| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 引言 | 第9-16页 |
| 一、本论文的研究背景和立题依据 | 第9-14页 |
| （一） WT1 简介及研究背景 | 第9-14页 |
| （二） 立题依据 | 第14页 |
| 二、本论文的研究内容和意义 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-49页 |
| 一、染色质重塑与转录调控 | 第16-17页 |
| （一） 核小体结构和转录 | 第16页 |
| （二） 组蛋白修饰酶类重塑复合物 | 第16-17页 |
| （三） 依赖 ATP 的重塑复合物 | 第17页 |
| 二、组蛋白密码假说 | 第17-22页 |
| （一） 表观遗传密码 | 第18-19页 |
| （二） 组蛋白修饰的动力学 | 第19页 |
| （三） 组蛋白密码的建立 | 第19-20页 |
| （四） 组蛋白翻译后修饰与染色质的转录状态 | 第20页 |
| （五） 组蛋白密码的阅读 | 第20-21页 |
| （六） 利用组蛋白密码：新的治疗途径 | 第21-22页 |
| 三、组蛋白乙酰转移酶 | 第22-29页 |
| （一） 组蛋白乙酰转移酶的分类 | 第22页 |
| （二） 组蛋白乙酰转移酶及其复合物的生物学功能 | 第22-29页 |
| 四、组蛋白去乙酰化酶 | 第29-35页 |
| （一） 组蛋白去乙酰化酶的分类 | 第29-30页 |
| （二） 组蛋白去乙酰化酶的生物学功能 | 第30-34页 |
| （三） HDAC 抑制剂和sirtuins 家族的小分子抑制剂 | 第34-35页 |
| 五、组蛋白乙酰转移酶p300/CBP的结构和功能 | 第35-44页 |
| （一） p300/CBP 的结构 | 第36页 |
| （二） p300/CBP 的作用机制 | 第36-39页 |
| （三） p300/CBP 活性的调控 | 第39页 |
| （四） p300/CBP 在细胞增殖、分化和凋亡中的作用 | 第39-41页 |
| （五） p300/CBP 与癌症 | 第41页 |
| （六） p300/CBP 与神经退行性疾病 | 第41-42页 |
| （七） p300/CBP 在白细胞介素基因表达调控中的作用 | 第42-44页 |
| 六、WT1 的生物学功能 | 第44-49页 |
| （一） WT1 在正常及异常发育中的作用 | 第44-48页 |
| （二） WT1 与其它恶性肿瘤 | 第48-49页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第49-57页 |
| 一、实验材料 | 第49页 |
| （一） 细胞 | 第49页 |
| （二） 主要试剂 | 第49页 |
| 二、实验方法 | 第49-57页 |
| （一） HeLa 细胞基因组DNA 提取 | 第49页 |
| （二） 分子克隆 | 第49页 |
| （三） 质粒大量制备的方法 | 第49-51页 |
| （四） 哺乳动物细胞培养 | 第51页 |
| （五） 哺乳动物细胞转染及相对荧光素酶活性测定 | 第51-52页 |
| （六） 哺乳动物细胞总RNA 的提取 | 第52-54页 |
| （七） 逆转录PCR (RT-PCR) | 第54-55页 |
| （八） 染色质免疫沉淀实验（Chromatin immunoprecipitation, ChIP） | 第55-57页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第57-83页 |
| 一、重组质粒的构建及鉴定 | 第57-60页 |
| （一） WT1 报告基因质粒的构建及鉴定 | 第57-59页 |
| （二） 缺失突变质粒的构建及鉴定 | 第59-60页 |
| 二、组蛋白乙酰转移酶p300/CBP 在WT1 基因转录调控中的作用 | 第60-73页 |
| （一） 检测时间的确定 | 第60-61页 |
| （二） p300/CBP 参与了WT1 基因的转录激活 | 第61-64页 |
| （三） p300/CBP 参与WT1 基因转录激活的机制 | 第64-73页 |
| 三、组蛋白乙酰转移酶P/CAF 在WT1 基因转录调控中的作用 | 第73-77页 |
| （一） 组蛋白乙酰转移酶P/CAF 参与WT1 基因的表达调控 | 第73页 |
| （二） p300 和P/CAF 能协同促进WT1 基因的表达 | 第73-74页 |
| （三） p300/CBP 和P/CAF 的协同作用增强了c-Myb 介导的WT1 基因的转录 | 第74-75页 |
| （四） p300 和P/CAF 的HAT 活性在c-Myb 介导的WT1 基因转录激活中都非常重要 | 第75-77页 |
| 四、组蛋白去乙酰化酶在WT1 基因转录调控中的作用 | 第77-83页 |
| （一） 在人HDAC1-6 中，只有HDAC4 和HDAC5 能抑制WT1 启动子荧光素酶报告基因的表达 | 第77-78页 |
| （二） HDAC4 和HDAC5 以剂量依赖的方式抑制WT1 启动子报告基因的激活 | 第78-79页 |
| （三） HDAC4 和HDAC5 能抑制p300 对WT1 转录激活的增强作用 | 第79-80页 |
| （四） HDAC4 和 HDAC5 能抑制p300 和c-Myb 在 WT1 转录激活中的协同作用 | 第80-81页 |
| （五） 过表达的HDAC4 或HDAC5 下调了内源WT1m RNA 的表达水平 | 第81-83页 |
| 第四章 讨论 | 第83-89页 |
| 一、组蛋白乙酰转移酶p300/CBP、P/CAF 和组蛋白去乙酰化酶 HDAC4 及 HDAC5 都参与了WT1基因的转录调控 | 第83-84页 |
| 二、转录辅因子和转录因子协同促进WT1 基因的转录激活 | 第84-85页 |
| 三、组蛋白乙酰转移酶p300/CBP 参与WT1 基因表达调控的分子机制 | 第85-86页 |
| （一） 组蛋白乙酰转移酶p300/CBP 的 HAT 活性在 WT1 基因表达调控中起重要作用 | 第85页 |
| （二） p300/CBP 通过乙酰化转录因子从而促进WT1 基因的转录 | 第85-86页 |
| （三） p300/CBP 作为桥蛋白和支架蛋白发挥作用 | 第86页 |
| 四、组蛋白乙酰转移酶p300/CBP 和P/CAF 的协同作用促进了WT1 基因的转录 | 第86-87页 |
| 五、组蛋白可逆的乙酰化修饰参与了WT1 基因的转录调控过程 | 第87-88页 |
| 六、WT1 基因表达调控的简单模型 | 第88-89页 |
| 结论和创新点 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-105页 |
| 附录 | 第105-106页 |
| 后记 | 第106-107页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第107页 |
