| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-37页 |
| ·课题的学术背景及其理论与实际意义 | 第15-16页 |
| ·国内外文献综述 | 第16-36页 |
| ·化学除草剂产业面临的问题和发展趋势 | 第16-19页 |
| ·生物除草剂的发展现状 | 第19-24页 |
| ·AROM蛋白和EPSP合酶的研究进展 | 第24-31页 |
| ·基因扩增和表达的发展概况 | 第31-36页 |
| ·核盘菌生物除草剂和EPSP合酶研究中有待解决的问题 | 第36页 |
| ·课题的主要研究内容 | 第36-37页 |
| 第2章 实验材料和方法 | 第37-62页 |
| ·实验材料 | 第37-45页 |
| ·菌株和质粒 | 第37页 |
| ·培养基 | 第37-39页 |
| ·酶和试剂 | 第39-44页 |
| ·仪器设备 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-62页 |
| ·化学除草剂对核盘菌生长影响的测定 | 第45-46页 |
| ·核盘菌EPSP合酶的酶学特征研究 | 第46-50页 |
| ·核盘菌arom基因的克隆与序列分析 | 第50-55页 |
| ·核盘菌EPSP合酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第55-58页 |
| ·核盘菌arom基因在酿酒酵母中的表达 | 第58-62页 |
| 第3章 化学除草剂对核盘菌生长影响的测定 | 第62-69页 |
| ·化学除草剂对核盘菌菌丝生长的影响 | 第62-63页 |
| ·化学除草剂对核盘菌菌核生长的影响 | 第63页 |
| ·化学除草剂对核盘菌菌核萌发的影响 | 第63-66页 |
| ·关于核盘菌生长受化学除草剂影响特征的分析 | 第66-68页 |
| ·本章小结 | 第68-69页 |
| 第4章 核盘菌EPSP合酶的酶学特性研究 | 第69-84页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第69页 |
| ·碳源和氮源对核盘菌EPSP合酶酶活的影响 | 第69-71页 |
| ·核盘菌AROM蛋白的纯化 | 第71-73页 |
| ·核盘菌EPSP合酶最适温度和最适pH值的测定 | 第73页 |
| ·金属离子和化合物对核盘菌EPSPS酶活的影响 | 第73-74页 |
| ·核盘菌EPSP合酶的热稳定性和酸碱稳定性 | 第74-75页 |
| ·底物对核盘菌EPSP合酶的影响 | 第75-77页 |
| ·核盘菌EPSP合酶Hill系数和表观动力学常数的测定 | 第77-79页 |
| ·核盘菌EPSP合酶表观抑制剂常数Ki（PEP）的测定 | 第79-80页 |
| ·关于核盘菌EPSPS酶学特征的分析 | 第80-83页 |
| ·本章小结 | 第83-84页 |
| 第5章 核盘菌arom基因的克隆与序列分析 | 第84-110页 |
| ·核盘菌arom基因片段的克隆和测序 | 第84-85页 |
| ·核盘菌arom基因3′末端的扩增和测序 | 第85-88页 |
| ·核盘菌arom基因5′末端的扩增和测序 | 第88-90页 |
| ·核盘菌arom基因和AROM蛋白的序列分析 | 第90-104页 |
| ·核盘菌arom基因的一级结构分析 | 第90-93页 |
| ·核盘菌AROM蛋白的二级结构预测 | 第93-101页 |
| ·核盘菌AROM蛋白结构域的三级结构预测 | 第101-104页 |
| ·关于arom基因扩增方法的分析 | 第104-106页 |
| ·关于核盘菌arom基因和AROM蛋白结构的分析 | 第106-109页 |
| ·本章小结 | 第109-110页 |
| 第6章 核盘菌EPSP合酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第110-120页 |
| ·表达载体pGEX-DE和pGEX-E的构建、转化和表达 | 第110-114页 |
| ·构建表达载体pGEX-DE和pGEX-E | 第110-113页 |
| ·pGEX-DE和pGEX-E转化子的分析 | 第113-114页 |
| ·表达载体pET-DE和pET-E的构建、转化和表达 | 第114-116页 |
| ·构建表达载体pET28-DE和pET28-E | 第114-116页 |
| ·pET28-DE和pET28-E转化子的分析 | 第116页 |
| ·关于核盘菌EPSP合酶基因大肠杆菌表达的讨论 | 第116-118页 |
| ·本章小结 | 第118-120页 |
| 第7章 核盘菌arom基因在酿酒酵母中的表达 | 第120-128页 |
| ·核盘菌arom基因编码框序列的扩增和酶切鉴定 | 第120页 |
| ·酵母表达载体pYE52-arom的构建 | 第120-122页 |
| ·pYE52-arom酿酒酵母转化子的鉴定 | 第122-123页 |
| ·pYE52-arom转化子的分子检测和EPSPS活性测定 | 第123-125页 |
| ·关于核盘菌arom基因在酿酒酵母中表达的讨论 | 第125-127页 |
| ·本章小结 | 第127-128页 |
| 结论 | 第128-130页 |
| 参考文献 | 第130-143页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第143-144页 |
| 哈尔滨工业大学博士学位论文原创性声明 | 第144页 |
| 哈尔滨工业大学博士学位论文使用授权书 | 第144页 |
| 哈尔滨工业大学博士学位涉密论文管理 | 第144-145页 |
| 致谢 | 第145-146页 |
| 个人简历 | 第146页 |
