| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-25页 |
| ·水稻条纹病毒的研究背景 | 第10-14页 |
| ·水稻条纹病的发生及其危害 | 第10页 |
| ·水稻条纹病的传播 | 第10页 |
| ·RSV的病毒粒子 | 第10-11页 |
| ·RSV的基因组结构 | 第11-12页 |
| ·RSV编码蛋白的功能 | 第12-14页 |
| ·酵母双杂交系统及其应用 | 第14-17页 |
| ·酵母双杂交系统的简介 | 第14-15页 |
| ·酵母双杂交系统的原理 | 第15-16页 |
| ·酵母双杂交系统优缺点 | 第16-17页 |
| ·酵母双杂交系统研究RSV与寄主的互作情况 | 第17页 |
| ·荧光共振能量转移 | 第17-20页 |
| ·荧光共振能量转移原理 | 第17-18页 |
| ·荧光共振能量转移(FRET)的优缺点 | 第18页 |
| ·受体漂白荧光共振能量转移 | 第18-19页 |
| ·荧光共振能量转移-荧光寿命成像(FRET-FLIM)技术 | 第19页 |
| ·荧光共振能量转移(FRET)技术的注意事项 | 第19-20页 |
| ·杆状病毒AcMNPV作为人类干细胞基因治疗载体的研究 | 第20-23页 |
| ·杆状病毒简介 | 第20页 |
| ·杆状病毒的分类 | 第20页 |
| ·杆状病毒的形态结构 | 第20-21页 |
| ·杆状病毒的基因组结构及基因表达调控 | 第21页 |
| ·杆状病毒表达载体系统 | 第21-22页 |
| ·杆状病毒AcMNPV用作人类干细胞基因治疗载体 | 第22-23页 |
| ·大肠杆菌--杆状病毒穿梭载体(Bac to Bac系统) | 第23页 |
| ·本论文的研究目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 酵母双杂交分析NSvc2-N与NSvc2-C蛋白间的互作 | 第25-37页 |
| ·仪器 | 第25页 |
| ·实验材料 | 第25-27页 |
| ·菌株 | 第25页 |
| ·质粒 | 第25-26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-33页 |
| ·水稻叶片总RNA的提取 | 第27-28页 |
| ·RT-PCR扩增目的基因片段 | 第28-29页 |
| ·PCR产物的回收与连接 | 第29-30页 |
| ·制备大肠杆菌DH5a感受态细胞 | 第30页 |
| ·转化大肠杆菌DH5a | 第30页 |
| ·大肠杆菌中质粒的提取方法 | 第30-31页 |
| ·酶切鉴定 | 第31页 |
| ·载体的构建 | 第31-32页 |
| ·酵母感受态细胞的制备 | 第32页 |
| ·诱饵载体的自激活鉴定 | 第32-33页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第33页 |
| ·结果分析与讨论 | 第33-37页 |
| ·NSvc2-N和NSvc2-C的RT-PCR扩增产物 | 第33页 |
| ·NSvc2-C和NSvc2-N诱饵和捕获载体的构建 | 第33-35页 |
| ·NSvc2-C和NSvc2-N蛋白的相互作用检验 | 第35页 |
| ·分析和讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 FRET法验证NSvc2-N与NSvc2-C间的互作 | 第37-46页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·实验用的菌株 | 第37页 |
| ·质粒 | 第37页 |
| ·试剂 | 第37页 |
| ·培养基 | 第37-38页 |
| ·引物 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-42页 |
| ·RT-PCR扩增目的基因片段 | 第38-39页 |
| ·PCR产物的回收与连接 | 第39页 |
| ·转化大肠杆菌DH5α | 第39页 |
| ·大肠杆菌中质粒的提取及酶切鉴定 | 第39页 |
| ·质粒构建 | 第39页 |
| ·重组Bacmid的构建 | 第39-41页 |
| ·重组Bacmid DNA转染-感染昆虫Sf9细胞 | 第41页 |
| ·荧光显微镜观察FRET结果 | 第41-42页 |
| ·结果分析与讨论 | 第42-46页 |
| ·含NSvc2-N和NSvc2-C重组质粒的构建 | 第42-44页 |
| ·重组病毒的产生 | 第44-46页 |
| 第四章 AcMNPV作为人类干细胞基因治疗载体的研究 | 第46-52页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·菌株和质粒 | 第46页 |
| ·试剂 | 第46页 |
| ·培养基和细胞 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-47页 |
| ·目的基因片段的PCR扩增 | 第46-47页 |
| ·PCR产物的回收与连接 | 第47页 |
| ·转化大肠杆菌DH5α、提取质粒、酶切鉴定 | 第47页 |
| ·实验结果 | 第47-51页 |
| ·目的基因的扩增 | 第47页 |
| ·目的基因的克隆及鉴定 | 第47-48页 |
| ·目的基因片段连接pTRE-tight | 第48-49页 |
| ·pTet-on Advanced用XhoⅠ和HindⅢ酶切后连接pFastBac1 | 第49页 |
| ·目的片段与pFast-Tet的连接 | 第49-51页 |
| ·重组质粒转化DH10B构建重组Bacmid | 第51页 |
| ·鉴定正确的Bacmid转染昆虫细胞Sf9 | 第51页 |
| ·结果分析与讨论 | 第51-52页 |
| 第五章 总结与讨论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
