摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
第一篇 文献综述 | 第9-29页 |
第一章 小鹅瘟病毒的研究进展 | 第9-29页 |
1 小鹅瘟病毒的病原学特征 | 第10-16页 |
·GPV的分类 | 第10-11页 |
·病毒形态结构 | 第11页 |
·理化特性 | 第11-12页 |
·培养特性 | 第12页 |
·分子生物学特征 | 第12-16页 |
2 小鹅瘟病毒的流行病学 | 第16-17页 |
3 发病症状 | 第17-18页 |
4 小鹅瘟诊断方法的研究进展 | 第18-23页 |
·病原学检查 | 第18页 |
·血清学诊断 | 第18-22页 |
·分子生物学诊断 | 第22-23页 |
5 小鹅瘟的防制 | 第23-24页 |
参考文献 | 第24-29页 |
第二篇 试验部分 | 第29-71页 |
第二章 小鹅瘟病毒套式PCR方法的建立及应用 | 第29-41页 |
摘要 | 第29页 |
1 试验材料 | 第29-30页 |
·病毒毒株 | 第29-30页 |
·主要试剂 | 第30页 |
·仪器与设备 | 第30页 |
2 试验方法 | 第30-33页 |
·病料处理 | 第30页 |
·小鹅瘟病毒的传代 | 第30页 |
·小鹅瘟病毒DNA的提取 | 第30-31页 |
·引物的设计与合成 | 第31页 |
·VP3基因的PCR扩增 | 第31-32页 |
·最佳退火温度的筛选 | 第32页 |
·特异性试验 | 第32页 |
·敏感性试验 | 第32页 |
·临床应用 | 第32-33页 |
3 试验结果 | 第33-36页 |
·最佳退火温度 | 第33-34页 |
·套式PCR最佳反应程序 | 第34页 |
·套式PCR扩增 | 第34-35页 |
·特异性试验 | 第35-36页 |
·敏感性试验 | 第36页 |
·临床应用 | 第36页 |
4 讨论 | 第36-38页 |
参考文献 | 第38-39页 |
Abstract | 第39-41页 |
第三章 小鹅瘟病毒VP3蛋白的原核表达 | 第41-59页 |
摘要 | 第41页 |
1 试验材料 | 第41-42页 |
·病毒 | 第41页 |
·质粒与菌种 | 第41-42页 |
·主要试剂 | 第42页 |
·仪器与设备 | 第42页 |
2 试验方法 | 第42-49页 |
·引物的设计与合成 | 第42页 |
·目的基因的PCR扩增 | 第42-43页 |
·目的基因的纯化回收 | 第43-44页 |
·目的基因与pMD19-T载体的连接,构建重组质粒pMD19-T-VP3 | 第44页 |
·连接产物的转化 | 第44页 |
·重组质粒的鉴定 | 第44-46页 |
·重组表达质粒的构建 | 第46-47页 |
·载体质粒的双酶切 | 第46页 |
·VP3基因片段与表达载体的连接 | 第46页 |
·转化到大肠杆菌DH5a | 第46-47页 |
·重组表达质粒的鉴定 | 第47页 |
·阳性重组表达质粒转化表达菌 | 第47页 |
·目的蛋白的表达与纯化 | 第47-49页 |
·重组VP3蛋白Western-blot分析 | 第49页 |
3 试验结果 | 第49-55页 |
·VP3目的基因的PCR扩增 | 第49-50页 |
·重组质粒pMD19-T-VP3的鉴定 | 第50-51页 |
·重组表达质粒pCold I-VP3的鉴定 | 第51-52页 |
·VP3蛋白在大肠杆菌中高效表达 | 第52-53页 |
·重组蛋白的纯化 | 第53-54页 |
·Western-blot鉴定 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-57页 |
Abstract | 第57-59页 |
第四章 检测小鹅瘟病毒抗体的间接ELISA诊断方法方法的建立及应用 | 第59-71页 |
摘要 | 第59页 |
1 试验材料 | 第59-60页 |
·主要试剂及病毒 | 第59-60页 |
·仪器和设备 | 第60页 |
2 试验方法 | 第60-62页 |
·间接ELISA方法各项参数的确定 | 第60-61页 |
·判断标准的确定 | 第61页 |
·特异性试验 | 第61页 |
·重复性试验 | 第61页 |
·流行病学调查 | 第61-62页 |
3 试验结果 | 第62-67页 |
·间接ELISA方法参数的确定 | 第62-65页 |
·判定标准 | 第65页 |
·特异性试验 | 第65-66页 |
·重复性试验 | 第66页 |
·临床初步应用 | 第66-67页 |
4 讨论 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-70页 |
Abstract | 第70-71页 |
全文总结 | 第71-73页 |
英文缩写词表 | 第73-75页 |
附录 | 第75-79页 |
致谢 | 第79页 |