英文缩写符号及中英文对照表 | 第1-11页 |
中文摘要 | 第11-14页 |
ABSTRACT | 第14-18页 |
1 引言 | 第18-34页 |
·逆境胁迫与植物细胞信号转导 | 第18-24页 |
·细胞信号转导系统 | 第19页 |
·细胞信号转导途径 | 第19-24页 |
·蛋白磷酸酶的研究 | 第24-33页 |
·蛋白磷酸酶的发现 | 第24-25页 |
·蛋白磷酸酶的分类、结构及生化特性 | 第25-27页 |
·植物细胞内PP2C 的调控 | 第27-28页 |
·植物PP2C 的生理功能 | 第28-33页 |
·本课题研究的目的及意义 | 第33-34页 |
2 材料和方法 | 第34-65页 |
·实验材料 | 第34页 |
·菌株与质粒 | 第34页 |
·PCR 引物 | 第34-35页 |
·培养基 | 第35-39页 |
·母液配制 | 第35-38页 |
·培养基类型 | 第38-39页 |
·实验方法 | 第39-65页 |
·植物基因组DNA 提取 | 第39-41页 |
·植物材料总RNA 的提取 | 第41-43页 |
·提取的DNA(RNA)的浓度检测 | 第43页 |
·反转录cDNA 第一链的合成 | 第43-44页 |
·PCR 扩增 | 第44-45页 |
·连接反应 | 第45页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第45页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第45-46页 |
·碱法小量质粒 DNA 的提取 | 第46-47页 |
·DNA 序列测定 | 第47页 |
·Northern 杂交分析 | 第47-51页 |
·原核表达玉米根系蛋白磷酸酶ZmPP2C 蛋白 | 第51-55页 |
·Western blot 检测蛋白表达 | 第55-56页 |
·pBI121-Zm PP2C-GFP 表达载体的构建 | 第56页 |
·拟南芥的无土栽培、转化及分析 | 第56-59页 |
·野生型与转基因拟南芥植株在培养基上萌发及生长情况 | 第59页 |
·ZmPP2C 基因转拟南芥正义表达载体的构建 | 第59页 |
·电泳目的基因片段的回收 | 第59-60页 |
·根癌农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备及转化 | 第60-61页 |
·拟南芥生理指标的测定 | 第61-63页 |
·农杆菌介导法转化玉米的研究 | 第63-65页 |
3 结果与分析 | 第65-94页 |
·玉米ZmPP2C 与其他植物中的PP2C 类蛋白同源性比较 | 第65-68页 |
·ZmPP2C 在玉米中的表达分析 | 第68页 |
·ZmPP2C 的跨膜结构分析 | 第68-69页 |
·ZmPP2C 的亚细胞定位 | 第69-70页 |
·ZmPP2C 的原核表达及抗体制备 | 第70-73页 |
·原核表达载体的构建 | 第70-72页 |
·目的蛋白的表达 | 第72-73页 |
·目的蛋白的纯化、免疫及效价 | 第73页 |
·ZmPP2C 转化拟南芥研究 | 第73-75页 |
·ZmPP2C 基因的扩增 | 第73-74页 |
·克隆载体和表达载体的构建 | 第74-75页 |
·转基因拟南芥筛选 | 第75-78页 |
·转基因拟南芥的PCR 检测 | 第76页 |
·转基因拟南芥的半定量RT-PCR 鉴定 | 第76-77页 |
·转基因拟南芥的Western blot 鉴定 | 第77-78页 |
·转基因和野生型拟南芥在萌发和根伸长过程中对高盐和干旱的响应 | 第78-80页 |
·转基因和野生型拟南芥在逆境胁迫条件下生理指标的变化 | 第80-82页 |
·转基因和野生型拟南芥净光合速率的变化 | 第80页 |
·转基因和野生型拟南芥脯氨酸含量的变化 | 第80-81页 |
·转基因和野生型拟南芥MDA 含量的变化 | 第81页 |
·转基因和野生型拟南芥相对电导率(RMP)的变化 | 第81页 |
·转基因和野生型拟南芥失水速率的变化 | 第81-82页 |
·转基因和野生型拟南芥胁迫相关基因的表达分析 | 第82-83页 |
·转基因和野生型拟南芥在萌发和根生长过程中对ABA 的响应 | 第83-85页 |
·农杆菌介导的ZmPP2C 转化玉米的研究 | 第85-94页 |
·建立农杆菌介导的玉米遗传转化体系 | 第85-91页 |
·ZmPP2C 基因转化玉米 | 第91-93页 |
·过量表达ZmPP2C 的玉米抗旱分析 | 第93-94页 |
4 讨论 | 第94-99页 |
·ZmPP2C 基因参与植物的逆境信号转导 | 第94-95页 |
·玉米ZmPP2C 基因表达模式和调控作用 | 第95-96页 |
·过量表达ZmPP2C 基因对转基因拟南芥抗逆性的影响 | 第96-97页 |
·玉米ZmPP2C 基因可能的信号转导机制 | 第97-99页 |
5 结论 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-120页 |
致谢 | 第120-121页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第121-122页 |
附图 | 第122页 |