中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
1 引言 | 第10-20页 |
·BVDV 生物学特性 | 第10-11页 |
·BVDV 形态及理化学特性 | 第10页 |
·BVDV 的分型 | 第10-11页 |
·BVD/MD 的流行病学及症状 | 第11-12页 |
·流行病学 | 第11页 |
·症状 | 第11-12页 |
·BVDV 的致病机理 | 第12-13页 |
·持续感染与免疫耐受 | 第12页 |
·粘膜病 | 第12页 |
·繁殖障碍 | 第12-13页 |
·免疫抑制 | 第13页 |
·血小板减少症 | 第13页 |
·BVDV 生物型转化的分子机制 | 第13-16页 |
·病毒基因与宿主细胞基因的重组 | 第14页 |
·病毒基因的重复复制及重排 | 第14-15页 |
·病毒基因重复复制和插入序列同时存在 | 第15页 |
·病毒基因的缺失 | 第15页 |
·点突变 | 第15-16页 |
·BVDV 诊断技术研究进展 | 第16-18页 |
·抗体诊断方法 | 第16-17页 |
·抗原诊断方法 | 第17-18页 |
·研究的目的和意义 | 第18-20页 |
2 材料与方法 | 第20-24页 |
·实验材料 | 第20-21页 |
·病毒与细胞 | 第20页 |
·生物学试剂 | 第20页 |
·扩增引物 | 第20页 |
·主要仪器 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-24页 |
·新生犊牛睾丸细胞(NBTE)的制备 | 第21页 |
·BVDV 的增殖 | 第21页 |
·BVDV 基因组RNA 的提取 | 第21页 |
·BVDV 目的基因的克隆 | 第21-22页 |
·敏感性试验 | 第22页 |
·特异性试验 | 第22-23页 |
·重复性试验 | 第23页 |
·动物感染试验 | 第23-24页 |
3 实验结果 | 第24-36页 |
·BVDV 感染NBTE 细胞显微镜下观察 | 第24页 |
·BVDV 基因的PCR 扩增 | 第24-25页 |
·BVDV 特异性引物PCR 扩增结果 | 第24-25页 |
·BVDV 基因Ⅰ、Ⅱ型引物PCR 扩增结果 | 第25页 |
·BVDV 生物Ⅰ、Ⅱ型引物PCR 扩增结果 | 第25页 |
·BVDV 的敏感性试验 | 第25-27页 |
·BVDV 特异性引物的敏感性试验 | 第25-26页 |
·BVDV 基因型引物的敏感性试验 | 第26页 |
·BVDV 生物型引物的敏感性试验 | 第26-27页 |
·BVDV 的特异性试验 | 第27-28页 |
·BVDV 特异性引物的特异性试验 | 第27页 |
·BVDV 基因型引物的特异性试验 | 第27-28页 |
·BVDV 生物型引物的特异性试验 | 第28页 |
·BVDV 动物感染试验结果 | 第28-29页 |
·BVDVRT-PCR 产物测序结果及同源性分析 | 第29-36页 |
·BVDV 特异性引物扩增片段核苷酸序列测定及同源性分析 | 第29-30页 |
·BVDV 基因型引物扩增片段核苷酸序列测定及同源性分析 | 第30-31页 |
·BVDV 生物型引物扩增片段核苷酸序列测定及同源性分析 | 第31-36页 |
4 讨论 | 第36-38页 |
·引物的设计 | 第36页 |
·PCR 反应条件的优化 | 第36页 |
·RT-PCR 反应的特异性及敏感性 | 第36-37页 |
·生物型转型及鉴定 | 第37页 |
·RT-PCR 在病料的检测应用 | 第37-38页 |
5 结论 | 第38-40页 |
致谢 | 第40-42页 |
参考文献 | 第42-48页 |
附录 | 第48-50页 |
Reed-Muench 方法 | 第48-50页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第50页 |