摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 引言 | 第11-25页 |
·病原学特征 | 第11页 |
·巴贝斯虫体外培养的研究进展 | 第11-19页 |
·基本培养技术 | 第11-12页 |
·影响体外培养的因素 | 第12-15页 |
·体外培养技术的应用 | 第15-17页 |
·几种巴贝斯虫的体外培养 | 第17-18页 |
·研究展望 | 第18-19页 |
·巴贝斯虫病诊断方法的研究进展 | 第19-24页 |
·病原学检测技术 | 第19-20页 |
·血清学检测技术 | 第20-22页 |
·分子生物学检测技术 | 第22-24页 |
·研究内容和方法 | 第24-25页 |
第二章 牛巴贝斯虫体外培养体系的建立 | 第25-31页 |
·材料与方法 | 第25-27页 |
·主要仪器 | 第25页 |
·主要试剂 | 第25页 |
·虫体 | 第25页 |
·实验动物 | 第25页 |
·配制培养液 | 第25-26页 |
·红细胞悬液 | 第26页 |
·起始培养与维持培养 | 第26页 |
·筛选供体牛 | 第26页 |
·虫种再鉴定 | 第26页 |
·扩大培养 | 第26页 |
·液氮保存 | 第26-27页 |
·生长特性与生长周期的测定 | 第27页 |
·测定牛巴贝斯虫体外对不同宿主红细胞的入侵能力 | 第27页 |
·结果 | 第27-29页 |
·体外培养 | 第27-28页 |
·生长特性与生长周期 | 第28-29页 |
·对不同宿主红细胞的入侵能力 | 第29页 |
·讨论 | 第29-31页 |
第三章 牛巴贝斯虫裂殖子蛋白间接 ELISA 检测方法的建立 | 第31-38页 |
·材料和方法 | 第31-33页 |
·虫体 | 第31页 |
·梨形虫阴性牛 | 第31页 |
·血清 | 第31页 |
·抗原的制备 | 第31页 |
·Western blot 反应 | 第31-32页 |
·间接 ELISA 反应程序 | 第32页 |
·抗原-抗体最佳工作浓度的确定 | 第32页 |
·ELISA 阳性阈值和特异性、敏感性的确定 | 第32页 |
·交叉反应 | 第32-33页 |
·田间样品检测 | 第33页 |
·结果 | 第33-36页 |
·抗原-抗体最佳工作浓度 | 第33页 |
·阳性阈值与特异性、敏感性 | 第33页 |
·Western blot 反应 | 第33-34页 |
·抗体动态与交叉反应 | 第34-35页 |
·田间样品检测 | 第35-36页 |
·讨论 | 第36-38页 |
第四章 牛巴贝斯虫 RAP-1 基因编码蛋白 C 端的克隆、表达与反应原性分析 | 第38-44页 |
·材料和方法 | 第38-40页 |
·仪器和试剂 | 第38页 |
·虫种和血清 | 第38-39页 |
·设计引物 | 第39页 |
·BoRCT 的 PCR 扩增 | 第39页 |
·重组质粒 pET-30a-BoRCT 的构建与鉴定 | 第39-40页 |
·重组蛋白的表达与纯化 | 第40页 |
·反应原性分析 | 第40页 |
·结果 | 第40-43页 |
·目的基因的克隆 | 第40-41页 |
·重组蛋白的表达与纯化 | 第41-42页 |
·Western Blot 检测重组蛋白反应原性 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
第五章 全文结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-53页 |
附录 | 第53-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
作者简介 | 第56页 |