摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
1 前言 | 第9-16页 |
·越橘的研究背景 | 第9-10页 |
·花色素苷的研究进展 | 第10-11页 |
·花色素苷的生物合成途径 | 第11-15页 |
·试验的目的与意义 | 第15页 |
·试验的主要内容与技术路线 | 第15-16页 |
2 材料与方法 | 第16-32页 |
·试验材料 | 第16-18页 |
·植物材料 | 第16页 |
·菌株和质粒 | 第16-17页 |
·主要生化试剂 | 第17页 |
·主要试剂的配制 | 第17-18页 |
·试验方法 | 第18-32页 |
·引物设计 | 第18-19页 |
·总RNA的提取 | 第19-23页 |
·总RNA的完整性与质量检测 | 第23页 |
·RT-PCR验证 | 第23-24页 |
·目的片段的回收 | 第24页 |
·目的片段的连接 | 第24-25页 |
·大肠杆菌感受态细胞DH5-α的制备 | 第25-26页 |
·大肠杆菌转化及阳性克隆的鉴定 | 第26页 |
·测序分析 | 第26页 |
·RACE技术获得VcCHS基因cDNA全长序列 | 第26-27页 |
·越橘VcCHS基因cDNA全长序列的拼接 | 第27-28页 |
·越橘VcCHS基因cDNA全长序列的克隆 | 第28页 |
·生物信息学序列分析 | 第28页 |
·越橘不同器官与组织中VcCHS基因的表达 | 第28-29页 |
·越橘花色素苷含量的测定 | 第29页 |
·越橘VcCHS基因表达载体的构建 | 第29-32页 |
3 结果与分析 | 第32-43页 |
·越橘总RNA样品的提取与分析 | 第32-34页 |
·越橘总RNA样品完整性的分析 | 第32页 |
·越橘总RNA样品纯度和产率的分析 | 第32-34页 |
·越橘CHS片段的扩增 | 第34-35页 |
·越橘VcCHS基因5'RACE和3'RACE扩增 | 第35页 |
·越橘VcCHS基因全长cDNA的克隆 | 第35页 |
·越橘VcCHS基因cDNA全长序列的分析 | 第35-37页 |
·越橘VcCHS基因编码的氨基酸序列功能分析与同源性比较 | 第37-39页 |
·越橘不同器官与组织中VcCHS基因的表达 | 第39-40页 |
·越橘不同器官与组织中花色素苷含量的测定 | 第40-41页 |
·植物表达载体的构建 | 第41-43页 |
·目的基因和载体的准备 | 第41-42页 |
·重组质粒pBI121-VcCHS的鉴定 | 第42-43页 |
4 讨论 | 第43-45页 |
·越橘总RNA的提取 | 第43-44页 |
·越橘VcCHS基因cDNA全长序列的克隆及序列分析 | 第44页 |
·越橘VcCHS基因表达载体的构建 | 第44-45页 |
5 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
附录1 缩略词英汉对照表 | 第53-56页 |
附录2 试验涉及到的培养基配制方法 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
作者简介 | 第58-59页 |