| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-25页 |
| 1 植物-病原相互作用的分子生物学研究进展 | 第10-18页 |
| ·植物宿主特异性抗性中的识别机制 | 第10-12页 |
| ·无毒蛋白 | 第11页 |
| ·R蛋白 | 第11-12页 |
| ·抗性蛋白识别无毒蛋白 | 第12页 |
| ·非宿主病原与植物之间的识别 | 第12-13页 |
| ·识别后信号传导 | 第13-16页 |
| ·R蛋白的激活 | 第13-14页 |
| ·局部和长距离信号传导 | 第14-16页 |
| ·林木—病原相互关系分子生物学研究进展 | 第16-18页 |
| 2 实时定量RT-PCR方法 | 第18-25页 |
| ·原理与方法 | 第18-20页 |
| ·实验过程中几个关键的问题 | 第20-25页 |
| ·RNA的提取与反转录 | 第20-22页 |
| ·内对照的标准化 | 第22-25页 |
| 第二章 实时定量RT-PCR方法的建立和验证DDRT-PCR | 第25-40页 |
| 1 引言 | 第25页 |
| 2 材料和方法 | 第25-28页 |
| ·病原菌的培养 | 第25-26页 |
| ·杨树材料准备及接种实验 | 第26页 |
| ·总RNA的分离纯化 | 第26页 |
| ·反转录 | 第26-27页 |
| ·实时定量分析 | 第27页 |
| ·验证管家基因的特异性 | 第27-28页 |
| ·从管家基因中选取合适的内对照基因 | 第28页 |
| ·相对表达量的手工计算 | 第28页 |
| 3 结果 | 第28-38页 |
| ·差显序列的重新注释 | 第28-30页 |
| ·实时定量RT-PCR方法的优化 | 第30-36页 |
| ·RNA的提取与均一化 | 第30-33页 |
| ·管家基因扩增产物特异性的检测 | 第33-35页 |
| ·从管家基因中选取稳定表达基因做为内对照基因 | 第35页 |
| ·扩增效率的计算 | 第35-36页 |
| ·常用浓度下DTT对扩增效率的影响 | 第36页 |
| ·实时定量RT-PCR分析 | 第36-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 美洲黑杨两个脂肪氧化酶基因的克隆及表达分析 | 第40-62页 |
| 1 引言 | 第40-41页 |
| 2 材料与方法 | 第41-49页 |
| ·植物材料及病原处理 | 第41页 |
| ·MeJA,SA和受伤处理 | 第41页 |
| ·RNA提取及反转录 | 第41-42页 |
| ·全长脂肪氧化酶cDNA序列的克隆 | 第42-46页 |
| ·实时定量RT-PCR分析 | 第46页 |
| ·PdLOX1与PdLOX2的原核表达和酶活性分析 | 第46-49页 |
| ·酶产物特异性分析 | 第49页 |
| ·进化树分析 | 第49页 |
| 3 结果 | 第49-60页 |
| ·PdLOX1和PdLOX2全长cDNA克隆及分析 | 第49-53页 |
| ·进化树分析 | 第53-56页 |
| ·PdLOX1和PdLOX2在受病原,茉莉酸甲酯,水杨酸,受伤诱导下的表达分析 | 第56-58页 |
| ·PdLOX1和PdLOX2原核表达分析 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 第四章 美洲黑杨DRT100基因和POIP基因克隆和初步功能验证 | 第62-82页 |
| 1.引言 | 第62-64页 |
| ·DNA损伤修复及UV-B应答研究进展 | 第62-64页 |
| ·RecA基因及其在植物中的同源基因 | 第64页 |
| 2.材料与方法 | 第64-67页 |
| ·植物材料及病原处理 | 第64页 |
| ·MeJA,SA和受伤处理 | 第64-65页 |
| ·RNA提取及反转录 | 第65页 |
| ·全长PdDRT100 cDNA序列的克隆 | 第65页 |
| ·实时定量RT-PCR分析 | 第65页 |
| ·PdDRT100原核表达分析 | 第65-66页 |
| ·订购拟南芥DRT100突变株及检测 | 第66页 |
| ·PdDRT100基因过量表达载体构建 | 第66-67页 |
| 3.结果与讨论 | 第67-82页 |
| ·全长PdDRT100cDNA的克隆及序列分析 | 第67-70页 |
| ·实时定量RT-PCR分析 | 第70-72页 |
| ·原核表达分析 | 第72-74页 |
| ·recA互补实验 | 第74-76页 |
| ·拟南芥突变株验证 | 第76-79页 |
| ·PdDRT100基因过量表达载体的构建 | 第79页 |
| ·PdPGIP基因的全长cDNA克隆 | 第79-82页 |
| 第五章 美洲黑杨×欧美杨抗黑斑病QTL目标区段的确定及候选基因筛选 | 第82-92页 |
| 1 引言 | 第82-83页 |
| 2 材料与方法 | 第83页 |
| ·植物材料及病原处理 | 第83页 |
| ·候选基因筛选及序列分析 | 第83页 |
| ·实时定量RT-PCR分析 | 第83页 |
| 3 结果与讨论 | 第83-92页 |
| ·杨树抗黑斑病候选基因 | 第83-89页 |
| ·候选基因表达分析 | 第89-92页 |
| 参考文献 | 第92-101页 |
| 详细摘要 | 第101-105页 |
