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禽网状内皮组织增生症病毒感染对肉鸡主要免疫器官白细胞介素18产生的影响

符号说明第1-12页
中文摘要第12-14页
Abstract第14-16页
1 引言第16-40页
   ·白细胞介素18 的研究进展第16-20页
     ·IL-18 基因结构及其表达的调节第16-17页
     ·IL-18 的表达第17页
     ·IL-18 的受体与信号转导第17-18页
     ·IL-18 与机体防御第18-20页
       ·抗细菌感染第18-19页
       ·抗病毒感染第19页
       ·抗真菌、原虫和寄生虫感染第19页
       ·在自动免疫和炎症疾病中的作用第19-20页
       ·抗肿瘤作用第20页
   ·鸡白细胞介素18 的研究进展第20-25页
     ·ChIL-18 的分子生物学特性第20-22页
     ·ChIL-18 的生物学功能第22-24页
       ·诱导IFN-γ以及多种细胞因子的产生第22-23页
       ·免疫增强剂和抗感染作用第23页
       ·抗肿瘤作用第23-24页
     ·ChIL-18 的应用前景第24-25页
       ·免疫系统的保护作用第24页
       ·对感染性疾病的治疗作用第24-25页
   ·REV 研究进展第25-30页
     ·病原学第25-26页
     ·流行病学第26-27页
     ·免疫抑制机理第27-29页
       ·免疫器官造成严重的器质性伤害第27页
       ·减少免疫活性细胞的数量第27-28页
       ·抑制免疫活性细胞的活性第28页
       ·通过影响一些免疫活性因子的活性造成免疫抑制第28页
       ·对部分病原微生物易感性增强第28-29页
     ·症状及病理变化第29-30页
       ·急性网状细胞肿瘤形成第29页
       ·矮小病综合症第29页
       ·慢性肿瘤形成第29-30页
       ·防制第30页
   ·细胞因子的检测第30-36页
     ·细胞因子检测的意义第30-31页
     ·细胞因子检测方法第31-32页
       ·分子生物学检测方法第31页
       ·生物学活性检测方法第31页
       ·免疫学检测方法第31-32页
     ·鸡病毒性免疫抑制病中细胞因子的检测第32-36页
       ·MDV 感染对鸡细胞因子产生的影响第33-34页
       ·REV 感染对鸡细胞因子产生的影响第34-35页
       ·CAV 感染对鸡细胞因子产生的影响第35页
       ·IBDV 感染对鸡细胞因子产生的影响第35页
       ·NDV 感染对鸡细胞因子产生的影响第35页
       ·其它病毒感染对鸡细胞因子产生的影响第35-36页
   ·实时荧光定量PCR 研究进展第36-40页
     ·实时荧光定量PCR 的原理第36页
     ·实时荧光定量PCR 的分类第36-37页
       ·TaqMan 探针法第36页
       ·SYBR GreenI 荧光染料法第36-37页
       ·TaqMan MGB 探针第37页
       ·分子信标第37页
       ·双杂交探针第37页
     ·实时荧光定量PCR 的定量方法第37-38页
       ·绝对定量第37-38页
       ·相对定量第38页
     ·实时荧光定量PCR 的应用第38-40页
       ·病原体的分子检测第38页
       ·肿瘤的分子诊断第38页
       ·细胞因子的表达分析第38-39页
       ·基因表达研究第39页
       ·转基因研究第39页
       ·结语第39-40页
2 材料与方法第40-58页
   ·材料第40-43页
     ·菌株与载体第40页
     ·实验动物与病毒第40页
     ·试剂与耗材第40页
     ·仪器与设备第40-41页
     ·实验室常用各种培养基和溶液的配制第41-42页
       ·LB 液体培养基第41页
       ·LB/Amp/X-gal/IPTG 平板培养基第41-42页
     ·引物设计及合成第42-43页
   ·方法第43-58页
