| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-32页 |
| 第一节 选题背景及意义 | 第15页 |
| 第二节 布尼亚病毒科的研究概况 | 第15-20页 |
| ·布尼亚病毒科的生活周期 | 第15-18页 |
| ·布尼亚病毒科的分类 | 第18-20页 |
| ·布尼亚病毒科病毒引起的疾病 | 第20页 |
| 第三节 克里米亚-刚果出血热病毒的研究概况 | 第20-22页 |
| ·克里米亚-刚果出血热的分布与流行病学研究概况 | 第20-21页 |
| ·克里米亚-刚果出血热病毒的病毒结构、生活周期及基因组结构 | 第21-22页 |
| ·核蛋白在克里米亚-刚果出血热病毒生活周期中的关键性作用 | 第22页 |
| 第四节 几种典型的单股负链 RNA病毒核蛋白三维结构与功能研究概况 | 第22-31页 |
| ·流感病毒核蛋白研究概况 | 第24-26页 |
| ·狂犬病病毒与水疱性口炎病毒核蛋白研究概况 | 第26-27页 |
| ·拉沙热病毒核蛋白的研究概况 | 第27-29页 |
| ·裂谷热病毒核蛋白的研究概况 | 第29-31页 |
| 第五节 本课题的研究内容与意义 | 第31页 |
| 第六节 论文结构安排 | 第31-32页 |
| 第二章 CCHFV NP 的晶体学研究 | 第32-64页 |
| 第一节 CCHFV NP蛋白的基本信息及预测 | 第32-35页 |
| ·编码目标蛋白质的碱基稀有密码子含量与分布 | 第32-33页 |
| ·分子量、等电点、吸光度、半胱氨酸含量等生物化学信息 | 第33页 |
| ·蛋白质的信号肽与跨膜区域分析 | 第33-34页 |
| ·蛋白质的折叠情况预测 | 第34页 |
| ·蛋白质的同源性分析、结构域组成与三维结构预测 | 第34-35页 |
| ·小结 | 第35页 |
| 第二节 CCHFV NP基因的克隆与表达载体的构建 | 第35-38页 |
| 第三节 CCHFV NP重组蛋白的表达与纯化 | 第38-44页 |
| ·CCHFV NP 重组蛋白的试表达 | 第38页 |
| ·GST-CCHFV NP 重组融合蛋白的表达 | 第38页 |
| ·CCHFV NP 重组蛋白的纯化 | 第38-44页 |
| 第四节 CCHFV NP 蛋白的晶体生长与衍射数据收集 | 第44-53页 |
| ·蛋白质结晶的基本原理 | 第44-46页 |
| ·CCHFV NP 蛋白质结晶条件的初步筛选 | 第46-47页 |
| ·CCHFV NP 蛋白晶体的优化 | 第47页 |
| ·CCHFV NP 硒代甲硫氨酸晶体衍生物的制备 | 第47-49页 |
| ·CCHFV NP 蛋白晶体的衍射数据收集 | 第49-53页 |
| 第五节 CCHFV NP 晶体数据的相位确定与结构修正 | 第53-64页 |
| ·结构解析中的相位问题 | 第53-54页 |
| ·单波长反常散射法解析 CCHFV NP 的晶体结构 | 第54-64页 |
| 第三章 CCHFV NP 的三维结构分析 | 第64-70页 |
| 第一节 CCHFV NP 蛋白的总体结构描述 | 第64-66页 |
| 第二节 CCHFV NP 蛋白的头部结构域分析 | 第66-68页 |
| 第三节 CCHFV NP蛋白的杆部结构域分析 | 第68-70页 |
| 第四章 CCHFV NP 的功能分析 | 第70-99页 |
| 第一节 CCHFV NP在体外状态下的聚合状态分析 | 第70-73页 |
| ·凝胶过滤层析实验 | 第70-71页 |
| ·化学交联实验 | 第71-73页 |
| 第二节 CCHFV NP蛋白在 mRNA转录过程中“抢帽”作用的分析 | 第73-77页 |
| ·等温量热滴定法测定 CCHFV NP 与 RNA 帽子类似物的结合能力 | 第74-76页 |
| ·尝试通过结构生物学方法获得 CCHFV NP 与 RNA 帽子结合模型 | 第76-77页 |
| 第三节 CCHFV NP蛋白与 RNA的结合作用分析 | 第77-83页 |
| ·核酸酶消化对 CCHFV NP 蛋白结合大肠杆菌菌体核酸能力的影响 | 第77-79页 |
| ·CCHFV NP 蛋白与 RNA 结合能力的分析 | 第79-83页 |
| 第四节 CCHFV NP蛋白与宿主免疫防御机制相关蛋白的作用分析 | 第83-88页 |
| ·CCHFV NP 蛋白在 IRF-3 信号通路中的作用 | 第83-85页 |
| ·CCHFV NP 蛋白与 Caspase-3 蛋白酶的相互作用 | 第85-88页 |
| 第五节 CCHFV NP蛋白特异性识别 DNA的核酸内切酶活性分析 | 第88-99页 |
| ·CCHFV NP 蛋白金属依赖核酸酶活性的发现 | 第88-89页 |
| ·CCHFV NP 蛋白具有特异性识别 DNA 的核酸酶活性 | 第89-91页 |
| ·CCHFV NP 蛋白是一类特异性识别 DNA 的核酸内切酶 | 第91-92页 |
| ·CCHFV NP 核酸内切酶比活值的测定 | 第92-93页 |
| ·CCHFV NP 核酸内切酶关键性活性位点的定位与确认 | 第93-99页 |
| 第五章 CCHFV NP 与其他病毒核蛋白的结构、功能异同分析 | 第99-114页 |
| 第一节 CCHFV NP与内罗病毒属其他病毒核蛋白的比较分析 | 第99-101页 |
| 第二节 CCHFV NP与布尼亚病毒科其他病毒核蛋白的比较分析 | 第101-104页 |
| 第三节 CCHFV NP与负链 RNA病毒目其他病毒核蛋白的比较分析 | 第104-114页 |
| ·CCHFV NP 与 LASV NP 的比较分析 | 第104-112页 |
| ·CCHFV NP 与其他病毒 NP 的比较分析 | 第112-114页 |
| 第六章 结论 | 第114-115页 |
| 参考文献 | 第115-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
| 附录 A、CCHFV NP 蛋白的编码碱基与氨基酸序列 | 第123-125页 |
| 附录 B、攻读博士学位期间参与的其他研究课题 | 第125-129页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文及科研成果 | 第129-131页 |
