摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
部分缩写的中英文对照 | 第12-14页 |
第一篇 文献综述 | 第14-39页 |
第一章 PCV2与TLR的研究进展 | 第15-39页 |
1 PCV2与仔猪免疫抑制 | 第15-20页 |
·PCV2的流行病学特点 | 第15-16页 |
·PMWS临床症状 | 第16-17页 |
·PCV2感染对淋巴细胞的影响 | 第17-18页 |
·PCV2感染对细胞因子的影响 | 第18-19页 |
·PCV2感染与ORF3 | 第19页 |
·PCV2感染对抗原提呈细胞的影响 | 第19-20页 |
·PCV2感染对树突状细胞的影响 | 第19-20页 |
·PCV2感染对单核/巨噬细胞的影响 | 第20页 |
2 TLR的研究进展 | 第20-32页 |
·TLR的发现 | 第20-21页 |
·TLR的结构特点 | 第21页 |
·识别病毒蛋白的TLR | 第21-23页 |
·识别病毒核酸的TLR | 第23-25页 |
·TLR的信号转导途径 | 第25-28页 |
·MyD88依赖性途径 | 第25-27页 |
·TRIF依赖性途径/MyD88非依赖性途径 | 第27-28页 |
·TLR信号通路的负调控 | 第28-30页 |
·TLR信号传导和细胞自噬 | 第30-32页 |
参考文献 | 第32-39页 |
第二篇 试验研究 | 第39-81页 |
第二章 PCV2对体外培养仔猪淋巴细胞TLR基因水平的影响 | 第41-67页 |
摘要 | 第41-42页 |
Abstract | 第42-43页 |
1 材料与方法 | 第43-48页 |
·病毒 | 第43-44页 |
·主要仪器和试剂 | 第44页 |
·实验动物及处理 | 第44-45页 |
·实验方法 | 第45-48页 |
·荧光显微镜检测淋巴细胞感染PCV2的情况 | 第45页 |
·荧光定量RT-PCR半定量检测仔猪脾脏淋巴细胞中病毒相关TLRmRNA的表达 | 第45-48页 |
(1) 引物设计 | 第45-46页 |
(2) T RNA的提取 | 第46-47页 |
(3) 逆转录合成cDNA | 第47页 |
(4) cDNA纯度鉴定 | 第47页 |
(5) 荧光定量PCR | 第47-48页 |
·数据分析 | 第48页 |
2 结果 | 第48-61页 |
·PCV2感染体外培养淋巴细胞的进程 | 第48-50页 |
·cDNA纯度检测结果 | 第50页 |
·荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第50-57页 |
·TLR在仔猪淋巴细胞的转录 | 第57-58页 |
·PCV2对体外培养仔猪淋巴细胞TLR2 mRNA转录水平的影响 | 第58页 |
·PCV2对体外培养仔猪淋巴细胞TLR3 mRNA转录水平的影响 | 第58-59页 |
·PCV2对体外培养仔猪淋巴细胞TLR4 mRNA转录水平的影响 | 第59-60页 |
·PCV2对体外培养仔猪淋巴细胞TLR7 mRNA转录水平的影响 | 第60页 |
·PCV2对体外培养仔猪淋巴细胞TLR8 mRNA转录水平的影响 | 第60页 |
·PCV2对体外培养仔猪淋巴细胞TLR9 mRNA转录水平的影响 | 第60-61页 |
3 讨论 | 第61-65页 |
·PCV2可以感染体外培养的仔猪淋巴细胞 | 第61页 |
·仔猪淋巴细胞TLR的表达 | 第61-62页 |
·PCV2对体外培养的仔猪淋巴细胞TLR表达的影响 | 第62-65页 |
参考文献 | 第65-67页 |
第三章 PCV2对体外培养仔猪淋巴细胞TLR3和TLR4蛋白表达的影响 | 第67-81页 |
摘要 | 第67-68页 |
Abstract | 第68-69页 |
1 材料与方法 | 第69-74页 |
·病毒 | 第69-70页 |
·主要仪器和试剂 | 第70-71页 |
·实验设计 | 第71-72页 |
·Western blot法检测TLR3和TLR4蛋白的表达 | 第72-74页 |
·总蛋白的提取 | 第72页 |
·BCA法进行蛋白含量的检测 | 第72页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第72-73页 |
·封闭 | 第73页 |
·杂交 | 第73页 |
·化学发光显影 | 第73-74页 |
·凝胶图像分析 | 第74页 |
·数据处理和分析 | 第74页 |
2 结果 | 第74-76页 |
·PCV2对仔猪淋巴细胞TLR3蛋白含量的影响 | 第74-75页 |
·PCV2对仔猪淋巴细胞TLR4蛋白含量的影响 | 第75-76页 |
3 讨论 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-81页 |
全文总结 | 第81-83页 |
致谢 | 第83页 |