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大肠杆菌气溶胶和新甲型H1N1病毒气溶胶发生和传播的鉴定

符号说明第1-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-13页
前言第13-35页
   ·微生物气溶胶的概念第13页
   ·微生物气溶胶的危害第13-15页
     ·微生物气溶胶对畜牧业的危害第14-15页
     ·微生物气溶胶对人类健康的危害第15页
   ·微生物气溶胶的检测第15-19页
     ·射流撞击式微生物采样器第16-19页
       ·ANDERSEN 采样器生物采样器概述第16页
       ·工作原理第16-18页
       ·ANDERSEN 采样器特点第18页
       ·AGI-30 采样器第18页
       ·ANDERSEN 采样器参数第18-19页
     ·RCS 型采样器第19页
   ·微生物气溶胶学的应用第19-20页
     ·应用于动物疫病防治方面第19-20页
     ·应用于植物疫病防治方面第20页
   ·微生物气溶胶传播机制的研究第20-21页
   ·微生物气溶胶的国内外研究现状第21-22页
     ·微生物气溶胶的国内研究现状第21-22页
     ·微生物气溶胶的国外研究现状第22页
   ·研究背景第22-33页
     ·ERIC-PCR 技术第24页
     ·肠杆菌基因间重复共有序列(ERIC) 的发现与分布第24页
     ·ERIC 结构特征及功能第24-25页
     ·ERIC-PCR 的原理及特点第25页
     ·ERIC-PCR 产物形成规律第25-26页
     ·ERIC-PCR 技术的应用第26-28页
       ·在菌株分类和鉴定中的应用第26-27页
       ·在混合菌样品中的应用第27-28页
       ·ERIC-PCR 在流行病调查中的应用第28页
     ·存在的问题和展望第28-29页
     ·脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)原理第29-30页
     ·脉冲场凝胶电泳的应用第30-31页
     ·PULSNET 和 PULSNET CHINA第31-32页
     ·PFGE 方法的局限和不足第32-33页
     ·荧光定量 PCR(TAQMAN PROBE)第33页
   ·本研究的目的及意义第33-35页
2 材料和方法第35-45页
   ·材料第35-37页
     ·鸡场情况第35页
     ·猪舍空气样品及病料第35页
     ·主要试剂、选择性培养基第35-36页
     ·主要仪器设备第36-37页
   ·鸡舍内外环境气载大肠杆菌和需氧菌气溶胶含量测定第37-38页
     ·实验设计第37页
     ·样本的采集第37页
     ·空气中需氧菌浓度计算第37-38页
     ·空气中大肠杆菌的分离、鉴定与浓度计算第38页
     ·鸡粪便中大肠杆菌的分离、鉴定第38页
     ·细菌数数据分析第38页
   ·ERIC-PCR 对舍内外不同距离大肠杆菌的同源性鉴定第38-39页
     ·模板的制备第38页
     ·ERIC-PCR第38-39页
   ·PFGE 鉴定第39-42页
     ·胶块的制备第39-40页
     ·细胞的裂解第40页
     ·洗胶块第40页
     ·胶块内 DNA 的酶切第40-41页
     ·加样第41页
     ·电泳第41页
     ·图像的获取第41-42页
     ·ERIC-PCR 和PFGE指纹图谱分析第42页
   ·实时荧光定量RT-PCR 对新型H1N1 病毒的检测方法的建立第42-44页
     ·引物和TAQMAN 荧光探针的设计第42-43页
     ·CDNA 的合成第43页
     ·标准品的制备及稀释第43页
     ·荧光定量PCR 检测第43页
     ·特异性评价第43-44页
     ·敏感性、重复性评价及标准曲线的建立第44页
   ·实时荧光定量RT-PCR 对气载新型H1N1 病毒的检测第44-45页
     ·猪舍空气样品及病料的采集第44页
     ·猪舍空气样品的处理第44页
     ·病猪病料及血液的处理第44页
     ·气溶胶样品中病毒浓度的快速监测与定量样品的检测第44-45页
3 结果与分析第45-58页
   ·舍内外不同距离气载大肠杆菌含量第45-46页
   ·鸡舍内外气载需氧菌含量分布第46-47页
   ·ERIC-PCR 鉴定结果第47-51页
   ·PFGE 鉴定结果第51-54页
   ·两种分子生物学分型方法取得结果的对比分析第54页
   ·标准品测序结果第54-55页
   ·检测体系的特异性鉴定第55页
   ·标准曲线的建立第55-57页
   ·猪舍环境空气样品及病料的检测第57-58页
4 讨论第58-62页
   ·大肠杆菌对动物造成的危害第58-59页
   ·微生物气溶胶的含量与动物疾病的关系第59页
   ·ERIC-PCR 和 PFGE 对大肠杆菌由舍内向舍外传播的鉴定第59-61页
   ·两种分子生物学分型方法取得结果的对比分析第61页
   ·建立快速检测方法对环境中新型 H1N1 病毒的检测第61页
   ·本研究的不足之处第61-62页
5 结论第62-64页
   ·不同地点气载需氧菌和大肠杆菌气溶胶的含量及其意义第62页
     ·P FGE、ERIC-PCR 对大肠杆菌气溶胶的溯源鉴定第62页
     ·P FGE 与 ERIC-PCR 鉴定效率比较,阐明不同鉴定方法的优劣及应用前景第62页
   ·实时荧光定量 RT-PCR 对新型 H1N1 病毒的检测方法的建立第62-63页
   ·猪舍内外空气中新型 H1N1 病毒的检测第63-64页
参考文献第64-72页
致谢第72-73页
攻读学位期间发表论文第73-74页
硕士学位论文内容简介及自评第74页

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