第一章 综述 | 第1-25页 |
·引言 | 第13页 |
·睾丸周长 | 第13-15页 |
·国外研究进展 | 第13-14页 |
·性状关联 | 第14页 |
·测量 | 第14-15页 |
·精液品质性状 | 第15-17页 |
·精液收集 | 第15-16页 |
·精液检查 | 第16-17页 |
·差异显示技术 | 第17-23页 |
·基因差异表达的研究方法 | 第17-19页 |
·mRNA差异显示技术(Differential Display RT-PCR,DDRT-PCR) | 第19-22页 |
·DDRT-PCR的改进 | 第22页 |
·关于阳性差异片段的筛选 | 第22-23页 |
·研究意义 | 第23-25页 |
·SC与精液品质相关 | 第23-24页 |
·差异显示筛选SC相关基因 | 第24页 |
·主要研究内容 | 第24-25页 |
第二章 材料和方法 | 第25-41页 |
第一部分 公牛睾丸周长与主要精液品质性状相关分析 | 第25-27页 |
·实验材料 | 第25-26页 |
·实验方法 | 第26-27页 |
第二部分 DDRT-PCR筛选SC相关基因 | 第27-41页 |
·实验材料 | 第27页 |
·实验动物 | 第27页 |
·组织样采集 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-41页 |
·主要仪器设备 | 第27-28页 |
·总RNA的提取,纯化及检测 | 第28-30页 |
·反转录 | 第30-31页 |
·DDRT-PCR | 第31-32页 |
·变性聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)的制备,电泳,银染 | 第32-33页 |
·差异条带的回收 | 第33-34页 |
·二次PCR | 第34页 |
·反Northern杂交 | 第34-37页 |
·连接反应 | 第37页 |
·大肠杆菌JM110感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
·转化 | 第38页 |
·重组质粒DNA的鉴定 | 第38-40页 |
·测序 | 第40页 |
·功能分析 | 第40-41页 |
第三章 结果与分析 | 第41-71页 |
第一部分 公牛睾丸周长与主要精液品质性状相关分析 | 第41-62页 |
·品种,年龄对睾丸周长,射精量,精子活力,精子密度的影响 | 第41-43页 |
·品种,年龄对SC的影响 | 第41页 |
·品种,年龄对SV的影响 | 第41-42页 |
·品种,年龄对SM的影响 | 第42-43页 |
·品种,年龄对SCT的影响 | 第43页 |
·小结 | 第43页 |
·各个年龄段,各个品种内SC,SV,SM,SCT之间的相关分析 | 第43-50页 |
·荷斯坦1.5~4岁年龄段SC,SV,SM,SCT之间的相关分析 | 第43-45页 |
·西门塔尔1.5~4岁年龄段SC,SV,SM,SCT之间的相关分析 | 第45-46页 |
·西门塔尔4~6岁年龄段SC,SV,SM,SCT之间的相关分析 | 第46-47页 |
·西门塔尔6岁以上年龄段SC,SV,SM,SCT之间的相关分析 | 第47-48页 |
·夏洛来6岁以上年龄段SC,SV,SM,SCT之间的相关分析 | 第48-49页 |
·利木赞6岁以上年龄段SC,SV,SM,SCT之间的相关分析 | 第49-50页 |
·小结 | 第50页 |
·SC,SV.SM,SCT四个性状各个年龄段品种之间的差异 | 第50-62页 |
·1.5~4岁年龄段荷斯坦与西门塔尔之间SC的差异 | 第50页 |
·1.5~4岁年龄段荷斯坦与西门塔尔之间SV的差异 | 第50-51页 |
·1.5~4岁年龄段荷斯坦与西门塔尔之间SM的差异 | 第51页 |
·1.5~4岁年龄段荷斯坦与西门塔尔之间SCT的差异 | 第51-53页 |
·4~6岁年龄段西门塔尔与夏洛来之间SC的差异 | 第53页 |
·4~6岁年龄段西门塔尔与夏洛来之间SV的差异 | 第53页 |
·4~6岁年龄段西门塔尔与夏洛来之间SM的差异 | 第53-54页 |
·4~6岁年龄段西门塔尔与夏洛来之间SCT的差异 | 第54-56页 |
·6岁以上年龄段利木赞,西门塔尔和夏洛来之间SC的差异 | 第56-57页 |
·6岁以上年龄段利木赞,西门塔尔和夏洛来之间SV的差异 | 第57-58页 |
·6岁以上年龄段利木赞,西门塔尔和夏洛来之间SM的差异 | 第58-59页 |
·6岁以上年龄段利木赞,西门塔尔和夏洛来之间SCT的差异 | 第59-61页 |
·小结 | 第61-62页 |
第二部分 DDRT-PCR筛选SC相关基因 | 第62-71页 |
·总RNA的提取,纯化 | 第62-64页 |
·总RNA的提取 | 第62页 |
·总RNA的纯化 | 第62-63页 |
·总RNA紫外分光光度计检测 | 第63页 |
·分析 | 第63-64页 |
·差异表达片断的筛选 | 第64-67页 |
·mRNA差异显示 | 第64-65页 |
·二次PCR | 第65-66页 |
·差异片断的Reverse Northern点杂交 | 第66-67页 |
·阳性差异条带 | 第67页 |
·差异条带的克隆与测序 | 第67-68页 |
·阳性差异条带的纯化回收 | 第67-68页 |
·连接,转化和鉴定 | 第68页 |
·测序 | 第68页 |
·差异条带的同源性比对分析 | 第68-71页 |
第四章 讨论与结论 | 第71-77页 |
·讨论 | 第71-75页 |
·睾丸周长与主要精液品质性状的相关研究 | 第71-72页 |
·睾丸周长测量 | 第72页 |
·DDRT-PCR筛选睾丸周长相关基因的研究 | 第72-73页 |
·部分差异显示序列功能分析 | 第73-75页 |
·结论 | 第75-77页 |
·统计结果 | 第75-76页 |
·DDRT-PCR结果 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
作者简历 | 第82-83页 |
附录1 差异表达阳性序列比对结果 | 第83-93页 |