猪链球菌2型免疫磁珠夹心ELISA方法的建立
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一篇 文献综述 | 第9-29页 |
| 第一章 猪链球菌病及猪链球菌2型研究进展 | 第9-29页 |
| 1 前言 | 第9页 |
| 2 病原学 | 第9-10页 |
| 3 流行病学 | 第10-11页 |
| 4 临床症状 | 第11-12页 |
| 5 组织病理学 | 第12页 |
| 6 发病机理 | 第12-13页 |
| 7 毒力因子 | 第13-16页 |
| ·溶菌酶释放蛋白(MRP)以及胞外因子(EF) | 第13页 |
| ·荚膜多糖 | 第13-14页 |
| ·溶血素 | 第14页 |
| ·纤连蛋白结合蛋白 | 第14-15页 |
| ·谷氨酸脱氢酶 | 第15页 |
| ·其他毒力因子 | 第15-16页 |
| 8 小鼠动物模型 | 第16页 |
| 9 免疫 | 第16-17页 |
| 10 检测和鉴定 | 第17-18页 |
| ·生化鉴定 | 第17页 |
| ·血清学鉴定和检测 | 第17-18页 |
| ·分子生物学检测 | 第18页 |
| 11 免疫磁珠的基本性质 | 第18-21页 |
| ·基本原理 | 第19页 |
| ·应用 | 第19-21页 |
| 参考文献 | 第21-29页 |
| 第二篇 试验部分 | 第29-57页 |
| 第一章 猪链球菌2型MRP蛋白单克隆抗体的制备 | 第29-41页 |
| 摘要 | 第29-30页 |
| 1 材料与方法 | 第30-35页 |
| ·细菌、动物和细胞 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·重组MRP蛋白抗原的制备 | 第30-31页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第31-34页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第34-35页 |
| 2 结果 | 第35-37页 |
| ·抗原的制备 | 第35页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第35页 |
| ·腹水的纯化 | 第35-36页 |
| ·单克隆 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-39页 |
| Abstract | 第39-41页 |
| 第二章 猪链球菌2型磁珠夹心ELISA方法的建立 | 第41-57页 |
| 摘要 | 第41页 |
| 1 材料与方法 | 第41-46页 |
| ·细菌和动物 | 第41-42页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第42-43页 |
| ·免疫磁珠ELISA方法的建立 | 第43-46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-52页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第46-47页 |
| ·捕获抗体和检测抗体工作浓度的测定 | 第47-48页 |
| ·单抗包被时间及温度的确定 | 第48页 |
| ·抗原捕获时间的确定 | 第48页 |
| ·多抗最佳反应时间的确定 | 第48-49页 |
| ·酶标二抗反应时间和稀释度 | 第49页 |
| ·阴阳性临界值的确定 | 第49-50页 |
| ·最低检出量的确定 | 第50页 |
| ·保存期测定 | 第50-51页 |
| ·特异性检测 | 第51页 |
| ·人工感染病料的检测及与PCR方法对照 | 第51-52页 |
| ·批内重复性实验 | 第52页 |
| ·批间重复性实验 | 第52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-55页 |
| Abstract | 第55-57页 |
| 全文总结 | 第57-59页 |
| 改谢 | 第59页 |