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光皮桦HD-zipⅢ基因的克隆及功能研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
引言第11-12页
第一章 文献综述第12-21页
   ·光皮桦研究进展第12-14页
   ·HD-zip Ⅲ 基因研究进展第14-20页
     ·HD‐zip Ⅲ 基因的结构第14-15页
     ·HD‐zip Ⅲ 基因的功能第15-17页
     ·影响 HD‐zip Ⅲ 表达的因素第17-20页
   ·研究的目的和意义第20-21页
第二章 光皮桦 HD-zip Ⅲ 基因的克隆与亚细胞定位第21-40页
   ·材料与方法第21-31页
     ·植物材料第21页
     ·RNA 的提取第21页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测 RNA第21-22页
     ·反转录 cDNA 第一链的合成第22-23页
     ·目的基因全长 cDNA 的分离第23-26页
       ·5' RACE 及 3' RACE第23-24页
       ·HD-zipⅢ 基因序列的验证第24页
       ·凝胶回收第24页
       ·连接反应第24-25页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化第25页
       ·大肠杆菌感受态细胞的转化第25页
       ·序列测定第25页
       ·序列比较和分析第25-26页
     ·B lHD‐zip Ⅲ 基因 miR166 靶位点的验证第26-28页
       ·总 RNA 提取和浓缩(同上)第26页
       ·第一链 cDNA 合成(First-Strand cDNA Synthesis)第26-27页
       ·引物设计第27页
       ·Rapid Amplification of cDNA Ends (RACE)反应第27-28页
       ·目的基因片段的分离第28页
     ·BlHD‐zipⅢ 基因亚细胞定位第28-31页
       ·亚细胞定位载体的构建第28-29页
       ·BlHD-zipⅢ 基因亚细胞定位第29-31页
   ·结果与分析第31-38页
     ·BlHD‐zip Ⅲ 基因的克隆及序列分析第31-36页
     ·BlHD‐zip Ⅲ 基因 miR166 靶位点的验证第36-37页
     ·BlHD‐zip Ⅲ 基因的亚细胞定位分析第37-38页
   ·讨论第38-40页
第三章 光皮桦 HD-zip Ⅲ 基因的表达分析第40-49页
   ·材料与方法第40-42页
     ·实验材料第40页
     ·RNA 的提取及 cDNA 第一链的合成第40页
     ·荧光定量 PCR第40-41页
     ·石蜡切片第41-42页
   ·结果与分析第42-46页
     ·BlHD‐zip Ⅲ 在不同组织器官中的表达第42-43页
     ·BlHD‐zip Ⅲ 在不同发育阶段的芽、叶及嫩茎中的表达第43-44页
     ·BlHD‐zipⅢ 在光皮桦实生苗中的表达第44-45页
     ·BlHD‐zipⅢ 在光皮桦茎中的表达第45-46页
       ·茎段的石蜡切片图第45-46页
       ·BlHD-zipⅢ 在茎不同部位中的表达第46页
   ·讨论第46-49页
第四章 激素处理及应拉木中 BlHD-zipⅢ 的表达第49-58页
   ·材料与方法第49-51页
     ·实验材料第49页
     ·激素处理第49页
     ·Tension wood 激素处理第49-50页
     ·总 RNA 的提取第50页
     ·cDNA 第一链的合成第50页
     ·荧光定量 PCR第50-51页
   ·结果与分析第51-56页
     ·激素处理下 BlHD‐zip Ⅲ 的表达第51-53页
     ·光皮桦应拉木模型的初步建立第53-55页
     ·BlHD‐zipⅢ 在激素处理应拉木中的表达第55-56页
   ·讨论第56-58页
第五章 表达载体的构建及遗传转化第58-63页
   ·材料与方法第58-61页
     ·实验材料第58页
     ·菌株和质粒第58页
     ·表达载体的构建与鉴定第58-59页
     ·农杆菌感受态的制备第59页
     ·重组质粒转化农杆菌第59-60页
     ·农杆菌介导的拟南芥遗传转化第60页
       ·拟南芥的无土培养第60页
       ·浸花法转化拟南芥第60页
     ·拟南芥 DNA 的提取第60-61页
   ·结果与分析第61-62页
     ·过表达载体的鉴定第61-62页
       ·质粒 PCR 鉴定第61页
       ·测序鉴定结果第61-62页
     ·转基因阳性植株 DNA 水平的鉴定第62页
   ·结论第62-63页
第六章 结论第63-64页
附录第64-65页
参考文献第65-72页
个人简介第72页
论文发表情况第72页
社会实践或学术交流活动第72-73页
致谢第73页

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