摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
目录 | 第9-11页 |
前言 | 第11-13页 |
第一章 鸡抗马立克氏病遗传育种的研究进展 | 第13-32页 |
1 鸡抗MD遗传育种的研究进展 | 第14-15页 |
·表型选择 | 第14-15页 |
·DNA分子标记辅助育种 | 第15页 |
·鸡抗MD的转基因育种 | 第15页 |
2 鸡抗MD遗传机制研究概况 | 第15-22页 |
·抗感染 | 第16页 |
·抗发病 | 第16-22页 |
3 检测基因表达分析方法的比较 | 第22-24页 |
·Northern印迹杂交(Northern blot) | 第23页 |
·核糖核酸酶保护试验(Ribonuclease Protection Assay,RPA) | 第23页 |
·实时定量PCR技术(Real-time quantitative PCR,RQ-PCR) | 第23-24页 |
4 鸡抗MD育种的前景展望 | 第24-25页 |
5 开展本课题研究的技术路线及其可行性分析 | 第25-26页 |
参考文献 | 第26-32页 |
第二章 纯合基因型MD抗性与易感霞烟鸡MHC B-L BⅡ基因序列的测定与比较分析 | 第32-46页 |
1 材料与方法 | 第33-35页 |
·材料 | 第33页 |
·方法 | 第33-35页 |
2 结果 | 第35-42页 |
·霞烟鸡B-L BⅡ基因的PCR扩增 | 第35-36页 |
·B-L BⅡ基因6种PCR-RFLP基因型检测结果 | 第36-38页 |
·B-L BⅡ等位基因纯合型鸡只的确定 | 第38页 |
·纯合基因型鸡只的B-L BⅡ基因核甘酸序列的比较分析 | 第38-42页 |
3 小结与讨论 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-46页 |
第三章 定量测定MD抗性与易感霞烟鸡GH基因mRNA核糖核酸酶保护法的建立 | 第46-57页 |
1 材料与方法 | 第47-51页 |
·材料 | 第47页 |
·方法 | 第47-51页 |
2 结果 | 第51-54页 |
·提取细胞内总RNA | 第51-52页 |
·cGH基因的扩增 | 第52页 |
·pMD18-T-cGH重组质粒的酶切、PCR和测序鉴定 | 第52-53页 |
·cGH3的PCR扩增 | 第53页 |
·pMD18-T-cGH3重组质粒的酶切、PCR和测序鉴定 | 第53页 |
·pSP72-cGH3重组质粒的酶切鉴定 | 第53页 |
·反义cGH3 RNA探针的鉴定 | 第53-54页 |
·GH RPA检测结果 | 第54页 |
3 小结与讨论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-57页 |
第四章 实时荧光定量PCR检测霞烟鸡B-F基因和GH基因表达标准品质粒和标准曲线的构建 | 第57-67页 |
1 材料与方法 | 第58-59页 |
·材料 | 第58页 |
·方法 | 第58-59页 |
2 结果 | 第59-64页 |
·RT-PCR扩增GH基因、B-F基因和GAPDH基因目的片段 | 第59-60页 |
·重组质粒的PCR、酶切鉴定 | 第60页 |
·标准品OD值测定 | 第60-61页 |
·标准曲线的构建 | 第61-64页 |
3 小结和讨论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-67页 |
结论 | 第67-68页 |
附录 | 第68-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
个人简历 | 第73页 |
攻读硕士学位期间所发表的学术论文 | 第73页 |
攻读硕士学位期间所参与的科研课题 | 第73页 |