| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-34页 |
| ·癌症治疗中核酸药物的临床应用和面临的问题 | 第11-14页 |
| ·纳米药物载体的优势和在癌症治疗中的应用 | 第14-17页 |
| ·癌症基因治疗和相关纳米药物载体 | 第17-20页 |
| ·肿瘤血管增生和miRNA治疗 | 第20-23页 |
| ·肿瘤特异性微环境和纳米颗粒输送的siRNA治疗 | 第23-25页 |
| ·本课题的选题目的及主要研究内容 | 第25-27页 |
| 参考文献 | 第27-34页 |
| 第二章 刷状阳离子聚合物作为p53质粒DNA的载体用于乳腺癌治疗的研究 | 第34-51页 |
| ·引言 | 第34-35页 |
| ·实验部分 | 第35-36页 |
| ·主要材料 | 第35页 |
| ·细胞株 | 第35页 |
| ·主要药品及试剂 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-39页 |
| ·细胞传代培养 | 第36页 |
| ·MTT实验检测刷状聚合物PHEMA-g-(PEI-b-PEG)的生物相容性 | 第36-37页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳实验检验PHEMA-g-(PEI-b-PEG)结合质粒DNA的能力 | 第37页 |
| ·PHEMA-g-(PEI-b-PEG)与质粒DNA复合物的粒径及表面电势 | 第37页 |
| ·细胞内吞实验 | 第37页 |
| ·细胞转染实验 | 第37-38页 |
| ·Western blotting检测野生型p53蛋白的表达水平 | 第38页 |
| ·TUNEL荧光染色法检测体外培养细胞的凋亡情况 | 第38-39页 |
| ·乳腺癌细胞对阿霉素敏感性提高的验证 | 第39页 |
| ·结果与讨论 | 第39-47页 |
| ·刷状阳离子聚合物PHEMA-g-(PEI-b-PEG)没有明显的细胞毒性 | 第39-40页 |
| ·刷状阳离子聚合物PHEMA-g-(PEI-b-PEG)能够有效结合质粒DNA | 第40-41页 |
| ·PHEMA-g-(PEI-b-PEG)具备输送质粒DNA进入细胞的能力 | 第41-42页 |
| ·PHEMA-g-(PEI-b-PEG)具备良好的细胞转染效率 | 第42-44页 |
| ·以PHEMA-g-(PEI-b-PEG)为载体的p53基因治疗效果显著 | 第44-46页 |
| ·PHEMA-g-(PEI-b-PEG)为载体的p53基因治疗促进肿瘤对化疗药物阿霉素敏感性 | 第46-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
| 第三章 利用cRGD官能化的纳米颗粒靶向输送miR-296反义核酸用于抗血管增生研究 | 第51-69页 |
| ·引言 | 第51-52页 |
| ·实验材料 | 第52-54页 |
| ·主要材料 | 第52-53页 |
| ·实验动物 | 第53页 |
| ·细胞株 | 第53页 |
| ·主要药品及试剂 | 第53-54页 |
| ·实验方法 | 第54-56页 |
| ·靶向颗粒cRGD-LPH-NP和非靶向颗粒Non-targeted LPH-NP的制备 | 第54页 |
| ·cRGD-LPH-NP和Non-targeted LPH-NP的粒径及表面电势检测 | 第54-55页 |
| ·cRGD-LPH-NP和Non-targeted LPH-NP细胞内吞能力检测 | 第55页 |
| ·体外水平上抑制miR-296表达的检测 | 第55页 |
| ·miR-296下游调控蛋白表达的检测 | 第55页 |
| ·体外水平血管增生检测 | 第55-56页 |
| ·体外水平细胞迁移检测 | 第56页 |
| ·利用基质胶塞模型在体内检测血管增生的抑制效果 | 第56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-66页 |
| ·对靶向颗粒cRGD-LPH-NP制备的优化 | 第56-58页 |
| ·靶向颗粒cRGD-LPH-NP通过受体介导的方式被细胞内吞 | 第58-60页 |
| ·利用cRGD-LPH-NP输送anti-miR-296 AMO在体外水平有效降低miR-296的表达,并提高其下游的HGS蛋白含量 | 第60-61页 |
| ·靶向输送anti-miR-296 AMO在体外有效抑制血管增生 | 第61-63页 |
| ·靶向输送anti-miR-296 AMO在体内有效抑制血管增生 | 第63-66页 |
| ·本章小结 | 第66页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
| 第四章 纳米胶束输送siRNA下调缺氧特异表达HIF-1α对肿瘤生长抑制的研究 | 第69-89页 |
| ·引言 | 第69-70页 |
| ·实验材料 | 第70-72页 |
| ·主要材料 | 第70-71页 |
| ·实验动物 | 第71页 |
| ·细胞株 | 第71页 |
| ·主要药品及试剂 | 第71-72页 |
| ·实验方法 | 第72-76页 |
| ·制备混合胶束颗粒(MNP)和MNP_(siRNA)复合物 | 第72-73页 |
| ·MNP_(siRNA)复合物的稳定性检测 | 第73页 |
| ·MNP和MNP_(siRNA)复合物的粒径和电势分析 | 第73页 |
| ·流式细胞术检测MNP_(FAM-siRNA)复合物被肿瘤细胞的内吞 | 第73页 |
| ·体外缺氧条件下抑制HIF-1α表达的研究 | 第73-74页 |
| ·体外缺氧条件下利用MNP_(siHIF)抑制H1F-1α表达对克隆形成的影响 | 第74页 |
| ·体外缺氧条件下利用MNP_(siHIF)抑制HIF-1α表达对细胞迁移的影响 | 第74页 |
| ·体外缺氧条件下利用MNP_(siHIF)抑制HIF-1α表达对血管增生影响的研究 | 第74页 |
| ·MNP_(siHIF)抑制HIF-1α表达后细胞对阿霉素敏感性的研究 | 第74-75页 |
| ·裸鼠皮下前列腺癌模型的治疗研究 | 第75页 |
| ·肿瘤组织中的HIF-1α和MDR1表达水平检测 | 第75-76页 |
| ·TUNEL染色检测乳腺癌原位肿瘤细胞凋亡 | 第76页 |
| ·免疫组化检测细胞增殖 | 第76页 |
| ·结果与讨论 | 第76-86页 |
| ·混合胶束(MNP)能够有效包载siRNA形成复合物 | 第76-77页 |
| ·MNP_(siRNA)复合物被细胞有效内吞 | 第77-78页 |
| ·在体外模拟缺氧条件下MNP_(siHIF)对HIF-1α基因表达的下调 | 第78-80页 |
| ·在体外模拟缺氧条件下转染MNP_(siHIF)抑制PC3细胞增殖和迁移 | 第80-81页 |
| ·在体外模拟缺氧条件下转染MNP_(siHIF)抑制血管增生 | 第81-82页 |
| ·MNP_(siHIF)对缺氧诱导的耐药性的抑制效果 | 第82-83页 |
| ·MNP_(siHIF)系统给药体内抑制肿瘤生长和提高对化疗药物敏感性 | 第83-85页 |
| ·MNP_(siHIF)系统给药通过抑制肿瘤中细胞增殖和促进凋亡发挥作用 | 第85-86页 |
| ·本章小结 | 第86页 |
| 参考文献 | 第86-89页 |
| 附录 常规试剂 | 第89-90页 |
| 附录 主要溶液配制 | 第90-92页 |
| 附录 主要仪器设备 | 第92-93页 |
| 附录 常规实验方法 | 第93-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第99-100页 |
