| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1 炭疽病及其生物防治概述 | 第11-12页 |
| ·炭疽菌及其侵染特性 | 第11页 |
| ·炭疽菌的分类 | 第11页 |
| ·炭疽菌的侵染特性 | 第11页 |
| ·炭疽病的生物防治 | 第11-12页 |
| ·生物防治 | 第11-12页 |
| ·炭疽病生物防治的研究进展 | 第12页 |
| 2 抗菌蛋白的研究进展 | 第12-16页 |
| ·抗菌蛋白研究概述 | 第13-14页 |
| ·蛋白质分离纯化方法概述 | 第14-16页 |
| ·硫酸铵沉淀 | 第14页 |
| ·透析 | 第14页 |
| ·凝胶过滤层析(gel filtration chromatography) | 第14-15页 |
| ·离子交换层析(Ion Exchange Chromatography简称为IEC) | 第15页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第15-16页 |
| ·高效液相色谱层析(HPLC) | 第16页 |
| 3 芽孢杆菌抗菌基因概述 | 第16-17页 |
| 4. 本论文课题来源和研究背景、意义及内容 | 第17-19页 |
| ·本论文课题来源 | 第17页 |
| ·本论文研究背景和意义 | 第17页 |
| ·本论文研究主要内容和技术路线 | 第17-19页 |
| ·本论文的主要研究内容 | 第17-18页 |
| ·技术路线 | 第18-19页 |
| 第二章 影响辣椒炭疽病菌附着胞形成的生防细菌的筛选与鉴定 | 第19-33页 |
| 1 材料 | 第19-21页 |
| ·土样来源和采集方法 | 第19页 |
| ·菌种 | 第19页 |
| ·培养基及其配制 | 第19-20页 |
| ·试剂及配制 | 第20页 |
| ·引物合成 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| 2 方法 | 第21-25页 |
| ·生防菌的筛选 | 第21-23页 |
| ·炭疽菌的培养 | 第21页 |
| ·土壤细菌的分离及培养 | 第21页 |
| ·抑制孢子萌发和影响附着胞形成的活性检测 | 第21-22页 |
| ·生防细菌的初筛 | 第22页 |
| ·生防细菌的复筛 | 第22页 |
| ·生防菌株的抗菌活性测定 | 第22页 |
| ·生防细菌的保存 | 第22-23页 |
| ·生防细菌鉴定 | 第23-25页 |
| ·细菌形态观察 | 第23页 |
| ·细菌基因组DNA的提取 | 第23-24页 |
| ·细菌16SrDNA特异性扩增 | 第24页 |
| ·细菌16SrDNA序列测定 | 第24-25页 |
| ·细菌16SrDNA序列分析及系统发育树构建 | 第25页 |
| ·枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌部分特异性基因序列的分析 | 第25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-32页 |
| ·生防细菌的筛选 | 第25-28页 |
| ·土壤细菌的分离培养 | 第25-26页 |
| ·菌株的初筛 | 第26页 |
| ·菌株的复筛 | 第26-27页 |
| ·生防菌株的载片培养法抗菌活性测定 | 第27页 |
| ·生防菌株的平板对峙培养抗菌活性测定 | 第27-28页 |
| ·生防菌株的鉴定 | 第28-32页 |
| ·菌株的形态特征 | 第28-29页 |
| ·DNA抽提 | 第29页 |
| ·16SrDNA片断扩增 | 第29-30页 |
| ·测序 | 第30页 |
| ·序列分析和系统发育树的构建 | 第30-31页 |
| ·枯草芽孢杆菌部分特异性基因序列的分析 | 第31-32页 |
| 4 小结与讨论 | 第32-33页 |
| 第三章 C-D6菌株抗菌活性蛋白的分离纯化 | 第33-47页 |
| 1 材料 | 第33-34页 |
| ·菌种 | 第33页 |
| ·培养基 | 第33页 |
| ·试剂及其配制 | 第33-34页 |
| ·主要仪器和耗材 | 第34页 |
| 2 方法 | 第34-41页 |
| ·枯草芽孢杆菌C-D6发酵培养和发酵液制备 | 第34页 |
| ·活性蛋白组分的分离 | 第34-35页 |
| ·发酵液的(NH4)2S04盐析 | 第34-35页 |
| ·透析袋处理 | 第35页 |
| ·透析脱盐 | 第35页 |
| ·载玻片培养法检测盐析蛋白的生物活性 | 第35页 |
| ·SEPHADEX G-75分子筛纯化活性蛋白 | 第35-38页 |
| ·洗脱液的配制 | 第35页 |
| ·凝胶处理 | 第35页 |
| ·AKTA柱层析系统操作流程 | 第35-37页 |
| ·装柱 | 第37-38页 |
| ·上样和洗脱 | 第38页 |
| ·收集和生物活性检测 | 第38页 |
| ·阴离子交换层析Q-FASTFLOW纯化活性蛋白 | 第38-39页 |
| ·操作流程 | 第38页 |
| ·装柱 | 第38-39页 |
| ·实验参数 | 第39页 |
| ·样品浓缩 | 第39页 |
| ·SDS-PAGE纯度和分子量大小测定 | 第39-40页 |
| ·HPLC检测活性蛋白的纯度 | 第40-41页 |
| ·实验参数 | 第40页 |
| ·Agilent1200 HPLC的操作步骤 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-46页 |
| ·20% 盐析蛋白粗提液的生物活性 | 第41-42页 |
| ·SEPHADEX G-75分子筛分离活性蛋白 | 第42-43页 |
| ·Q-FASTFLOW分离结果 | 第43-44页 |
| ·SDS-PAGE电泳检测 | 第44-45页 |
| ·20%盐析蛋白粗提液SDS-PAGE | 第44-45页 |
| ·HPLC检测结果 | 第45-46页 |
| ·20%盐析蛋白液的纯度检测 | 第45页 |
| ·活性蛋白阴离子交换柱层析纯化后的HPLC检测 | 第45-46页 |
| 4 小结与讨论 | 第46-47页 |
| 第四章 芽孢杆菌的抗菌特性比较、分类鉴定和抗生素基因分析 | 第47-55页 |
| 1 材料 | 第47-48页 |
| ·菌种 | 第47页 |
| ·培养基 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47页 |
| ·引物合成 | 第47-48页 |
| ·主要仪器和耗材 | 第48页 |
| 2 方法 | 第48-49页 |
| ·生防菌株的抗菌活性测定 | 第49页 |
| ·生防菌株的部分特异性鉴定 | 第49页 |
| ·芽孢杆菌类生防菌株抗生素合成基因的特异扩增 | 第49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-53页 |
| ·芽孢杆菌类生防菌平板对峙活性测定 | 第49-50页 |
| ·枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌部分特异性基因序列的分析 | 第50-51页 |
| ·芽孢杆菌类生防菌的抗生素合成基因检测 | 第51-53页 |
| 4 小结与讨论 | 第53-55页 |
| 第五章 结论及展望 | 第55-56页 |
| 1 结论 | 第55页 |
| 2 展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 附录 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
