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牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测及分型研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-10页
1 引言第10-20页
   ·BVDV 生物学特性第10-11页
     ·BVDV 形态及理化学特性第10页
     ·BVDV 的分型第10-11页
   ·BVD/MD 的流行病学及症状第11-12页
     ·流行病学第11页
     ·症状第11-12页
   ·BVDV 的致病机理第12-13页
     ·持续感染与免疫耐受第12页
     ·粘膜病第12页
     ·繁殖障碍第12-13页
     ·免疫抑制第13页
     ·血小板减少症第13页
   ·BVDV 生物型转化的分子机制第13-16页
     ·病毒基因与宿主细胞基因的重组第14页
     ·病毒基因的重复复制及重排第14-15页
     ·病毒基因重复复制和插入序列同时存在第15页
     ·病毒基因的缺失第15页
     ·点突变第15-16页
   ·BVDV 诊断技术研究进展第16-18页
     ·抗体诊断方法第16-17页
     ·抗原诊断方法第17-18页
   ·研究的目的和意义第18-20页
2 材料与方法第20-24页
   ·实验材料第20-21页
     ·病毒与细胞第20页
     ·生物学试剂第20页
     ·扩增引物第20页
     ·主要仪器第20-21页
   ·实验方法第21-24页
     ·新生犊牛睾丸细胞(NBTE)的制备第21页
     ·BVDV 的增殖第21页
     ·BVDV 基因组RNA 的提取第21页
     ·BVDV 目的基因的克隆第21-22页
     ·敏感性试验第22页
     ·特异性试验第22-23页
     ·重复性试验第23页
     ·动物感染试验第23-24页
3 实验结果第24-36页
   ·BVDV 感染NBTE 细胞显微镜下观察第24页
   ·BVDV 基因的PCR 扩增第24-25页
     ·BVDV 特异性引物PCR 扩增结果第24-25页
     ·BVDV 基因Ⅰ、Ⅱ型引物PCR 扩增结果第25页
     ·BVDV 生物Ⅰ、Ⅱ型引物PCR 扩增结果第25页
   ·BVDV 的敏感性试验第25-27页
     ·BVDV 特异性引物的敏感性试验第25-26页
     ·BVDV 基因型引物的敏感性试验第26页
     ·BVDV 生物型引物的敏感性试验第26-27页
   ·BVDV 的特异性试验第27-28页
     ·BVDV 特异性引物的特异性试验第27页
     ·BVDV 基因型引物的特异性试验第27-28页
     ·BVDV 生物型引物的特异性试验第28页
   ·BVDV 动物感染试验结果第28-29页
   ·BVDVRT-PCR 产物测序结果及同源性分析第29-36页
     ·BVDV 特异性引物扩增片段核苷酸序列测定及同源性分析第29-30页
     ·BVDV 基因型引物扩增片段核苷酸序列测定及同源性分析第30-31页
     ·BVDV 生物型引物扩增片段核苷酸序列测定及同源性分析第31-36页
4 讨论第36-38页
   ·引物的设计第36页
   ·PCR 反应条件的优化第36页
   ·RT-PCR 反应的特异性及敏感性第36-37页
   ·生物型转型及鉴定第37页
   ·RT-PCR 在病料的检测应用第37-38页
5 结论第38-40页
致谢第40-42页
参考文献第42-48页
附录第48-50页
 Reed-Muench 方法第48-50页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第50页

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