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越橘查耳酮合酶基因的克隆及表达分析

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 前言第9-16页
   ·越橘的研究背景第9-10页
   ·花色素苷的研究进展第10-11页
   ·花色素苷的生物合成途径第11-15页
   ·试验的目的与意义第15页
   ·试验的主要内容与技术路线第15-16页
2 材料与方法第16-32页
   ·试验材料第16-18页
     ·植物材料第16页
     ·菌株和质粒第16-17页
     ·主要生化试剂第17页
     ·主要试剂的配制第17-18页
   ·试验方法第18-32页
     ·引物设计第18-19页
     ·总RNA的提取第19-23页
     ·总RNA的完整性与质量检测第23页
     ·RT-PCR验证第23-24页
     ·目的片段的回收第24页
     ·目的片段的连接第24-25页
     ·大肠杆菌感受态细胞DH5-α的制备第25-26页
     ·大肠杆菌转化及阳性克隆的鉴定第26页
     ·测序分析第26页
     ·RACE技术获得VcCHS基因cDNA全长序列第26-27页
     ·越橘VcCHS基因cDNA全长序列的拼接第27-28页
     ·越橘VcCHS基因cDNA全长序列的克隆第28页
     ·生物信息学序列分析第28页
     ·越橘不同器官与组织中VcCHS基因的表达第28-29页
     ·越橘花色素苷含量的测定第29页
     ·越橘VcCHS基因表达载体的构建第29-32页
3 结果与分析第32-43页
   ·越橘总RNA样品的提取与分析第32-34页
     ·越橘总RNA样品完整性的分析第32页
     ·越橘总RNA样品纯度和产率的分析第32-34页
   ·越橘CHS片段的扩增第34-35页
   ·越橘VcCHS基因5'RACE和3'RACE扩增第35页
   ·越橘VcCHS基因全长cDNA的克隆第35页
   ·越橘VcCHS基因cDNA全长序列的分析第35-37页
   ·越橘VcCHS基因编码的氨基酸序列功能分析与同源性比较第37-39页
   ·越橘不同器官与组织中VcCHS基因的表达第39-40页
   ·越橘不同器官与组织中花色素苷含量的测定第40-41页
   ·植物表达载体的构建第41-43页
     ·目的基因和载体的准备第41-42页
     ·重组质粒pBI121-VcCHS的鉴定第42-43页
4 讨论第43-45页
   ·越橘总RNA的提取第43-44页
   ·越橘VcCHS基因cDNA全长序列的克隆及序列分析第44页
   ·越橘VcCHS基因表达载体的构建第44-45页
5 结论第45-46页
参考文献第46-53页
附录1 缩略词英汉对照表第53-56页
附录2 试验涉及到的培养基配制方法第56-57页
致谢第57-58页
作者简介第58-59页

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