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小麦胚乳特异性多酚氧化酶基因RNA干扰载体的构建及遗传转化

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 前言第11-23页
   ·面粉和面制品色泽的影响因素第11-12页
   ·多酚氧化酶(PPO)的研究进展第12-15页
     ·PPO 的生理生化特性第12-13页
     ·PPO 的分布与活性变化第13页
     ·PPO 活性检测第13页
     ·PPO 活性的影响因素第13-14页
     ·小麦籽粒PPO 活性的分子标记研究第14-15页
     ·PPO 基因的遗传及基因克隆第15页
   ·基因表达载体构建策略第15-18页
     ·构建表达载体的重要性第15-16页
     ·启动子的选用第16页
     ·转录终止子第16页
     ·内含子的选用第16-17页
     ·增强子的选用第17页
     ·目标基因的修饰第17页
     ·筛选标记基因的利用和删除第17-18页
   ·RNA 干扰研究进展第18-20页
     ·RNA 干扰的作用机理第19页
     ·RNA 干扰的应用第19-20页
   ·转基因技术研究进展第20-22页
     ·基因枪法第21页
     ·花粉管通道法第21页
     ·农杆菌转化研究进展第21-22页
   ·本研究的目的意义第22-23页
2 试验材料与方法第23-31页
   ·试验材料第23页
   ·试验方法第23-31页
     ·农杆菌介导体系探索第23-24页
     ·piPPO 载体构建第24-28页
       ·LB 和YEP 培养基的制备第24页
       ·大肠杆菌感受态的制备第24-25页
       ·热击转化第25页
       ·质粒DNA 的提取第25-26页
       ·酶切第26页
       ·DNA 片段胶回收第26-27页
       ·目的片段和载体连接第27页
       ·农杆菌感受态的制备第27-28页
       ·农杆菌转化第28页
     ·piPPO 农杆菌介导转化小麦第28-31页
       ·接种第28页
       ·取胚第28页
       ·去胚轴第28-29页
       ·继代筛选第29页
       ·再生第29页
       ·转化中所使用培养基的配制第29-30页
       ·基因组DNA 的提取第30页
       ·PCR 检测第30-31页
3 结果与分析第31-38页
   ·农杆菌介导体系探索第31-34页
   ·piPPO 农杆菌表达载体构建第34-37页
     ·中间载体pBluippo、pBluippopBIOS 的构建第34-36页
     ·最终载体piPPO 的构建第36-37页
   ·piPPO 农杆菌介导转化小麦第37-38页
4 讨论第38-40页
   ·农杆菌转化体系的探索第38-39页
   ·piPPO 农杆菌表达载体构建第39-40页
   ·piPPO 农杆菌载体转化小麦第40页
5 结论第40-42页
   ·优化农杆菌转化体系第40-41页
   ·构建得到 piPPO 农杆菌载体第41页
   ·得到含有 piPPO 的转基因小麦植株第41-42页
6 参考文献第42-53页
7 致谢第53-54页
8 攻读硕士学位期间发表的论文第54-55页
硕士学位论文内容简介及自评第55页

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