符号说明 | 第1-12页 |
中文摘要 | 第12-14页 |
Abstract | 第14-16页 |
1 引言 | 第16-40页 |
·白细胞介素18 的研究进展 | 第16-20页 |
·IL-18 基因结构及其表达的调节 | 第16-17页 |
·IL-18 的表达 | 第17页 |
·IL-18 的受体与信号转导 | 第17-18页 |
·IL-18 与机体防御 | 第18-20页 |
·抗细菌感染 | 第18-19页 |
·抗病毒感染 | 第19页 |
·抗真菌、原虫和寄生虫感染 | 第19页 |
·在自动免疫和炎症疾病中的作用 | 第19-20页 |
·抗肿瘤作用 | 第20页 |
·鸡白细胞介素18 的研究进展 | 第20-25页 |
·ChIL-18 的分子生物学特性 | 第20-22页 |
·ChIL-18 的生物学功能 | 第22-24页 |
·诱导IFN-γ以及多种细胞因子的产生 | 第22-23页 |
·免疫增强剂和抗感染作用 | 第23页 |
·抗肿瘤作用 | 第23-24页 |
·ChIL-18 的应用前景 | 第24-25页 |
·免疫系统的保护作用 | 第24页 |
·对感染性疾病的治疗作用 | 第24-25页 |
·REV 研究进展 | 第25-30页 |
·病原学 | 第25-26页 |
·流行病学 | 第26-27页 |
·免疫抑制机理 | 第27-29页 |
·免疫器官造成严重的器质性伤害 | 第27页 |
·减少免疫活性细胞的数量 | 第27-28页 |
·抑制免疫活性细胞的活性 | 第28页 |
·通过影响一些免疫活性因子的活性造成免疫抑制 | 第28页 |
·对部分病原微生物易感性增强 | 第28-29页 |
·症状及病理变化 | 第29-30页 |
·急性网状细胞肿瘤形成 | 第29页 |
·矮小病综合症 | 第29页 |
·慢性肿瘤形成 | 第29-30页 |
·防制 | 第30页 |
·细胞因子的检测 | 第30-36页 |
·细胞因子检测的意义 | 第30-31页 |
·细胞因子检测方法 | 第31-32页 |
·分子生物学检测方法 | 第31页 |
·生物学活性检测方法 | 第31页 |
·免疫学检测方法 | 第31-32页 |
·鸡病毒性免疫抑制病中细胞因子的检测 | 第32-36页 |
·MDV 感染对鸡细胞因子产生的影响 | 第33-34页 |
·REV 感染对鸡细胞因子产生的影响 | 第34-35页 |
·CAV 感染对鸡细胞因子产生的影响 | 第35页 |
·IBDV 感染对鸡细胞因子产生的影响 | 第35页 |
·NDV 感染对鸡细胞因子产生的影响 | 第35页 |
·其它病毒感染对鸡细胞因子产生的影响 | 第35-36页 |
·实时荧光定量PCR 研究进展 | 第36-40页 |
·实时荧光定量PCR 的原理 | 第36页 |
·实时荧光定量PCR 的分类 | 第36-37页 |
·TaqMan 探针法 | 第36页 |
·SYBR GreenI 荧光染料法 | 第36-37页 |
·TaqMan MGB 探针 | 第37页 |
·分子信标 | 第37页 |
·双杂交探针 | 第37页 |
·实时荧光定量PCR 的定量方法 | 第37-38页 |
·绝对定量 | 第37-38页 |
·相对定量 | 第38页 |
·实时荧光定量PCR 的应用 | 第38-40页 |
·病原体的分子检测 | 第38页 |
·肿瘤的分子诊断 | 第38页 |
·细胞因子的表达分析 | 第38-39页 |
·基因表达研究 | 第39页 |
·转基因研究 | 第39页 |
·结语 | 第39-40页 |
2 材料与方法 | 第40-58页 |
·材料 | 第40-43页 |
·菌株与载体 | 第40页 |
·实验动物与病毒 | 第40页 |
·试剂与耗材 | 第40页 |
·仪器与设备 | 第40-41页 |
·实验室常用各种培养基和溶液的配制 | 第41-42页 |
·LB 液体培养基 | 第41页 |
·LB/Amp/X-gal/IPTG 平板培养基 | 第41-42页 |
·引物设计及合成 | 第42-43页 |
·方法 | 第43-58页 |
·鸡白细胞介素18 SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR 方法的建立 | 第43-53页 |
