        1.12.2 WB实验检测生理生化指标第39-41页
第二章 实验结果第41-53页
    第一节 敲除载体构建及验证第41-45页
        2.1 载体构建第41-42页
        2.2 载体验证第42-45页
            2.2.1 细胞转染效率第42页
            2.2.2 对转染敲除质粒的L929细胞进行PCR验证的结果第42-44页
            2.2.3 细胞株的建立第44页
            2.2.4 对细胞株进行PCR验证以及WB检测的结果第44-45页
    第二节 小鼠受精卵显微注射体系的建立第45-50页
        2.3 不同周龄小鼠超数排卵的效果第45-47页
        2.4 不同注射部位对小鼠受精卵显微注射效果的影响第47-48页
        2.5 不同注射液浓度对获得转基因小鼠效率的影响第48-49页
        2.6 不同注射液对获得转基因小鼠效率的影响第49-50页
    第三节 基因敲除小鼠的鉴定与分析第50-53页
        2.7 Trex1敲除小鼠基因型鉴定结果分析第50-51页
        2.8 Trex1敲除小鼠生理生化指标检测结果第51-53页
            2.8.1 小鼠表型分析第51-52页
            2.8.2 WB检测结果分析第52-53页
第三章 分析与讨论第53-59页
    3.1 敲除载体构建及验证第53页
    3.2 小鼠受精卵显微注射体系的建立第53-56页
        3.2.1 不同周龄小鼠超数排卵的效果第53-54页
        3.2.2 不同注射部位对小鼠受精卵显微注射效果的影响第54-55页
        3.2.3 不同注射液浓度对获得转基因小鼠效率的影响第55页
        3.2.4 不同注射液成份对获得转基因小鼠效率的影响第55-56页
    3.3 Trex1基因敲除小鼠的鉴定第56-59页
        3.3.1 Trex1敲除小鼠基因型鉴定结果分析第56-57页
        3.3.2 Trex1敲除小鼠生理生化指标检测结果第57-59页
第四章 结论第59-61页
附录1第61-63页
附录2第63-65页
参考文献第65-71页
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果第71-73页
致谢第73-75页
个人简历第75-79页

论文共79页,点击 下载论文
上一篇:基于“3S”技术的福建罗源霍口水库工程植被调查与评价
下一篇:固定化聚磷菌薄片制备及其除磷效果的研究