| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-19页 |
| ·我国枇杷资源概况 | 第10页 |
| ·果实糖代谢 | 第10-12页 |
| ·转化酶与糖代谢 | 第11页 |
| ·蔗糖合成酶与糖代谢 | 第11-12页 |
| ·蔗糖磷酸合成酶与糖代谢 | 第12页 |
| ·枇杷果实中的糖分组成及糖积累 | 第12-13页 |
| ·不同枇杷品种糖分的组成 | 第12页 |
| ·枇杷果实糖的积累动态 | 第12-13页 |
| ·枇杷果实糖代谢酶的动态变化 | 第13页 |
| ·枇杷果实糖代谢分子生物学 | 第13-14页 |
| ·枇杷中酸的的组成及代谢酶 | 第14页 |
| ·栽培管理措施对枇杷果实糖酸组成的影响 | 第14-15页 |
| ·磷酸果糖激酶 | 第15-17页 |
| ·磷酸果糖激酶的简介 | 第15页 |
| ·磷酸果糖激酶基因结构及功能 | 第15页 |
| ·磷酸果糖激酶在果实糖代谢中的作用 | 第15-16页 |
| ·磷酸果糖激酶活性调节 | 第16-17页 |
| ·磷酸果糖激酶分子生物学研究进展 | 第17页 |
| ·展望 | 第17-18页 |
| ·本论文研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| 2 枇杷磷酸果糖激酶基因的分离 | 第19-34页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·植物材料 | 第19页 |
| ·酶及生化试剂 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-25页 |
| ·总 RNA 提取及检测 | 第19-20页 |
| ·反转录反应 | 第20页 |
| ·反转录产物 PCR | 第20-21页 |
| ·目的基因片段的回收 | 第21页 |
| ·基因克隆及测序 | 第21-23页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第21页 |
| ·连接 | 第21-22页 |
| ·转化及克隆筛选 | 第22页 |
| ·碱法小量提取质粒 DNA | 第22-23页 |
| ·质粒 DNA 的酶切鉴定 | 第23页 |
| ·序列测定 | 第23页 |
| ·序列分析 | 第23页 |
| ·3’RACE | 第23页 |
| ·5’RACE | 第23-25页 |
| ·结果与分析 | 第25-34页 |
| ·枇杷不同组织 RNA 质量检测 | 第25-26页 |
| ·枇杷磷酸果糖激酶基因分离 | 第26-28页 |
| ·枇杷磷酸果糖激酶基因编码蛋白质分析 | 第28-34页 |
| 3 磷酸果糖激酶亚细胞定位 | 第34-38页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-37页 |
| ·表达载体的构建 | 第34-35页 |
| ·碱法大量提取质粒 DNA | 第34-35页 |
| ·载体构建 | 第35页 |
| ·洋葱表皮细胞培养 | 第35页 |
| ·基因枪轰击洋葱表皮细胞 | 第35-37页 |
| ·金粉的准备 | 第35-36页 |
| ·DNA 的包裹 | 第36页 |
| ·基因枪操作 | 第36-37页 |
| ·利用激光共聚集显微镜进行亚细胞定位 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-38页 |
| 4 磷酸果糖激酶基因表达模式分析 | 第38-40页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-39页 |
| ·RNA 的提取 | 第38页 |
| ·反转录反应 | 第38页 |
| ·Real-Time RT-PCR 反应体系及程序 | 第38页 |
| ·数据处理 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-40页 |
| 5 磷酸果糖激酶基因转化烟草的研究 | 第40-48页 |
| ·实验材料 | 第40-42页 |
| ·植物材料 | 第40页 |
| ·菌株、植物转化载体 | 第40页 |
| ·仪器设备 | 第40-41页 |
| ·培养基与试剂 | 第41-42页 |
| ·植物培养基 | 第41页 |
| ·常用的储备液 | 第41页 |
| ·生化试剂与配制 | 第41-42页 |
| ·实验方法 | 第42-44页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第42页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第42页 |
| ·烟草种子萌发获得无菌苗 | 第42页 |
| ·烟草组培再生体系的建立 | 第42-43页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第42-43页 |
| ·诱导生根 | 第43页 |
| ·外植体卡那霉素敏感性实验 | 第43页 |
| ·农杆菌介导转化烟草 | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-48页 |
| ·烟草再生体系的建立 | 第44-45页 |
| ·不同诱导培养基对愈伤组织的诱导 | 第44页 |
| ·不同生根培养基对不定芽的诱导 | 第44-45页 |
| ·卡那霉素敏感性的测定 | 第45页 |
| ·影响烟草转化的条件 | 第45-48页 |
| ·预培养的时间对转化率的影响 | 第45-46页 |
| ·侵染时间对转化率的影响 | 第46页 |
| ·共培养时间对转化率影响 | 第46-48页 |
| 6 小结与讨论 | 第48-49页 |
| 7 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 附录一：表格 | 第55-58页 |
| 附录二：图 | 第58-59页 |
| 个人简介 | 第59页 |
| 在校期间论文发表情况 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |