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鸡CCCH型ZAP抑制J亚群禽白血病病毒复制及对其组织嗜性影响的研究

符号说明第1-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-12页
1 引言第12-21页
   ·锌指抗病毒蛋白概述第12-15页
     ·锌指蛋白的概述及分类第12页
     ·CCCH型锌指抗病毒蛋白的发现第12页
     ·CCCH型锌指抗病毒蛋白的抗病毒机制第12页
     ·CCCH型锌指抗病毒蛋白特异性降解外源mRNA的机制第12-14页
     ·CCCH型锌指抗病毒蛋白的研究展望第14-15页
   ·ALV-J病毒概述第15-17页
     ·ALV-J的发现及分类第15页
     ·ALV-J的病毒结构特征第15-16页
     ·ALV-J的致病性及对生产的影响第16-17页
     ·ALV-J的防治第17页
   ·慢病毒重组载体概述第17-20页
     ·慢病毒生物学基础第17-18页
     ·基因治疗中的慢病毒载体第18-19页
     ·慢病毒载体的治疗前景第19-20页
   ·本研究的目的和意义第20-21页
2 材料与方法第21-39页
   ·实验材料第21-22页
     ·细胞、病毒和实验动物第21页
     ·实验试剂第21页
     ·实验设备第21-22页
     ·试验地点第22页
   ·实验方法第22-39页
     ·锌指抗病毒蛋白克隆第22-23页
     ·慢病毒重组载体的构建第23-25页
     ·慢病毒重组载体转染DF-1第25页
     ·慢病毒重组载体转染效果及chZAP超表达检测第25-26页
     ·ALV-J感染DF-1第26页
     ·Real-time PCR检测ALV-J和chZAP第26-29页
     ·chZAP的原核表达第29-31页
     ·原核表达复性chZAP体外抗病毒效果检测第31-33页
     ·chZAP多克隆抗体第33页
     ·免疫组化检测chZAP及ALV-J的组织分布和定位第33-35页
     ·ALV-J感染鸡各组织器官组织病理学观察第35-36页
     ·荧光定量PCR检测chZAP及ALV-J转录水平第36-39页
3 结果与分析第39-57页
   ·chZAP基因获取与分析第39-41页
     ·PCR获取chZAP基因第39页
     ·chZAP序列分析第39-41页
   ·重组载体转染效果及chZAP超表达水平检测第41-43页
     ·荧光检测第41-42页
     ·Western blot检测第42-43页
   ·超表达chZAP体外抑制ALV-J的复制第43-44页
     ·chZAP细胞内转录水平检测第43页
     ·NX0101细胞内转录水平检测第43-44页
   ·chZAP基因在大肠杆菌中的诱导表达第44-45页
   ·纯化chZAP的SDS-PAGE第45页
   ·纯化chZAP Western blot检测第45页
   ·BCA法进行chZAP浓度测定第45-46页
     ·BCA蛋白定量法标准曲线的制备第45-46页
     ·原核表达chZAP浓度的测定第46页
   ·原核表达chZAP抗病毒效果检测第46-47页
   ·chZAP多克隆抗体效价的测定第47-48页
   ·chZAP及ALV-J的组织分布和定位第48-53页
     ·正常SPF鸡chZAP组织分布及定位第48-52页
     ·ALV-J感染鸡chZAP及gp85组织分布及定位第52-53页
   ·ALV-J感染鸡各组织器官组织病理学观察第53页
   ·荧光定量PCR检测chZAP及NX0101转录水平第53-57页
     ·标准曲线的建立第53-55页
     ·正常SPF鸡和ALV-J感染鸡chZAP转录水平检测第55页
     ·ALV-J感染鸡NX0101转录水平检测第55-57页
4 讨论第57-60页
5 结论第60-61页
参考文献第61-69页
致谢第69-70页
攻读硕士学位期间发表论文第70页

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