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小鹅瘟病毒检测方法的建立及初步应用

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
第一篇 文献综述第9-29页
 第一章 小鹅瘟病毒的研究进展第9-29页
  1 小鹅瘟病毒的病原学特征第10-16页
   ·GPV的分类第10-11页
   ·病毒形态结构第11页
   ·理化特性第11-12页
   ·培养特性第12页
   ·分子生物学特征第12-16页
  2 小鹅瘟病毒的流行病学第16-17页
  3 发病症状第17-18页
  4 小鹅瘟诊断方法的研究进展第18-23页
   ·病原学检查第18页
   ·血清学诊断第18-22页
   ·分子生物学诊断第22-23页
  5 小鹅瘟的防制第23-24页
  参考文献第24-29页
第二篇 试验部分第29-71页
 第二章 小鹅瘟病毒套式PCR方法的建立及应用第29-41页
  摘要第29页
  1 试验材料第29-30页
   ·病毒毒株第29-30页
   ·主要试剂第30页
   ·仪器与设备第30页
  2 试验方法第30-33页
   ·病料处理第30页
   ·小鹅瘟病毒的传代第30页
   ·小鹅瘟病毒DNA的提取第30-31页
   ·引物的设计与合成第31页
   ·VP3基因的PCR扩增第31-32页
   ·最佳退火温度的筛选第32页
   ·特异性试验第32页
   ·敏感性试验第32页
   ·临床应用第32-33页
  3 试验结果第33-36页
   ·最佳退火温度第33-34页
   ·套式PCR最佳反应程序第34页
   ·套式PCR扩增第34-35页
   ·特异性试验第35-36页
   ·敏感性试验第36页
   ·临床应用第36页
  4 讨论第36-38页
  参考文献第38-39页
  Abstract第39-41页
 第三章 小鹅瘟病毒VP3蛋白的原核表达第41-59页
  摘要第41页
  1 试验材料第41-42页
   ·病毒第41页
   ·质粒与菌种第41-42页
   ·主要试剂第42页
   ·仪器与设备第42页
  2 试验方法第42-49页
   ·引物的设计与合成第42页
   ·目的基因的PCR扩增第42-43页
   ·目的基因的纯化回收第43-44页
   ·目的基因与pMD19-T载体的连接,构建重组质粒pMD19-T-VP3第44页
   ·连接产物的转化第44页
   ·重组质粒的鉴定第44-46页
   ·重组表达质粒的构建第46-47页
     ·载体质粒的双酶切第46页
     ·VP3基因片段与表达载体的连接第46页
     ·转化到大肠杆菌DH5a第46-47页
     ·重组表达质粒的鉴定第47页
   ·阳性重组表达质粒转化表达菌第47页
   ·目的蛋白的表达与纯化第47-49页
   ·重组VP3蛋白Western-blot分析第49页
  3 试验结果第49-55页
   ·VP3目的基因的PCR扩增第49-50页
   ·重组质粒pMD19-T-VP3的鉴定第50-51页
   ·重组表达质粒pCold I-VP3的鉴定第51-52页
   ·VP3蛋白在大肠杆菌中高效表达第52-53页
   ·重组蛋白的纯化第53-54页
   ·Western-blot鉴定第54-55页
  4 讨论第55-56页
  参考文献第56-57页
  Abstract第57-59页
 第四章 检测小鹅瘟病毒抗体的间接ELISA诊断方法方法的建立及应用第59-71页
  摘要第59页
  1 试验材料第59-60页
   ·主要试剂及病毒第59-60页
   ·仪器和设备第60页
  2 试验方法第60-62页
   ·间接ELISA方法各项参数的确定第60-61页
   ·判断标准的确定第61页
   ·特异性试验第61页
   ·重复性试验第61页
   ·流行病学调查第61-62页
  3 试验结果第62-67页
   ·间接ELISA方法参数的确定第62-65页
   ·判定标准第65页
   ·特异性试验第65-66页
   ·重复性试验第66页
   ·临床初步应用第66-67页
  4 讨论第67-69页
  参考文献第69-70页
  Abstract第70-71页
全文总结第71-73页
英文缩写词表第73-75页
附录第75-79页
致谢第79页

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