| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略词表 | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-24页 |
| ·微生物代谢甘油合成生物基化学品 | 第12-15页 |
| ·甘油的生成现状及再利用前景 | 第12-13页 |
| ·发酵甘油合成生物基化学品的研究进展 | 第13-14页 |
| ·途径工程改造大肠杆菌发酵甘油合成乙醇和琥珀酸的研究进展 | 第14-15页 |
| ·乳酸的发酵生产及研究进展 | 第15-19页 |
| ·乳酸及其应用 | 第15-16页 |
| ·用于乳酸发酵生产的碳源 | 第16-18页 |
| ·乳酸发酵生产菌种 | 第18-19页 |
| ·途径工程改造大肠杆菌合成乳酸的研究进展 | 第19-23页 |
| ·大肠杆菌合成 D-乳酸的研究进展 | 第19-22页 |
| ·大肠杆菌合成 L-乳酸的研究进展 | 第22-23页 |
| ·立题依据和主要研究内容 | 第23-24页 |
| 第二章 途径工程改造大肠杆菌利用甘油高效合成 D-乳酸 | 第24-47页 |
| ·前言 | 第24-26页 |
| ·材料与方法 | 第26-30页 |
| ·菌株和质粒 | 第26页 |
| ·试剂与仪器 | 第26-27页 |
| ·培养条件 | 第27-28页 |
| ·基因删除和 ldhA 基因的克隆表达 | 第28-29页 |
| ·发酵放大试验 | 第29页 |
| ·分析方法 | 第29-30页 |
| ·结果与讨论 | 第30-46页 |
| ·重组菌 B0013-070 代谢甘油合成 D-乳酸 | 第30-32页 |
| ·甘油和葡萄糖形成乳酸过程中代谢途径方面的差异性 | 第32-33页 |
| ·提高发酵阶段氧供水平有利于 D-乳酸的合成 | 第33-36页 |
| ·适度增强 D-乳酸脱氢酶的表达有助提高乳酸的转化效率 | 第36-39页 |
| ·温控开关策略的引入有助提高乳酸的转化效率 | 第39-46页 |
| ·本章小结 | 第46-47页 |
| 第三章 途径工程改造大肠杆菌高效合成 L-乳酸 | 第47-69页 |
| ·前言 | 第47页 |
| ·材料和方法 | 第47-52页 |
| ·菌株和质粒 | 第47-49页 |
| ·培养基 | 第49页 |
| ·分子克隆的常规操作方法 | 第49页 |
| ·BcoaLDH 基因的克隆和鉴定 | 第49-50页 |
| ·L-乳酸高产菌的构建 | 第50-51页 |
| ·摇瓶发酵 | 第51页 |
| ·分批发酵试验 | 第51-52页 |
| ·数据处理 | 第52页 |
| ·分析方法 | 第52页 |
| ·结果与讨论 | 第52-68页 |
| ·L-乳酸脱氢酶基因 BcoaLDH 的克隆与初步鉴定 | 第52-53页 |
| ·L-乳酸脱氢酶的表达及其引导 L-乳酸的合成 | 第53-58页 |
| ·高产 L-乳酸菌株的构建 | 第58-62页 |
| ·重组菌产 L-乳酸发酵工艺建立与优化 | 第62-65页 |
| ·B0013-090B 利用甘油合成 L-乳酸的新工艺及发酵试验 | 第65-67页 |
| ·B0013-090B 利用葡萄糖合成 L-乳酸的性能评价 | 第67-68页 |
| ·本章小结 | 第68-69页 |
| 第四章 菌体生长有序控制下的乳酸高效合成 | 第69-86页 |
| ·前言 | 第69-70页 |
| ·材料与方法 | 第70-72页 |
| ·菌株 | 第70页 |
| ·培养基和培养条件 | 第70页 |
| ·试剂和仪器 | 第70页 |
| ·thiE 基因的删除 | 第70-71页 |
| ·摇瓶实验 | 第71页 |
| ·发酵罐试验 | 第71-72页 |
| ·分析方法 | 第72页 |
| ·结果与讨论 | 第72-85页 |
| ·thiE 突变株的选育 | 第72页 |
| ·thiE 基因突变表现出硫胺素营养缺陷表型 | 第72-73页 |
| ·thiE 突变株 B0013-080A 摇瓶培养条件下的生长特征 | 第73-74页 |
| ·发酵罐中 thiE 突变株 B0013-080A 的生长特征 | 第74-75页 |
| ·菌体生长的精确控制 | 第75-76页 |
| ·硫胺素控制下的细胞生长对后续发酵产酸的影响 | 第76-79页 |
| ·发酵产酸阶段硫胺素缺乏对乙酸和琥珀酸积累量的影响 | 第79页 |
| ·B0013-080A 以葡萄糖为碳源发酵产酸性能 | 第79-81页 |
| ·B0013-080A 菌株代谢甘油合成乳酸的性能 | 第81-83页 |
| ·营养调控和温控开关策略在乳酸合成过程中的组合应用 | 第83-85页 |
| ·本章小结 | 第85-86页 |
| 主要结论与展望 | 第86-87页 |
| 主要创新点 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-94页 |
| 附录 | 第94页 |