·IL-18 部分基因重组质粒的构建 | 第43-47页 |
·RPL4 部分基因重组质粒的构建 | 第47-52页 |
·荧光定量PCR 反应条件的摸索及标准曲线的建立 | 第52-53页 |
·鸡白细胞介素18 TaqMan 探针荧光定量RT-PCR 方法的建立错误 | 第53-55页 |
·PCR 反应体系 | 第53-54页 |
·荧光定量PCR 反应条件的摸索及标准曲线的建立 | 第54-55页 |
·REV 对1 日龄普通肉鸡的致病性观察 | 第55-56页 |
·人工感染 | 第56页 |
·统计学分析 | 第56页 |
·实时荧光定量RT-PCR 检测REV 感染肉鸡主要免疫器官IL-18 基因表达量的研究 | 第56-58页 |
·动物实验处理 | 第56页 |
·RNA 的提取 | 第56-57页 |
·RT 反应 | 第57页 |
·实时荧光定量PCR 检测不同时间点脾脏IL-18 基因m RNA 的转录水平 | 第57页 |
·数据处理与分析 | 第57-58页 |
3 结果与分析 | 第58-74页 |
·鸡白细胞介素18 SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR 方法的建立 | 第58-65页 |
·IL-18 部分基因重组质粒的构建结果 | 第58-60页 |
·IL-18 部分基因的PCR 扩增电泳图 | 第58页 |
·IL-18 基因片段重组质粒的酶切结果 | 第58-59页 |
·测序结果 | 第59-60页 |
·RPL4 部分基因重组质粒的构建结果 | 第60-62页 |
·RNA 电泳图 | 第60页 |
·RNA 的提取效果 | 第60页 |
·RPL4 部分基因的RT-PCR 扩增电泳图 | 第60页 |
·RPL4 基因片段重组质粒的酶切结果 | 第60-61页 |
·测序结果 | 第61-62页 |
·荧光定量 PCR 建立的结果 | 第62页 |
·标准品的处理效果 | 第62页 |
·SYBR GreenⅠ实时荧光定量 PCR 的建立 | 第62-65页 |
·SYBR GreenⅠ实时荧光定量 PCR 扩增动力学曲线 | 第62-63页 |
·SYBR GreenⅠ实时荧光定量 PCR 扩增熔解曲线 | 第63页 |
·荧光定量 PCR 检测 IL-18 和 RPL4 敏感度分析 | 第63页 |
·荧光定量 PCR 检测 IL-18 和 RPL4 重复性分析 | 第63-64页 |
·SYBR GreenⅠ实时荧光定量 PCR 扩增的标准曲线 | 第64-65页 |
·鸡白细胞介素18 TaqMan 探针荧光定量RT-PCR 方法的建立 | 第65-67页 |
·IL-18 和RPL4 部分基因的RT-PCR 扩增电泳图 | 第65-66页 |
·标准品的处理效果 | 第66页 |
·标准品的浓度及纯度 | 第66页 |
·标准品浓度的选择结果 | 第66页 |
·实时荧光定量PCR 的建立 | 第66-67页 |
·REV 对1 日龄普通肉鸡的致病性观察 | 第67-71页 |
·临床症状 | 第67页 |
·死亡统计 | 第67-68页 |
·增重影响 | 第68页 |
·免疫器官指数影响 | 第68-71页 |
·脾脏指数 | 第69页 |
·胸腺指数 | 第69-70页 |
·法氏囊指数 | 第70-71页 |
·实时荧光定量 RT-PCR 检测 REV 感染肉鸡主要免疫器官 IL-18 基因表达 量的研究 | 第71-74页 |
4 讨论 | 第74-78页 |
·鸡白细胞介素18 SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR 方法的建立 | 第74-75页 |
·鸡白细胞介素18 TaqMan 探针荧光定量RT-PCR 方法的建立 | 第75-76页 |
·REV 对1 日龄普通肉鸡的致病性观察 | 第76页 |
·实时荧光定量 RT-PCR 检测 REV 感染肉鸡主要免疫器官 IL-18 基因表达量的研究 | 第76-78页 |
结论 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第92-93页 |
硕士学位论文内容简介及自评 | 第93页 |