| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-15页 |
| 材料与方法 | 第15-43页 |
| 1 实验材料 | 第15-19页 |
| ·试剂 | 第15-16页 |
| ·金颗粒 | 第16页 |
| ·脂质体 | 第16-17页 |
| ·卡介苗 | 第17页 |
| ·试验动物 | 第17页 |
| ·质粒载体 | 第17-18页 |
| ·菌株和细胞株 | 第18页 |
| ·主要仪器设备 | 第18-19页 |
| 2 实验方法 | 第19-43页 |
| ·常用的分子生物学方法 | 第19-22页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第19-21页 |
| ·DNA片段的琼脂糖凝胶电泳回收 | 第21页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第21-22页 |
| ·DNA转化感受态细菌 | 第22页 |
| ·重组蛋白质的提取、纯化和切割 | 第22-24页 |
| ·重组蛋白质样品准备 | 第22-23页 |
| ·过柱前试剂准备 | 第23页 |
| ·过柱前镍柱准备 | 第23页 |
| ·蛋白质纯化步骤 | 第23-24页 |
| ·上样后镍柱处理 | 第24页 |
| ·透析及浓缩蛋白质溶液 | 第24页 |
| ·融合的蛋白质过分子筛去除残余宿主蛋白质以及内毒素 | 第24-25页 |
| ·样品准备 | 第24页 |
| ·上柱前试剂准备 | 第24-25页 |
| ·样品过Sephacryl S200纯化步骤 | 第25页 |
| ·鲎试剂定量法检测纯化蛋白质和DNA质粒疫苗残存内毒素含量 | 第25页 |
| ·蛋白质浓度的检测 | 第25-26页 |
| ·紫外吸收法检测蛋白质浓度 | 第25页 |
| ·Brandford法测蛋白质浓度 | 第25-26页 |
| ·细胞生物学操作 | 第26-28页 |
| ·细胞培养 | 第26页 |
| ·细胞复苏 | 第26页 |
| ·细胞的镜下观察 | 第26页 |
| ·贴壁细胞的胰蛋白酶消化和传代 | 第26-27页 |
| ·细胞计数 | 第27页 |
| ·细胞冻存 | 第27-28页 |
| ·基因枪操作 | 第28-30页 |
| ·试剂准备 | 第28页 |
| ·仪器准备 | 第28-29页 |
| ·制作DNA/microcarrier | 第29页 |
| ·制作子弹 | 第29-30页 |
| ·射击 | 第30页 |
| ·活体电穿孔操作 | 第30-31页 |
| ·脂质体处理 | 第31页 |
| ·动物免疫 | 第31-34页 |
| ·免疫对象 | 第31页 |
| ·试验分组 | 第31页 |
| ·免疫程序 | 第31页 |
| ·免疫试剂 | 第31-32页 |
| ·裸DNA肌肉注射 | 第32页 |
| ·裸DNA皮下注射 | 第32页 |
| ·脂质体免疫 | 第32页 |
| ·活体电穿孔免疫 | 第32页 |
| ·基因枪免疫 | 第32-33页 |
| ·试验分组 | 第33-34页 |
| ·酶联免疫吸附测定 | 第34-35页 |
| ·IgG亚型鉴定 | 第35-36页 |
| ·间接免疫荧光分析 | 第36-37页 |
| ·淋巴细胞增殖实验 | 第37-39页 |
| ·在鼠疟动物模型中对P.yoelii的攻击的交叉保护实验 | 第39页 |
| ·恶性疟原虫的体外培养 | 第39-43页 |
| ·溶液配方 | 第39-41页 |
| ·细胞复苏步骤 | 第41页 |
| ·细胞换液 | 第41页 |
| ·细胞的冻存 | 第41-43页 |
| 实验流程图 | 第43-44页 |
| 实验结果 | 第44-58页 |
| 第一部分:M.RCAg-1疫苗的鉴定、M.RCAg-1蛋白质以及脂质体包封率的鉴定 | 第44-47页 |
| 1 M.RCAg-1基因疫苗的鉴定 | 第44页 |
| 2 M.RCAg-1蛋白质的鉴定 | 第44-46页 |
| 3 脂质体包封率的鉴定 | 第46-47页 |
| 第二部分:M.RC-Ag1疫苗在小鼠体内免疫原性及其免疫机制初探 | 第47-55页 |
| 1 抗体水平及持续时间 | 第47-48页 |
| 2 对天然虫体蛋白质的识别(IFA) | 第48-50页 |
| 3 抗体亚型分析 | 第50-53页 |
| 4 淋巴细胞增殖试验 | 第53页 |
| 5 M.RCAg-1基因疫苗对约氏疟攻击的交叉保护作用 | 第53-55页 |
| 第三部分:不同粒径的金颗粒对基因枪免疫效果的影响 | 第55-58页 |
| 1.使用不同粒径金颗粒作载体免疫时M.RCAg-IDNA疫苗诱导产生的抗体水平及维持时间比较 | 第55-56页 |
| 2.抗血清对天然虫体蛋白的识别 | 第56页 |
| 3.不同粒径金颗粒免疫组脾脏淋巴细胞增殖试验结果分析 | 第56-58页 |
| 讨论 | 第58-66页 |
| 小结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 文献综述:恶性疟疾的免疫缺陷小鼠模型研究进展 | 第71-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 附录:常用英汉缩略语 | 第77-78页 |
