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PPRV DAS-ELISA和胶体金免疫层析试纸条检测方法的建立

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
目录第8-11页
插图和附表清单第11-13页
缩略词第13-15页
第一章 绪论 小反刍兽疫病原及其诊断技术研究概况第15-23页
   ·概述第15页
   ·病原第15-16页
   ·流行病学第16-17页
     ·流行现状和地理分布第16-17页
     ·易感动物和传播途径第17页
   ·发病机理第17页
   ·病理变化第17-18页
   ·诊断第18-22页
     ·血清学诊断第19-20页
     ·抗原检测第20-22页
   ·研究目的和意义第22-23页
第二章 小反刍兽疫病毒双抗夹心ELISA检测方法建立第23-48页
   ·引言第23-24页
   ·材料第24-27页
     ·细胞、毒株、抗体、实验动物和血清第24页
     ·主要试剂第24页
     ·ELISA所用其他试剂配制第24-25页
     ·蛋白纯化溶液的配制第25-26页
     ·主要仪器第26-27页
     ·引物设计与合成第27页
     ·PPRV的繁殖第27页
   ·方法第27-36页
     ·小反刍兽疫病毒多克隆抗体的制备与纯化第27-29页
     ·单克隆抗体的制备与纯化第29-31页
     ·小反刍兽疫病毒双抗夹心ELISA(DAS-ELISA)方法程序第31-36页
   ·结果第36-46页
     ·山羊抗PPRV多克隆抗体血清效价的测定和亲和纯化第36页
     ·单抗腹水的纯化第36-37页
     ·杂交瘤细胞培养上清及纯化腹水效价的测定第37页
     ·双抗夹心ELISA(DAS-ELISA)方法优化第37-43页
     ·双抗夹心ELISA(DAS-ELISA)方法的确证第43-45页
     ·最终确定双抗夹心ELISA的反应程序第45-46页
     ·试制试剂盒第46页
   ·小结第46页
   ·讨论第46-48页
第三章 小反刍兽疫胶体金试纸条的研制第48-70页
   ·前言第48-49页
   ·材料第49-50页
     ·抗原、抗体第49页
     ·试剂及用途第49页
     ·耗材第49页
     ·仪器及用途第49-50页
   ·方法第50-57页
     ·胶体金的制备第50-52页
     ·胶体金探针的制备和鉴定第52-54页
     ·胶体金垫与样品垫的预处理第54-55页
     ·点样第55-57页
   ·结果第57-64页
     ·胶体金的制备与鉴定第57-58页
     ·胶体金溶液pH调节第58-59页
     ·最适蛋白量的确定第59-60页
     ·胶体金标记优化结果第60页
     ·金标抗体重悬液的优化结果第60页
     ·胶体金垫与样品垫的预处理第60-61页
     ·点样第61页
     ·试纸条的组装、剪切、包装第61-62页
     ·检测第62页
     ·敏感性试验第62-63页
     ·特异性试验第63页
     ·临床样品的检测分析第63-64页
   ·讨论第64-69页
     ·试验前准备第64-65页
     ·胶体金的制备第65-66页
     ·胶体金质量的鉴定第66页
     ·胶体金粒径大小的选择第66-67页
     ·胶体金pH值的调节方法第67页
     ·胶体金标记最佳pH值的确定第67页
     ·胶体金标记抗体最佳浓度的确定第67-68页
     ·金标抗体的制备第68页
     ·金标抗体的纯化第68-69页
     ·金标抗体的质量鉴定第69页
     ·金标垫和样品垫的处理第69页
   ·小结第69-70页
第四章 总结与展望第70-72页
   ·总结第70页
   ·展望第70-72页
致谢第72-73页
参考文献第73-81页
附录A 攻读硕士期间发表论文目录第81页

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