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ZNF300激活TRAF2介导的NF-kB信号通路促进肿瘤细胞生长

摘要第1-8页
Abstract第8-12页
中英文缩略对照表第12-18页
第一章 锌指蛋白概述以及ZNF300研究进展第18-31页
   ·前言第18页
   ·锌指蛋白的简介以及分类第18-20页
   ·锌指蛋白的功能及其作用方式第20-24页
     ·锌指蛋白与胚胎发育第20页
   ·锌指蛋白与疾病第20-21页
     ·锌指蛋白参与细胞增殖、分化和凋亡的调节第21-22页
     ·锌指蛋白的作用方式第22-24页
       ·锌指蛋白与DNA相互作用第22-23页
       ·锌指蛋白与RNA的相互作用第23页
       ·锌指蛋白与蛋白的相互作用第23-24页
       ·锌指蛋白与脂质体相互作用第24页
   ·KRAB类锌指蛋白简介第24-26页
   ·ZNF300的研究进展第26-30页
     ·ZNF300的发现第26页
     ·ZNF300基因的结构特征第26-27页
     ·ZNF300的表达谱第27-28页
     ·ZNF300的上下游调控基因第28页
     ·ZNF300的功能研究进展第28-30页
       ·ZNF300与细胞增殖第28-29页
       ·ZNF300的转录因子活性第29页
       ·ZNF300与疾病第29-30页
   ·小结第30-31页
第二章 TRAF2研究进展第31-42页
   ·TRAF2结构与功能第31-32页
   ·TRAF2与NF-KB第32-34页
   ·TRAF2与MAPK信号通路第34-35页
   ·TRAF2的调节第35-36页
   ·与TRAF2相互作用的受体及其信号通路第36-40页
     ·TNFR1第36-38页
     ·TNFR2第38页
     ·CD40第38-39页
     ·TACI和BCMA第39页
     ·TRAF2与其它受体的相互作用第39-40页
   ·TRAF2与疾病第40-41页
     ·TRAF2与癌症第40-41页
     ·TRAF2与炎症第41页
     ·TRAF2和其它疾病第41页
   ·小结第41-42页
第三章 ZNF300调控Hela细胞增殖机制的初步研究第42-65页
 摘要第42页
   ·前言第42-43页
   ·实验材料和仪器第43-48页
     ·细胞系第43页
     ·载体第43页
     ·试剂盒和酶第43-44页
     ·试剂及溶液的配制第44-47页
     ·实验仪器第47页
     ·分子生物学软件第47-48页
   ·实验方法第48-60页
     ·表达载体的构建第48-53页
     ·细胞培养及瞬时转染第53-55页
     ·半定量PCR和Western blot第55-59页
     ·双荧光素酶报告实验第59-60页
   ·实验结果第60-63页
     ·过表达ZNF300和反义ZNF300表达质粒载体的构建和鉴定第60-61页
     ·RT-PCR检测ZNF30对TRAF2的表达影响第61-62页
     ·Western blot检测ZNF300对TRAF2的表达影响第62页
     ·过表达ZNF300对NF-κB结合活性的影响第62-63页
   ·结果讨论第63-65页
第四章 ZNF300激活TRAF2基因表达的机制研究第65-91页
 摘要第65页
   ·前言第65-66页
   ·实验材料和仪器第66-69页
     ·血液样本第66页
     ·载体第66-67页
     ·试剂盒和酶第67页
     ·试剂以及其配制第67-68页
     ·凝胶阻滞实验所用试剂第68页
     ·染色质免疫共沉所用溶液第68页
     ·实验仪器第68-69页
     ·细菌培养相关试剂第69页
     ·数据库及分子生物学软件第69页
   ·实验方法第69-80页
     ·健康人基因组DNA的提取第69-70页
     ·双酶切人基因组DNA第70页
     ·PCR扩增TRAF2基因5’端调控区第70-71页
     ·启动子报告实验克隆的构建和鉴定第71-74页
     ·阳性克隆的测序验证第74页
     ·双荧光素酶报告实验第74页
     ·凝胶迁移率变化实验第74-78页
     ·染色质免疫共沉淀反应(CHIP)第78-80页
   ·实验结果第80-88页
     ·人基因组DNA的提取和酶切鉴定第80-81页
     ·TRAF2基因启动子的扩增和鉴定第81页
     ·含TRAF2基因5’调控区的报告质粒的克隆与鉴定第81-84页
     ·TRAF2基因5’调控区的截断和点突变的克隆的构建和鉴定第84-85页
     ·ZNF300对TRAF2基因启动子活性的影响第85-86页
     ·EMSA对ZNF300与TRAF2基因启动子结合的鉴定第86-87页
     ·CHIP对ZNF300与TRAF2基因启动子结合的鉴定第87-88页
   ·讨论第88-91页
第五章 探讨在体内环境下ZNF300对肿瘤生长和转移的影响第91-101页
 摘要第91页
   ·前言第91-92页
   ·实验材料以及主要试剂第92-93页
     ·实验动物第92页
     ·细胞系第92页
     ·试剂盒第92页
     ·细胞培养所用试剂第92-93页
     ·试剂和抗体第93页
     ·实验仪器及设备第93页
   ·实验方法第93-96页
     ·稳转细胞的培养与ZFN300表达量的检测第93-94页
     ·裸鼠肿瘤实验模型的建立第94页
     ·ELISA检测IL-6和IL-8的含量第94-95页
     ·HE染色与免疫组化第95-96页
   ·实验结果第96-99页
     ·稳转细胞系的构建和鉴定第96页
     ·ZNF300对肿瘤生长的影响第96-97页
     ·ZNF300对肿瘤细胞迁移的影响第97-99页
     ·ELISA检测ZNF300对IL-6和IL-8表达量的影响第99页
   ·结果讨论第99-101页
第六章 ZNF300在U937细胞分化过程中的功能初探第101-108页
 摘要第101页
   ·前言第101-102页
   ·实验材料以及试剂第102-103页
     ·实验细胞第102页
     ·细胞培养基的配制第102页
     ·试剂和抗体第102-103页
     ·仪器和设备第103页
   ·实验方法第103-104页
     ·U937的培养以及TPA诱导第103页
     ·瑞氏-姬姆萨(MGG)染色第103-104页
     ·Western blot第104页
   ·实验结果第104-105页
     ·TPA诱导U937分化的鉴定第104-105页
     ·Western blot检测ZNF300在U937分化过程中表达变化第105页
   ·讨论第105-108页
研究总结第108-110页
参考文献第110-124页
博士研究生期间发表以及待发表的论文第124-126页
致谢第126-127页

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