     ·鸡白细胞介素18 SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR 方法的建立第43-53页
       ·IL-18 部分基因重组质粒的构建第43-47页
       ·RPL4 部分基因重组质粒的构建第47-52页
       ·荧光定量PCR 反应条件的摸索及标准曲线的建立第52-53页
     ·鸡白细胞介素18 TaqMan 探针荧光定量RT-PCR 方法的建立错误第53-55页
       ·PCR 反应体系第53-54页
       ·荧光定量PCR 反应条件的摸索及标准曲线的建立第54-55页
     ·REV 对1 日龄普通肉鸡的致病性观察第55-56页
       ·人工感染第56页
       ·统计学分析第56页
     ·实时荧光定量RT-PCR 检测REV 感染肉鸡主要免疫器官IL-18 基因表达量的研究第56-58页
       ·动物实验处理第56页
       ·RNA 的提取第56-57页
       ·RT 反应第57页
       ·实时荧光定量PCR 检测不同时间点脾脏IL-18 基因m RNA 的转录水平第57页
       ·数据处理与分析第57-58页
3 结果与分析第58-74页
   ·鸡白细胞介素18 SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR 方法的建立第58-65页
     ·IL-18 部分基因重组质粒的构建结果第58-60页
       ·IL-18 部分基因的PCR 扩增电泳图第58页
       ·IL-18 基因片段重组质粒的酶切结果第58-59页
       ·测序结果第59-60页
     ·RPL4 部分基因重组质粒的构建结果第60-62页
       ·RNA 电泳图第60页
       ·RNA 的提取效果第60页
       ·RPL4 部分基因的RT-PCR 扩增电泳图第60页
       ·RPL4 基因片段重组质粒的酶切结果第60-61页
       ·测序结果第61-62页
     ·荧光定量 PCR 建立的结果第62页
       ·标准品的处理效果第62页
     ·SYBR GreenⅠ实时荧光定量 PCR 的建立第62-65页
       ·SYBR GreenⅠ实时荧光定量 PCR 扩增动力学曲线第62-63页
       ·SYBR GreenⅠ实时荧光定量 PCR 扩增熔解曲线第63页
       ·荧光定量 PCR 检测 IL-18 和 RPL4 敏感度分析第63页
       ·荧光定量 PCR 检测 IL-18 和 RPL4 重复性分析第63-64页
       ·SYBR GreenⅠ实时荧光定量 PCR 扩增的标准曲线第64-65页
   ·鸡白细胞介素18 TaqMan 探针荧光定量RT-PCR 方法的建立第65-67页
     ·IL-18 和RPL4 部分基因的RT-PCR 扩增电泳图第65-66页
     ·标准品的处理效果第66页
       ·标准品的浓度及纯度第66页
       ·标准品浓度的选择结果第66页
     ·实时荧光定量PCR 的建立第66-67页
   ·REV 对1 日龄普通肉鸡的致病性观察第67-71页
     ·临床症状第67页
     ·死亡统计第67-68页
     ·增重影响第68页
     ·免疫器官指数影响第68-71页
       ·脾脏指数第69页
       ·胸腺指数第69-70页
       ·法氏囊指数第70-71页
   ·实时荧光定量 RT-PCR 检测 REV 感染肉鸡主要免疫器官 IL-18 基因表达 量的研究第71-74页
4 讨论第74-78页
   ·鸡白细胞介素18 SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR 方法的建立第74-75页
   ·鸡白细胞介素18 TaqMan 探针荧光定量RT-PCR 方法的建立第75-76页
   ·REV 对1 日龄普通肉鸡的致病性观察第76页
   ·实时荧光定量 RT-PCR 检测 REV 感染肉鸡主要免疫器官 IL-18 基因表达量的研究第76-78页
结论第78-79页
参考文献第79-91页
致谢第91-92页
攻读学位期间发表论文情况第92-93页
硕士学位论文内容简介及自评第93页

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