符号说明 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 引言 | 第12-21页 |
·锌指抗病毒蛋白概述 | 第12-15页 |
·锌指蛋白的概述及分类 | 第12页 |
·CCCH型锌指抗病毒蛋白的发现 | 第12页 |
·CCCH型锌指抗病毒蛋白的抗病毒机制 | 第12页 |
·CCCH型锌指抗病毒蛋白特异性降解外源mRNA的机制 | 第12-14页 |
·CCCH型锌指抗病毒蛋白的研究展望 | 第14-15页 |
·ALV-J病毒概述 | 第15-17页 |
·ALV-J的发现及分类 | 第15页 |
·ALV-J的病毒结构特征 | 第15-16页 |
·ALV-J的致病性及对生产的影响 | 第16-17页 |
·ALV-J的防治 | 第17页 |
·慢病毒重组载体概述 | 第17-20页 |
·慢病毒生物学基础 | 第17-18页 |
·基因治疗中的慢病毒载体 | 第18-19页 |
·慢病毒载体的治疗前景 | 第19-20页 |
·本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-39页 |
·实验材料 | 第21-22页 |
·细胞、病毒和实验动物 | 第21页 |
·实验试剂 | 第21页 |
·实验设备 | 第21-22页 |
·试验地点 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-39页 |
·锌指抗病毒蛋白克隆 | 第22-23页 |
·慢病毒重组载体的构建 | 第23-25页 |
·慢病毒重组载体转染DF-1 | 第25页 |
·慢病毒重组载体转染效果及chZAP超表达检测 | 第25-26页 |
·ALV-J感染DF-1 | 第26页 |
·Real-time PCR检测ALV-J和chZAP | 第26-29页 |
·chZAP的原核表达 | 第29-31页 |
·原核表达复性chZAP体外抗病毒效果检测 | 第31-33页 |
·chZAP多克隆抗体 | 第33页 |
·免疫组化检测chZAP及ALV-J的组织分布和定位 | 第33-35页 |
·ALV-J感染鸡各组织器官组织病理学观察 | 第35-36页 |
·荧光定量PCR检测chZAP及ALV-J转录水平 | 第36-39页 |
3 结果与分析 | 第39-57页 |
·chZAP基因获取与分析 | 第39-41页 |
·PCR获取chZAP基因 | 第39页 |
·chZAP序列分析 | 第39-41页 |
·重组载体转染效果及chZAP超表达水平检测 | 第41-43页 |
·荧光检测 | 第41-42页 |
·Western blot检测 | 第42-43页 |
·超表达chZAP体外抑制ALV-J的复制 | 第43-44页 |
·chZAP细胞内转录水平检测 | 第43页 |
·NX0101细胞内转录水平检测 | 第43-44页 |
·chZAP基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第44-45页 |
·纯化chZAP的SDS-PAGE | 第45页 |
·纯化chZAP Western blot检测 | 第45页 |
·BCA法进行chZAP浓度测定 | 第45-46页 |
·BCA蛋白定量法标准曲线的制备 | 第45-46页 |
·原核表达chZAP浓度的测定 | 第46页 |
·原核表达chZAP抗病毒效果检测 | 第46-47页 |
·chZAP多克隆抗体效价的测定 | 第47-48页 |
·chZAP及ALV-J的组织分布和定位 | 第48-53页 |
·正常SPF鸡chZAP组织分布及定位 | 第48-52页 |
·ALV-J感染鸡chZAP及gp85组织分布及定位 | 第52-53页 |
·ALV-J感染鸡各组织器官组织病理学观察 | 第53页 |
·荧光定量PCR检测chZAP及NX0101转录水平 | 第53-57页 |
·标准曲线的建立 | 第53-55页 |
·正常SPF鸡和ALV-J感染鸡chZAP转录水平检测 | 第55页 |
·ALV-J感染鸡NX0101转录水平检测 | 第55-57页 |
4 讨论 | 第57-60页 |
5 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
攻读硕士学位期间发表论文 | 第70页 |