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小鼠Mageb18基因克隆、表达分析及其调节黑色素瘤B16-F0细胞恶性表型的初步研究

摘要第1-8页
Abstract第8-13页
目录第13-16页
第一章 MAGE 基因家族研究进展第16-42页
 第一节 MAGE 基因的表达与调控第16-24页
     ·MAGE 是一个多成员基因家族第16-20页
     ·MAGE 基因的表达第20-21页
     ·MAGE 基因表达的调控第21-24页
 第二节 MAGE 蛋白的结构与功能第24-35页
     ·MAGE 蛋白的低级结构第24-25页
     ·MAGE 蛋白的高级结构第25-28页
     ·MAGE 基因与生殖细胞的发育第28-29页
     ·Ⅱ 型 MAGE 基因在正常组织中的功能及机制第29-32页
     ·Ⅰ 型 MAGE 蛋白的功能与机制第32-35页
 第三节 MAGE 基因能在肿瘤诊断和治疗中的应用第35-40页
     ·MAGE 与肿瘤的早期诊断第35-38页
     ·MAGE 基因与肿瘤免疫治疗第38-39页
     ·MAGE 基因与抗肿瘤药物研发第39-40页
 第四节 课题研究目的、内容及意义第40-42页
     ·研究目的第40页
     ·研究内容第40-41页
     ·研究意义第41-42页
第二章 小鼠 Mageb18 基因的克隆及其表达分析第42-65页
 第一节 材料与方法第42-46页
     ·材料第42-43页
     ·方法第43-46页
 第二节 结果第46-62页
     ·Mageb18 是一个在高级哺乳动物中保守的 I 型 MAGE 基因第46-48页
     ·Mageb18 基因定位在 X 染色体第48-49页
     ·Mageb18 基因在高级哺乳动物中保守第49-52页
     ·Mageb18 基因在小鼠正常组织中广谱表达第52-53页
     ·Mageb18 在睾丸中的表达是年龄依赖的第53-54页
     ·DNA 去甲基化和组蛋白乙酰化调节 Mageb18 基因的表达第54-56页
     ·小鼠 Mageb18 基因编码一个 46 kDa 的蛋白第56-59页
     ·MAGEB18 蛋白主要定位于细胞质第59-62页
 第三节 讨论第62-65页
     ·MAGEB18 基因是广谱表达的 I 型 MAGE 基因第62页
     ·调节 MAGEB18 广谱表达的机制第62-63页
     ·翻译后修饰对 MAGEB18 基因功能的影响第63页
     ·MAGEB18 亚细胞定位与其功能的关系第63-65页
第三章 MAGEB18 基因调节肿瘤细胞的增殖和凋亡第65-75页
 第一节 材料与方法第65-68页
     ·材料第65-66页
     ·方法第66-68页
 第二节 结果第68-73页
     ·siRNA 能够有效干扰 MAGEB18 的表达第68-69页
     ·抑制 MAGEB18 的表达能够显著抑制 B16-F0 和 4T1 细胞体外生长第69-70页
     ·抑制 MAGEB18 的表达能够显著抑制 B16-F0 和 4T1 细胞的体内成瘤第70-72页
     ·干扰 MAGEB18 诱导 B16-F0 细胞的凋亡第72页
     ·干扰 MAGEB18 上调 TP53 及凋亡相关基因的表达第72-73页
 第三节 讨论第73-75页
第四章 MAGEB18 基因调节 B16-F0 细胞的迁移、侵袭和转移第75-86页
 第一节 材料与方法第75-78页
     ·实验动物第75页
     ·细胞株与细胞培养第75-76页
     ·总 RNA 分离第76页
     ·RT-PCR 和 qRT-PCR第76-77页
     ·蛋白质抽提及 Western 印迹第77页
     ·siRNA 干扰 MAGEB18 表达第77页
     ·划痕实验分析细胞迁移能力第77页
     ·Transwell 实验分析细胞侵袭能力第77-78页
     ·体内肺转移分析第78页
     ·统计分析第78页
 第二节 结果第78-84页
     ·MAGEB18 基因在多种小鼠来源的细胞系里表达第78-79页
     ·干扰 MAGEB18 抑制 B16-F0 细胞体外迁移第79-81页
     ·干扰 MAGEB18 抑制 B16-F0 细胞体外侵袭第81页
     ·干扰 MAGEB18 抑制 B16-F0 细胞体外远端转移第81-82页
     ·干扰 MAGEB18 特异性下调 B16-F0 细胞中 MMP2 和 MMP9 的表达第82-84页
 第三节 讨论第84-86页
第五章 结论与展望第86-89页
 第一节 结论第86-87页
 第二节 展望第87-89页
参考文献第89-103页
致谢第103-104页
个人简历 在学期间发表的学术论文与研究成果第104-105页

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