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棉花响应黄萎病菌分子机制的蛋白质组学研究及HDTF1基因的功能鉴定

摘要第1-10页
Abstract第10-13页
縮略语表第13-14页
1 文献综述第14-29页
   ·植物抗病反应机制第14-18页
     ·植物的先天免疫反应第14-15页
     ·R基因介导的抗性第15页
     ·水杨酸和茉莉酸介导的抗性第15-16页
     ·BRs介导的抗性第16-17页
     ·其它激素介导的抗性第17-18页
   ·棉花抗黄萎病研究进展第18-21页
     ·黄萎病菌及致病机理第18-19页
     ·棉花的组织结构抗性第19页
     ·棉花的理化抗性第19-20页
     ·Vel介导的抗性第20-21页
     ·激素介导的抗性第21页
   ·VIGS在植物功能基因组中的应用第21-23页
   ·植物蛋白质组学研究进展第23-28页
     ·蛋白质组学研究技术与方法第23-25页
     ·植物蛋白质组学的应用第25-27页
     ·蛋白质组学在棉花中的应用第27-28页
   ·本课题的研究目的及意义第28-29页
2 材料方法第29-40页
   ·实验材料第29页
   ·实验方法第29-40页
     ·病原菌的活化和培养第29-30页
     ·棉花幼苗病原菌接种处理和激素处理第30页
     ·棉花根系RNA和蛋白质的提取及浓度测定第30-31页
     ·等电聚焦电泳第31-32页
     ·胶条平衡第32页
     ·SDS-PAGE凝胶电泳第32-33页
     ·考马斯亮蓝胶体染色第33页
     ·2-DE图像采集分析及差异蛋白点切取第33页
     ·MALDI-TOF/TOF分析第33-34页
     ·RT-PCR和qRT-PCR分析第34-35页
     ·VIGS载体构建和棉花转化第35-36页
     ·激素含量测定第36页
     ·DAB染色和H2O2含量测定第36-37页
     ·台盼蓝染色第37页
     ·棉酚组织化学检测第37页
     ·棉酚含量的测定第37页
     ·HDTF1的克隆及序列分析第37-38页
     ·HDTF1的亚细胞定位第38页
     ·HDTF1表达模式分析第38-40页
3 结果与分析第40-76页
   ·蛋白表达谱结果与分析第40-47页
     ·黄萎病菌处理不同棉花品种引起抗性差异第40-41页
     ·蛋白表达谱变化第41-42页
     ·差异蛋白的鉴定和功能分类第42-45页
     ·棉花根响应黄萎病菌部分差异蛋白分析第45-47页
   ·VIGS在棉花基因功能验证中的应用第47-48页
   ·GbCAD1功能验证和棉酚在棉花抗病中的功能分析第48-55页
     ·GbCAD1在棉花接种后的表达模式第48-49页
     ·TRV:GbCAD1干涉植株棉酚含量检测第49页
     ·TRV:GbCAD1干涉植株抗病性鉴定第49-50页
     ·棉花接种后棉酚代谢路径相关基因表达分析第50页
     ·棉花接种后棉酚组织化学染色第50-51页
     ·棉花接种后棉酚含量检测第51-53页
     ·棉酚相关基因在MeJA处理后表达分析第53-55页
   ·Gb14-3-3功能验证和BR在棉花抗病中的功能分析第55-59页
     ·Gb14-3-3在棉花接种后的表达模式第55页
     ·TRV:Gb14-3-3干涉植株抗病性鉴定第55-57页
     ·棉花接种后BR路径相关基因表达分析第57页
     ·棉花植株经BL处理后抗病性鉴定第57页
     ·BL处理后JA路径相关基因表达分析第57-59页
   ·GbSSI2功能验证和JA在棉花抗病中的功能分析第59-64页
     ·GbSSI2在棉花接种后的表达模式第59页
     ·TRV:GbSSl2干涉植株表型分析第59-60页
     ·TRV:GbSSl2干涉植株H_2O_2含量检测及DAB染色第60页
     ·TRV:GbSSI2干涉植株SA含量测定和SA相关基因表达分析第60页
     ·TRV:GbSSl2干涉植株抗病性鉴定第60-62页
     ·TRV:GbSSI2干涉植株JA含量测定和JA相关基因表达分析第62-63页
     ·海‘7124’接种黄萎病菌后JA相关基因表达分析第63-64页
   ·HDTF1在棉花中的功能验证第64-76页
     ·HDTF1基因的克隆和序列分析第64-66页
     ·HDTF1蛋白的亚细胞定位第66-67页
     ·HDTF1的组织表达模式及在病菌侵染下的表达模式第67-69页
     ·干涉HDTF1增强棉花对黄萎病菌的抗性第69-71页
     ·干涉HDTF1增强棉花对灰霉病菌的抗性第71-72页
     ·HDTF1在不同激素处理下的表达模式第72-74页
     ·HDTF1干涉后激活了JA合成以及JA信号路径第74-76页
4 讨论第76-89页
   ·黄萎病菌侵染后,棉花根部蛋白组揭示棉花抗病机制第76-79页
   ·VIGS在棉花蛋白表达谱分析上的应用第79-81页
   ·棉酚代谢在棉花抗黄萎病中的功能第81-82页
   ·BR信号在棉花抗黄萎病中的功能第82-83页
   ·茉莉酸信号在棉花抗黄萎病中的功能第83-85页
   ·蛋白质组信息的深入研究第85页
   ·棉花HDTF1基因的功能分析第85-89页
     ·HDTF1属于PINTOX类转录因子,参与棉花对生物逆境和激素的响应第85-86页
     ·干涉HDTF1增强了棉花的抗病性第86-87页
     ·HDTF1调节棉花抗病性与JA信号的关系第87-89页
参考文献第89-104页
附录第104-129页
攻读学位期间已发表和待发表论文第129-130页
申请专利第130-131页
致谢第131页

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