| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 引言 | 第12-26页 |
| 1 LT 的概述 | 第12-13页 |
| 2 LT 的基因与分子结构 | 第13-16页 |
| ·编码 LT 的基因 | 第13页 |
| ·LT 蛋白的分子结构 | 第13-16页 |
| 3 LT 的生物学特性 | 第16页 |
| ·LT 与细胞膜表面的结合--GM1 结合活性 | 第16页 |
| ·LT 与 ADP-核糖化因子（ARF）的结合 | 第16页 |
| ·LT 与 NAD 的结合 | 第16页 |
| 4 LT 的佐剂功能 | 第16-20页 |
| ·LT 的毒性作用 | 第16-17页 |
| ·LT 的粘膜免疫原性和免疫调节作用 | 第17-18页 |
| ·LT 的粘膜免疫佐剂效应 | 第18-19页 |
| ·LT 突变体的研究 | 第19-20页 |
| 5 LT 诱导细胞因子免疫应答 | 第20-26页 |
| ·T 细胞免疫调控作用 | 第21-22页 |
| ·CD4+T 细胞的免疫调节作用 | 第22页 |
| ·细胞因子 | 第22-26页 |
| 第一章 小鼠细胞因子实时定量 PCR 方法的建立 | 第26-43页 |
| 1 实验材料 | 第26-28页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第26-27页 |
| ·菌株 | 第27页 |
| ·培养基及溶液配制 | 第27-28页 |
| 2 实验方法 | 第28-34页 |
| ·小鼠脾脏总 RNA 提取 | 第28页 |
| ·总 RNA 的反转录反应 | 第28-29页 |
| ·引物设计 | 第29页 |
| ·目的片段的 PCR 扩增 | 第29-30页 |
| ·质粒标准品制备 | 第30-32页 |
| ·质粒纯度测定 | 第32-33页 |
| ·标准曲线的建立 | 第33-34页 |
| 3 结果 | 第34-42页 |
| ·细胞因子基因片段重组质粒的鉴定 | 第34-35页 |
| ·细胞因子标准曲线的建立 | 第35-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| 第二章 LT 诱导巨噬细胞中细胞因子动态变化的研究 | 第43-64页 |
| 1 实验材料 | 第43-44页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第43-44页 |
| ·菌株和细胞 | 第44页 |
| ·主要试剂配制 | 第44页 |
| 2 实验方法 | 第44-48页 |
| ·细胞复苏 | 第44-45页 |
| ·细胞传代 | 第45页 |
| ·Real-time PCR 检测不同剂量 LTRG 对小鼠巨噬细胞中细胞因子的刺激 | 第45-46页 |
| ·Real-time PCR 检测 LT 蛋白对小鼠巨噬细胞中细胞因子的刺激 | 第46-47页 |
| ·Real-time PCR 检测 LTRG 与 BSA 协同处理对小鼠巨噬细胞中细胞因子的影响 | 第47页 |
| ·液相芯片检测细胞上清液中细胞因子的变化 | 第47-48页 |
| ·数据统计 | 第48页 |
| 3 结果 | 第48-61页 |
| ·不同剂量 LTRG 对小鼠巨噬细胞中细胞因子的影响 | 第48-49页 |
| ·LT 蛋白对小鼠巨噬细胞中细胞因子的影响 | 第49-54页 |
| ·LTRG 与 BSA 蛋白共同免疫对小鼠巨噬细胞中细胞因子的影响 | 第54-58页 |
| ·液相芯片技术分析 LT 对巨噬细胞中细胞因子的影响 | 第58-61页 |
| 4 讨论 | 第61-64页 |
| ·不同剂量 LTRG 对巨噬细胞中细胞因子的影响 | 第61页 |
| ·LT 蛋白对巨噬细胞中细胞因子的影响 | 第61-62页 |
| ·LTRG 和 BSA 协同作用对巨噬细胞中细胞因子的影响 | 第62页 |
| ·液相芯片技术分析 LT 对巨噬细胞中细胞因子的影响 | 第62-64页 |
| 第三章 实时定量 PCR 检测 LT 诱导小鼠脾脏中细胞因子动态变化 | 第64-73页 |
| 1 实验材料 | 第64-65页 |
| ·主要仪器 | 第64页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第64-65页 |
| ·菌株和实验动物 | 第65页 |
| ·主要试剂配制 | 第65页 |
| 2 实验方法 | 第65-67页 |
| ·动物试验 | 第65页 |
| ·小鼠脾脏总 RNA 提取 | 第65-66页 |
| ·RNA 浓度和纯度的测定 | 第66页 |
| ·总 RNA 的反转录反应 | 第66-67页 |
| ·所用引物和质粒 | 第67页 |
| ·Real-time PCR 反应 | 第67页 |
| ·数据统计 | 第67页 |
| 3 结果 | 第67-71页 |
| ·LT 蛋白免疫后小鼠脾脏中 IL-1β表达量变化 | 第67页 |
| ·LT 蛋白免疫后小鼠脾脏中 IL-12 表达量变化 | 第67-68页 |
| ·LT 蛋白免疫后小鼠脾脏中 IFN-γ表达量变化 | 第68-69页 |
| ·LT 蛋白免疫后小鼠脾脏中 TNF-α表达量变化 | 第69-70页 |
| ·LT 蛋白免疫后小鼠脾脏中 IL-4 表达量变化 | 第70页 |
| ·LT 蛋白免疫后小鼠脾脏中 IL-6 表达量变化 | 第70-71页 |
| 4 讨论 | 第71-73页 |
| 第四章 LTRG 感染小鼠后脾脏组织中 T 淋巴细胞的动态变化 | 第73-78页 |
| 1 实验材料 | 第73-74页 |
| ·主要仪器 | 第73页 |
| ·主要试剂 | 第73页 |
| ·菌株和实验动物 | 第73页 |
| ·主要试剂配制 | 第73-74页 |
| 2 实验方法 | 第74-75页 |
| ·动物试验 | 第74页 |
| ·脾脏淋巴细胞悬液制备 | 第74页 |
| ·细胞计数 | 第74页 |
| ·细胞表面染色 | 第74页 |
| ·数据统计 | 第74-75页 |
| 3 结果 | 第75-76页 |
| ·LT 免疫小鼠脾脏组织中 CD3+阳性 T 淋巴细胞的动态变化 | 第75页 |
| ·LT 免疫小鼠脾脏组织中 CD4+阳性 T 淋巴细胞的动态变化 | 第75-76页 |
| ·LT 免疫小鼠脾脏组织中 CD8+阳性 T 淋巴细胞的动态变化 | 第76页 |
| 4 讨论 | 第76-78页 |
| 全文总结 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
