摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
本文所用缩略词中英文对照 | 第11-12页 |
第一部分 引言 | 第12-22页 |
·抗坏血酸过氧化物酶 | 第12-15页 |
·活性氧与抗氧化酶酶系统 | 第12页 |
·APX 的核酸序列信息 | 第12-13页 |
·APX 同工酶的结构特征及反应机制 | 第13-14页 |
·APX 转基因植物的研究 | 第14-15页 |
·J 结构域蛋白 | 第15-18页 |
·J 蛋白基本结构与家族分类 | 第15-16页 |
·J 蛋白的基本作用 | 第16-17页 |
·逆境条件对细胞中 J 蛋白的影响 | 第17页 |
·拟南芥中 J 蛋白相关研究 | 第17-18页 |
·模式生物拟南芥简介 | 第18-19页 |
·菌核病的简介及浸染过程 | 第19-20页 |
·草酸对植物及病原菌的作用 | 第20-22页 |
第二部分 材料与方法 | 第22-32页 |
·拟南芥种子与植物病原真菌来源 | 第22页 |
·表达载体与生化试剂 | 第22页 |
·表达载体的构建与验证 | 第22-23页 |
·超级大肠杆菌感受态的制备 | 第23-24页 |
·农杆菌感受态的制备 | 第24页 |
·农杆菌花序浸染转化拟南芥 | 第24-25页 |
·阳性突变体的筛选与验证 | 第25页 |
·拟南芥的种植 | 第25页 |
·拟南芥基因组 DNA 的提取 | 第25-26页 |
·TAIL-PCR 反应扩增 T-DNA 插入侧翼序列 | 第26-29页 |
·拟南芥总 RNA 的提取 | 第29-30页 |
·RT-PCR 检测过表达与失活突变体植株的表达量 | 第30页 |
·草酸胁迫下测定根长 | 第30页 |
·核盘菌离体叶片接种法 | 第30-31页 |
·核盘菌活体叶片接种法 | 第31页 |
·DAB 染色 | 第31页 |
·台酚蓝染色 | 第31-32页 |
第三部分 结果与分析 | 第32-54页 |
·草酸诱导下基因转录水平 | 第32-33页 |
·生物信息学分析 | 第33-38页 |
·启动子元件分析 | 第33-34页 |
·蛋白质序列分析 | 第34-36页 |
·目的基因响应胁迫的能力 | 第36-37页 |
·目的基因的时空表达分析 | 第37-38页 |
·过表达载体的构建 | 第38-41页 |
·APX1 基因过表达载体的构建 | 第38-39页 |
·TSM1 基因过表达载体的构建 | 第39-41页 |
·突变体植株分析 | 第41-43页 |
·TAIL-PCR 明确 T-DNA 插入位点 | 第41-42页 |
·验证 T-DNA 插入缺失突变体纯合性 | 第42-43页 |
·RT-PCR 验证基因的表达情况 | 第43-44页 |
·草酸胁迫下拟南芥主根长度测量 | 第44-46页 |
·转基因植株的菌核病抗性分析 | 第46-54页 |
·菌核病离体接种植株后的抗病情况 | 第46-48页 |
·DAB 染色 | 第48-49页 |
·台酚蓝染色 | 第49-52页 |
·菌核病活体接种植株后的抗病情况 | 第52-54页 |
第四部分 小结与讨论 | 第54-59页 |
·实验小结 | 第54-55页 |
·实验中存在的问题 | 第55-56页 |
·拟南芥基因的共表达网络 | 第56-59页 |
参考文献 | 第59-64页 |
附录 | 第64-70页 |
致谢 | 第70页 |