摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
中英文缩略对照表 | 第12-18页 |
第一章 锌指蛋白概述以及ZNF300研究进展 | 第18-31页 |
·前言 | 第18页 |
·锌指蛋白的简介以及分类 | 第18-20页 |
·锌指蛋白的功能及其作用方式 | 第20-24页 |
·锌指蛋白与胚胎发育 | 第20页 |
·锌指蛋白与疾病 | 第20-21页 |
·锌指蛋白参与细胞增殖、分化和凋亡的调节 | 第21-22页 |
·锌指蛋白的作用方式 | 第22-24页 |
·锌指蛋白与DNA相互作用 | 第22-23页 |
·锌指蛋白与RNA的相互作用 | 第23页 |
·锌指蛋白与蛋白的相互作用 | 第23-24页 |
·锌指蛋白与脂质体相互作用 | 第24页 |
·KRAB类锌指蛋白简介 | 第24-26页 |
·ZNF300的研究进展 | 第26-30页 |
·ZNF300的发现 | 第26页 |
·ZNF300基因的结构特征 | 第26-27页 |
·ZNF300的表达谱 | 第27-28页 |
·ZNF300的上下游调控基因 | 第28页 |
·ZNF300的功能研究进展 | 第28-30页 |
·ZNF300与细胞增殖 | 第28-29页 |
·ZNF300的转录因子活性 | 第29页 |
·ZNF300与疾病 | 第29-30页 |
·小结 | 第30-31页 |
第二章 TRAF2研究进展 | 第31-42页 |
·TRAF2结构与功能 | 第31-32页 |
·TRAF2与NF-KB | 第32-34页 |
·TRAF2与MAPK信号通路 | 第34-35页 |
·TRAF2的调节 | 第35-36页 |
·与TRAF2相互作用的受体及其信号通路 | 第36-40页 |
·TNFR1 | 第36-38页 |
·TNFR2 | 第38页 |
·CD40 | 第38-39页 |
·TACI和BCMA | 第39页 |
·TRAF2与其它受体的相互作用 | 第39-40页 |
·TRAF2与疾病 | 第40-41页 |
·TRAF2与癌症 | 第40-41页 |
·TRAF2与炎症 | 第41页 |
·TRAF2和其它疾病 | 第41页 |
·小结 | 第41-42页 |
第三章 ZNF300调控Hela细胞增殖机制的初步研究 | 第42-65页 |
摘要 | 第42页 |
·前言 | 第42-43页 |
·实验材料和仪器 | 第43-48页 |
·细胞系 | 第43页 |
·载体 | 第43页 |
·试剂盒和酶 | 第43-44页 |
·试剂及溶液的配制 | 第44-47页 |
·实验仪器 | 第47页 |
·分子生物学软件 | 第47-48页 |
·实验方法 | 第48-60页 |
·表达载体的构建 | 第48-53页 |
·细胞培养及瞬时转染 | 第53-55页 |
·半定量PCR和Western blot | 第55-59页 |
·双荧光素酶报告实验 | 第59-60页 |
·实验结果 | 第60-63页 |
·过表达ZNF300和反义ZNF300表达质粒载体的构建和鉴定 | 第60-61页 |
·RT-PCR检测ZNF30对TRAF2的表达影响 | 第61-62页 |
·Western blot检测ZNF300对TRAF2的表达影响 | 第62页 |
·过表达ZNF300对NF-κB结合活性的影响 | 第62-63页 |
·结果讨论 | 第63-65页 |
第四章 ZNF300激活TRAF2基因表达的机制研究 | 第65-91页 |
摘要 | 第65页 |
·前言 | 第65-66页 |
·实验材料和仪器 | 第66-69页 |
·血液样本 | 第66页 |
·载体 | 第66-67页 |
·试剂盒和酶 | 第67页 |
·试剂以及其配制 | 第67-68页 |
·凝胶阻滞实验所用试剂 | 第68页 |
·染色质免疫共沉所用溶液 | 第68页 |
·实验仪器 | 第68-69页 |
·细菌培养相关试剂 | 第69页 |
·数据库及分子生物学软件 | 第69页 |
·实验方法 | 第69-80页 |
·健康人基因组DNA的提取 | 第69-70页 |
·双酶切人基因组DNA | 第70页 |
·PCR扩增TRAF2基因5’端调控区 | 第70-71页 |
·启动子报告实验克隆的构建和鉴定 | 第71-74页 |
·阳性克隆的测序验证 | 第74页 |
·双荧光素酶报告实验 | 第74页 |
·凝胶迁移率变化实验 | 第74-78页 |
·染色质免疫共沉淀反应(CHIP) | 第78-80页 |
·实验结果 | 第80-88页 |
·人基因组DNA的提取和酶切鉴定 | 第80-81页 |
·TRAF2基因启动子的扩增和鉴定 | 第81页 |
·含TRAF2基因5’调控区的报告质粒的克隆与鉴定 | 第81-84页 |
·TRAF2基因5’调控区的截断和点突变的克隆的构建和鉴定 | 第84-85页 |
·ZNF300对TRAF2基因启动子活性的影响 | 第85-86页 |
·EMSA对ZNF300与TRAF2基因启动子结合的鉴定 | 第86-87页 |
·CHIP对ZNF300与TRAF2基因启动子结合的鉴定 | 第87-88页 |
·讨论 | 第88-91页 |
第五章 探讨在体内环境下ZNF300对肿瘤生长和转移的影响 | 第91-101页 |
摘要 | 第91页 |
·前言 | 第91-92页 |
·实验材料以及主要试剂 | 第92-93页 |
·实验动物 | 第92页 |
·细胞系 | 第92页 |
·试剂盒 | 第92页 |
·细胞培养所用试剂 | 第92-93页 |
·试剂和抗体 | 第93页 |
·实验仪器及设备 | 第93页 |
·实验方法 | 第93-96页 |
·稳转细胞的培养与ZFN300表达量的检测 | 第93-94页 |
·裸鼠肿瘤实验模型的建立 | 第94页 |
·ELISA检测IL-6和IL-8的含量 | 第94-95页 |
·HE染色与免疫组化 | 第95-96页 |
·实验结果 | 第96-99页 |
·稳转细胞系的构建和鉴定 | 第96页 |
·ZNF300对肿瘤生长的影响 | 第96-97页 |
·ZNF300对肿瘤细胞迁移的影响 | 第97-99页 |
·ELISA检测ZNF300对IL-6和IL-8表达量的影响 | 第99页 |
·结果讨论 | 第99-101页 |
第六章 ZNF300在U937细胞分化过程中的功能初探 | 第101-108页 |
摘要 | 第101页 |
·前言 | 第101-102页 |
·实验材料以及试剂 | 第102-103页 |
·实验细胞 | 第102页 |
·细胞培养基的配制 | 第102页 |
·试剂和抗体 | 第102-103页 |
·仪器和设备 | 第103页 |
·实验方法 | 第103-104页 |
·U937的培养以及TPA诱导 | 第103页 |
·瑞氏-姬姆萨(MGG)染色 | 第103-104页 |
·Western blot | 第104页 |
·实验结果 | 第104-105页 |
·TPA诱导U937分化的鉴定 | 第104-105页 |
·Western blot检测ZNF300在U937分化过程中表达变化 | 第105页 |
·讨论 | 第105-108页 |
研究总结 | 第108-110页 |
参考文献 | 第110-124页 |
博士研究生期间发表以及待发表的论文 | 第124-126页 |
致谢 | 第126-127页 |