| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-35页 |
| ·木聚糖酶的研究进展 | 第18-24页 |
| ·木聚糖 | 第18-19页 |
| ·木聚糖酶 | 第19-24页 |
| ·植酸酶的研究进展 | 第24-31页 |
| ·植酸 | 第24-25页 |
| ·植酸酶 | 第25-31页 |
| ·瘤胃环境微生物及其降解酶的研究进展 | 第31-34页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第34-35页 |
| 第二章 饲喂周期内绵羊瘤胃环境 pH、微生物数量和相关酶活的变化 | 第35-47页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·研究对象 | 第35页 |
| ·菌株、载体、工具酶和试剂 | 第35页 |
| ·引物合成和核酸测序 | 第35页 |
| ·溶液 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35-36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-41页 |
| ·绵羊瘤胃液的采集 | 第36页 |
| ·绵羊瘤胃液 pH 的测定 | 第36页 |
| ·绵羊瘤胃液木聚糖酶活性的测定 | 第36-37页 |
| ·归一化基因 GFP 表达载体的构建和酵母转化 | 第37-38页 |
| ·绵羊瘤胃环境微生物宏基因组 DNA 的提取 | 第38-39页 |
| ·瘤胃环境微生物数量的测定 | 第39-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-45页 |
| ·绵羊瘤胃液 pH 的变化 | 第41页 |
| ·绵羊瘤胃液木聚糖酶活性的变化 | 第41-42页 |
| ·GFP 在酵母中的成功表达 | 第42-43页 |
| ·不同时间点绵羊瘤胃环境宏 DNA 基因组的提取 | 第43页 |
| ·不同时间点瘤胃环境微生物数量的变化 | 第43-45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| ·本章小结 | 第46-47页 |
| 第三章 绵羊瘤胃环境 GH10 木聚糖酶的转录水平基因多样性分析 | 第47-82页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·研究对象 | 第47页 |
| ·菌株、载体、工具酶和试剂 | 第47页 |
| ·引物合成和核酸测序 | 第47页 |
| ·溶液 | 第47页 |
| ·培养基 | 第47页 |
| ·主要仪器 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-55页 |
| ·绵羊瘤胃环境宏基因组 DNA 的提取和纯化 | 第47页 |
| ·绵羊瘤胃环境总 RNA 的提取 | 第47-49页 |
| ·总 RNA 反转录 | 第49页 |
| ·绵羊瘤胃环境 GH10 木聚糖酶基因片段克隆库的构建 | 第49-51页 |
| ·5 个 GH10 木聚糖酶基因片段克隆库的测序及分析 | 第51-52页 |
| ·6 个代表性木聚糖酶基因的定量分析 | 第52-55页 |
| ·结果与分析 | 第55-79页 |
| ·绵羊瘤胃环境宏基因组 DNA 的提取和纯化 | 第55页 |
| ·绵羊瘤胃环境总 RNA 的提取 | 第55-56页 |
| ·5 个木聚糖酶基因克隆库的构建与分析 | 第56-63页 |
| ·6 个代表性木聚糖酶基因的定量分析 | 第63-79页 |
| ·讨论 | 第79-80页 |
| ·本章小结 | 第80-82页 |
| 第四章 绵羊瘤胃环境 CP 植酸酶的转录水平基因多样性分析 | 第82-104页 |
| ·实验材料 | 第82页 |
| ·研究对象 | 第82页 |
| ·菌株、载体、工具酶和试剂 | 第82页 |
| ·引物合成和核酸测序 | 第82页 |
| ·溶液 | 第82页 |
| ·培养基 | 第82页 |
| ·主要仪器 | 第82页 |
| ·实验方法 | 第82-85页 |
| ·绵羊瘤胃环境宏基因组 DNA 的提取和纯化 | 第82页 |
| ·绵羊瘤胃环境总 RNA 的提取 | 第82页 |
| ·总 RNA 的反转录 | 第82-83页 |
| ·绵羊瘤胃环境 CP 植酸酶基因片段克隆库的构建 | 第83-84页 |
| ·5 个 CP 植酸酶基因片段克隆库的测序及多样性分析 | 第84-85页 |
| ·4 个 CP 植酸酶基因的克隆 | 第85页 |
| ·结果与分析 | 第85-102页 |
| ·绵羊瘤胃环境宏基因组 DNA 的提取和纯化 | 第85-86页 |
| ·绵羊瘤胃环境总 RNA 的反转录 | 第86页 |
| ·5 个木聚糖酶基因克隆库的构建与分析 | 第86-95页 |
| ·4 个植酸酶基因的获得及序列分析 | 第95-102页 |
| ·讨论 | 第102-103页 |
| ·本章小结 | 第103-104页 |
| 第五章 绵羊瘤胃环境木聚糖酶基因的克隆、酶学性质和结构与功能的研究 | 第104-128页 |
| ·实验材料 | 第104页 |
| ·绵羊瘤胃环境宏基因组 DNA | 第104页 |
| ·菌株、载体、工具酶和试剂盒 | 第104页 |
| ·引物合成及 DNA 测序 | 第104页 |
| ·培养基 | 第104页 |
| ·主要仪器 | 第104页 |
| ·实验方法 | 第104-111页 |
| ·目标基因的选择 | 第104页 |
| ·绵羊瘤胃环境 GH10 木聚糖酶基因全长克隆 | 第104-105页 |
| ·XynA、XynB 和 XynC 的表达和蛋白纯化 | 第105-108页 |
| ·XynA、XynB 和 XynC 的酶学性质和结构与功能关系的分析 | 第108-111页 |
| ·结果与分析 | 第111-125页 |
| ·目标基因序列的选择 | 第111页 |
| ·木聚糖酶基因全长的获得 | 第111-113页 |
| ·木聚糖酶基因的序列分析 | 第113-118页 |
| ·木聚糖酶 XynA 重组蛋白的表达纯化和酶学性质 | 第118-124页 |
| ·木聚糖酶 XynB 和 XynC 重组蛋白的表达纯化和酶学性质 | 第124-125页 |
| ·讨论 | 第125-127页 |
| ·本章小结 | 第127-128页 |
| 第六章 全文结论 | 第128-129页 |
| 参考文献 | 第129-145页 |
| 致谢 | 第145-146页 |
| 作者简历 | 第146页 |
