| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-13页 |
| ·灵菌红素的性质 | 第7页 |
| ·灵菌红素的作用 | 第7-8页 |
| ·灵菌红素生产菌株 | 第8页 |
| ·灵菌红素的合成途径 | 第8-9页 |
| ·灵菌红素合成基因的研究现状 | 第9页 |
| ·温度对粘质沙雷氏菌合成灵菌红素的影响 | 第9页 |
| ·蛋白质组学研究进展 | 第9-12页 |
| ·蛋白质组学概述 | 第9-10页 |
| ·蛋白质组学主要研究技术 | 第10-11页 |
| ·微生物蛋白质组学研究进展 | 第11-12页 |
| ·启动子和报告基因概述 | 第12页 |
| ·本研究的立题背景和研究内容 | 第12-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-24页 |
| ·实验材料 | 第13-16页 |
| ·主要仪器 | 第13页 |
| ·主要试剂 | 第13-14页 |
| ·菌株和载体 | 第14页 |
| ·引物设计及合成 | 第14-15页 |
| ·主要溶液的配制 | 第15-16页 |
| ·实验方法 | 第16-24页 |
| ·利用 2-DE 分离不同发酵温度下 S. marcecens JNB5-1 的差异蛋白质 | 第16-18页 |
| ·蛋白质谱鉴定 | 第18页 |
| ·RT-qPCR 检测差异蛋白的转录水平 | 第18-20页 |
| ·基因 pigF 和 pigN 启动子功能分析 | 第20-21页 |
| ·氧甲基转移酶(PigF)的克隆、表达及纯化 | 第21-22页 |
| ·氧甲基转移酶(PigF)活力的测定 | 第22页 |
| ·PigF 酶学性质的研究 | 第22-24页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第24-39页 |
| ·温度对 S. marcecens JNB5-1 合成灵菌红素的影响 | 第24-25页 |
| ·不同温度条件下 S. marcecens JNB5-1 的蛋白质组学研究 | 第25-29页 |
| ·不同温度条件下 S. marcecens JNB5-1 全细胞蛋白的双向电泳图谱分析 | 第25-26页 |
| ·显著差异蛋白的质谱鉴定 | 第26-27页 |
| ·差异蛋白功能分析 | 第27-29页 |
| ·关键差异蛋白转录水平分析 | 第29-30页 |
| ·RNA 纯度和完整性分析 | 第29页 |
| ·RT-qPCR | 第29-30页 |
| ·关键差异蛋白编码基因上游启动子功能分析 | 第30-33页 |
| ·启动子结构的确定及在线分析 | 第30-31页 |
| ·启动子探测载体的构建 | 第31-32页 |
| ·不同温度下启动子强度分析 | 第32-33页 |
| ·重组 PigF 的克隆、表达及纯化 | 第33-35页 |
| ·pigF 的克隆及分析 | 第33-34页 |
| ·重组表达载体 pET-28a(+)-pigF 的构建 | 第34页 |
| ·pigF 在大肠杆菌中的表达与重组蛋白的纯化 | 第34-35页 |
| ·重组 PigF 酶学性质的初步研究 | 第35-39页 |
| ·重组 PigF 的最适反应 pH 及 pH 稳定性研究 | 第35-36页 |
| ·重组 PigF 的最适反应温度及热稳定性研究 | 第36-37页 |
| ·金属离子及 EDTA 对重组 PigF 的影响 | 第37-38页 |
| ·重组 PigF 的 Km及 Vmax值的测定 | 第38-39页 |
| 主要结论与展望 | 第39-40页 |
| 主要结论 | 第39页 |
| 展望 | 第39-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第45页 |
