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牛巴贝斯虫体外培养体系及ELISA检测方法的建立

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 引言第11-25页
   ·病原学特征第11页
   ·巴贝斯虫体外培养的研究进展第11-19页
     ·基本培养技术第11-12页
     ·影响体外培养的因素第12-15页
     ·体外培养技术的应用第15-17页
     ·几种巴贝斯虫的体外培养第17-18页
     ·研究展望第18-19页
   ·巴贝斯虫病诊断方法的研究进展第19-24页
     ·病原学检测技术第19-20页
     ·血清学检测技术第20-22页
     ·分子生物学检测技术第22-24页
   ·研究内容和方法第24-25页
第二章 牛巴贝斯虫体外培养体系的建立第25-31页
   ·材料与方法第25-27页
     ·主要仪器第25页
     ·主要试剂第25页
     ·虫体第25页
     ·实验动物第25页
     ·配制培养液第25-26页
     ·红细胞悬液第26页
     ·起始培养与维持培养第26页
     ·筛选供体牛第26页
     ·虫种再鉴定第26页
     ·扩大培养第26页
     ·液氮保存第26-27页
     ·生长特性与生长周期的测定第27页
     ·测定牛巴贝斯虫体外对不同宿主红细胞的入侵能力第27页
   ·结果第27-29页
     ·体外培养第27-28页
     ·生长特性与生长周期第28-29页
     ·对不同宿主红细胞的入侵能力第29页
   ·讨论第29-31页
第三章 牛巴贝斯虫裂殖子蛋白间接 ELISA 检测方法的建立第31-38页
   ·材料和方法第31-33页
     ·虫体第31页
     ·梨形虫阴性牛第31页
     ·血清第31页
     ·抗原的制备第31页
     ·Western blot 反应第31-32页
     ·间接 ELISA 反应程序第32页
     ·抗原-抗体最佳工作浓度的确定第32页
     ·ELISA 阳性阈值和特异性、敏感性的确定第32页
     ·交叉反应第32-33页
     ·田间样品检测第33页
   ·结果第33-36页
     ·抗原-抗体最佳工作浓度第33页
     ·阳性阈值与特异性、敏感性第33页
     ·Western blot 反应第33-34页
     ·抗体动态与交叉反应第34-35页
     ·田间样品检测第35-36页
   ·讨论第36-38页
第四章 牛巴贝斯虫 RAP-1 基因编码蛋白 C 端的克隆、表达与反应原性分析第38-44页
   ·材料和方法第38-40页
     ·仪器和试剂第38页
     ·虫种和血清第38-39页
     ·设计引物第39页
     ·BoRCT 的 PCR 扩增第39页
     ·重组质粒 pET-30a-BoRCT 的构建与鉴定第39-40页
     ·重组蛋白的表达与纯化第40页
     ·反应原性分析第40页
   ·结果第40-43页
     ·目的基因的克隆第40-41页
     ·重组蛋白的表达与纯化第41-42页
     ·Western Blot 检测重组蛋白反应原性第42-43页
   ·讨论第43-44页
第五章 全文结论第44-45页
参考文献第45-53页
附录第53-55页
致谢第55-56页
作者简介第56页

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