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光皮桦BlOFPs基因的克隆及其功能研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
目录第8-12页
引言第12-13页
第一章 文献综述第13-21页
   ·木材形成机制研究进展第13-15页
     ·木材的形成第13页
     ·木材形成的分子机制研究进展第13-15页
   ·OFPs 基因研究进展第15-16页
   ·光皮桦研究进展第16-19页
     ·天然种群特征与结构第16-17页
     ·栽培生物学特性第17页
     ·繁殖技术研究第17-18页
     ·常规遗传改良研究第18-19页
     ·分子生物学相关研究第19页
   ·研究的目的与意义第19-21页
第二章 光皮桦 BlOFPs 基因的克隆及序列分析第21-32页
   ·材料与方法第21-27页
     ·材料第21页
     ·总 RNA 的提取与检测第21-22页
     ·cDNA 的合成第22-23页
     ·目的基因的分离与验证第23-26页
       ·目的基因 RACE第23-24页
       ·目的片段的回收第24页
       ·目的片段的连接转化第24-25页
       ·全长 cDNA 的 PCR 验证第25-26页
     ·BlOFPs 生物信息学分析第26-27页
   ·结果分析第27-30页
     ·BlOFPs 全长 cDNA 序列分析第27页
     ·BlOFPs 氨基酸序列分析第27-29页
     ·BlOFPs 基因家族进化树分析第29-30页
   ·讨论第30-32页
第三章 光皮桦 BlOFPs 基因的表达分析第32-47页
   ·材料与方法第32-39页
     ·材料第32-33页
     ·激素处理第33页
     ·应拉木诱导处理第33页
     ·总 RNA 的提取与检测第33页
     ·cDNA 的合成第33页
     ·定量 PCR 表达分析第33-34页
     ·组织原位杂交表达分析第34-39页
       ·组织的固定与包埋第34-35页
       ·探针设计与标记第35-38页
       ·切片及杂交第38-39页
   ·结果分析第39-45页
     ·不同器官中 BlOFPs 的表达差异第39-41页
     ·不同组织中 BlOFPs 的表达差异第41-44页
       ·定量 PCR 分析第41页
       ·原位杂交分析第41-44页
     ·激素处理对 BlOFPs 的表达影响第44页
     ·力学胁迫对 BlOFPs 的表达影响第44-45页
   ·讨论第45-47页
第四章 光皮桦 BlOFP 与 BlKNOX 蛋白的互作分析第47-58页
   ·材料与方法第47-50页
     ·材料第47页
     ·酵母表达载体构建第47-49页
       ·酶切连接法第47页
       ·同源重组法第47-49页
     ·酵母感受态细胞制备与转化第49页
       ·酵母感受态细胞制备第49页
       ·酵母转化第49页
     ·自激活检测第49-50页
     ·酵母双杂交第50页
     ·定量 PCR 分析第50页
   ·结果分析第50-56页
     ·酶母表达载体的构建及鉴定第50-52页
     ·酵母表达载体自激活检测第52-55页
     ·BlOFP 与 BlKNOX 蛋白互作分析第55页
     ·BlOFP 与互作蛋白 BlKNOX 表达相关分析第55-56页
   ·讨论第56-58页
第五章 光皮桦 BlOFPs 基因的遗传转化第58-68页
   ·材料与方法第58-61页
     ·材料第58页
     ·超表达载体构建第58页
     ·载体质粒转化农杆菌第58-59页
       ·农杆菌电转感受态的制备第58-59页
       ·农杆菌电转化第59页
     ·农杆菌叶盘法转化光皮桦第59-60页
       ·叶片预培养第59-60页
       ·农杆菌培养第60页
       ·转化与共培养第60页
       ·筛选培养第60页
       ·生根培养第60页
     ·转基因阳性植株的鉴定第60-61页
       ·GUS 检测第60-61页
       ·转基因植株 PCR 检测第61页
     ·ISSA(Induced Somatic Sector Analysis)第61页
       ·农杆菌的转化第61页
       ·转化材料的收获及 GUS 检测第61页
   ·结果分析第61-66页
     ·超表达载体的构建及鉴定第61-62页
     ·阳性植株的筛选及鉴定第62-65页
       ·阳性植株的筛选第62-64页
       ·阳性植株的 DNA 检测第64页
       ·转基因植株表型观察第64-65页
     ·ISSA 结果与分析第65-66页
       ·转化后窗口变化特征第65-66页
       ·嵌合体的 GUS 检测第66页
   ·讨论第66-68页
结论与展望第68-70页
   ·主要研究结果第68-69页
   ·研究展望第69-70页
参考文献第70-80页
附录第80-81页
个人简介及论文发表情况和社会实践及学术交流活动第81-82页
致谢第82页

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