| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 英文缩略词表 | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-25页 |
| ·当前在棉花上应用的主要杀虫基因 | 第12-16页 |
| ·Bt基因 | 第12-14页 |
| ·蛋白酶抑制剂基因 | 第14-15页 |
| ·外源凝集素基因 | 第15-16页 |
| ·当前转基因棉花检测的主要方法 | 第16-20页 |
| ·分子生物学测定 | 第16-18页 |
| ·PCR检测 | 第16-17页 |
| ·Southern和Northern杂交 | 第17页 |
| ·Western杂交 | 第17-18页 |
| ·生物学鉴定 | 第18页 |
| ·生化鉴定 | 第18-20页 |
| ·对目的基因代谢产物的生化分析 | 第18-19页 |
| ·利用标记基因进行鉴定 | 第19-20页 |
| ·当前转基因抗虫棉的现状和发展趋势 | 第20-23页 |
| ·现状 | 第20-21页 |
| ·转基因抗虫棉的发展趋势 | 第21-22页 |
| ·培育多价抗虫棉 | 第21页 |
| ·转基因抗虫棉与抗除草剂、抗病、抗逆等基因相结合 | 第21页 |
| ·采用特异启动子和诱导表达启动子 | 第21-22页 |
| ·转基因育种与常规育种相结合 | 第22页 |
| ·转Bt基因植物存在的问题 | 第22-23页 |
| ·抗性问题 | 第22-23页 |
| ·其它问题 | 第23页 |
| ·本研究的意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-33页 |
| ·试验设计 | 第25页 |
| ·试验材料 | 第25页 |
| ·研究方法 | 第25-33页 |
| ·DNA制备方法的研究 | 第25-29页 |
| ·种子前处理方法研究 | 第26页 |
| ·提取时间 | 第26页 |
| ·DNA提取缓冲液 | 第26页 |
| ·种子DNA的提取 | 第26-27页 |
| ·叶片DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·DNA定量 | 第28页 |
| ·DNA质量的评价 | 第28-29页 |
| ·转基因抗虫棉纯度的PCR测定 | 第29-31页 |
| ·特异引物的合成、确定及PCR方法的建立 | 第29-30页 |
| ·引物及PCR反应体系 | 第30页 |
| ·扩增产物的检测 | 第30页 |
| ·特异引物的确定 | 第30-31页 |
| ·PCR反应体系的最终建立 | 第31页 |
| ·种子与叶片DNA的PCR比较 | 第31页 |
| ·转基因抗虫棉纯度的鉴定 | 第31页 |
| ·卡那霉素检测 | 第31页 |
| ·用于DNA提取试剂的配制 | 第31-33页 |
| 3 结果分析 | 第33-46页 |
| ·用未经改进的DNA提取方法和扩增程序进行PCR的结果 | 第33-34页 |
| ·新设计的引物与前人引物的扩增结果比较 | 第34-35页 |
| ·PCR反应程序的优化 | 第35-37页 |
| ·提取时间的影响 | 第37-38页 |
| ·不同处理对扩增结果的影响 | 第38-39页 |
| ·粗提DNA的浓度 | 第39-40页 |
| ·启动子区引物扩增的片段 | 第40-41页 |
| ·根据启动子与目的基因之间的序列设计的引物扩增结果 | 第41页 |
| ·交叉引物的扩增 | 第41-42页 |
| ·不同引物扩增一致性比较 | 第42-44页 |
| ·双价抗虫棉的扩增 | 第44-45页 |
| ·卡那霉素检测结果 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-51页 |
| ·DNA提取方法的改进 | 第46-47页 |
| ·引物设计 | 第47页 |
| ·PCR反应条件 | 第47-48页 |
| ·DNA质量对PCR扩增的影响 | 第48页 |
| ·用快速法进行DNA的提取在种子纯度检测中的价值 | 第48-49页 |
| ·利用PCR技术检测转基因抗虫棉与卡那霉素检测的比较 | 第49页 |
| ·三对引物扩增结果一致性比较 | 第49-50页 |
| ·进一步研究的设想 | 第50-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-64页 |
| 附录Ⅰ Bt基因序列 | 第64-66页 |
| 附录Ⅱ 启动子基因序列 | 第66-68页 |
