首页--生物科学论文--植物学论文--植物生理学论文

低温胁迫下番茄玉米黄质环氧化酶基因的表达和功能研究

中文摘要第1-15页
英文摘要第15-21页
英文缩写符号及中英文对照表第21-25页
1 引言第25-44页
   ·光合作用的光抑制第25-29页
     ·PSII 的光抑制第25-27页
     ·低温条件下PSI 的光抑制第27-29页
   ·光抑制、光破坏的防御机制第29-35页
     ·减少光吸收,增加光能利用能力第29-30页
     ·通过状态转换向PSI 分配较多的光能第30-31页
     ·依赖于叶黄素循环的热耗散第31-32页
     ·活性氧清除系统第32-34页
     ·D_1 蛋白的周转第34-35页
   ·高等植物体内的叶黄素循环第35-40页
     ·叶黄素循环的组成第35-37页
     ·叶黄素循环的主要功能第37-39页
       ·热耗散第37-38页
       ·防止膜脂过氧化第38-39页
       ·稳定类囊体膜结构第39页
       ·对蓝光的响应第39页
       ·调节ABA合成第39页
     ·叶黄素循环能量耗散的分子机理第39-40页
   ·玉米黄质环氧化酶第40-42页
   ·紫黄质脱环氧化酶第42页
   ·本研究的目的、意义第42-44页
2 材料与方法第44-67页
   ·实验材料第44-45页
     ·植物材料第44页
     ·材料处理第44页
     ·菌株与质粒第44页
     ·酶及生化试剂第44页
     ·PCR引物第44-45页
   ·实验方法第45-67页
     ·总RNA 的提取第45-46页
     ·cDNA 第一条链的合成第46-47页
     ·cDNA 纯化第47页
     ·对cDNA 进行末端加尾第47页
     ·番茄玉米黄质环氧化酶基因全长的克隆第47-50页
       ·中间片段的获得第47-48页
       ·5’RACE 获得5’端序列第48-49页
       ·3’RACE 获得3’端序列第49-50页
       ·番茄玉米黄质环氧化酶基因全长的克隆第50页
     ·Northern 杂交分析第50-53页
       ·总RNA 的提取第50页
       ·甲醛变性胶电泳第50-51页
       ·转膜第51-52页
       ·预杂交第52页
       ·探针的制备第52-53页
       ·杂交第53页
       ·洗膜第53页
       ·放射自显影第53页
     ·Southern 杂交分析第53-55页
       ·基因组DNA 的提取第53-54页
       ·基因组DNA 的限制性内切酶消化第54页
       ·转膜及烘膜第54页
       ·探针合成第54页
       ·预杂交、杂交及放射自显影第54-55页
     ·真核表达载体的构建第55-59页
       ·正、反义表达载体的构建第55页
       ·连接第55页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第55-56页
       ·转化及克隆筛选第56页
       ·碱法小量提取质粒DNA第56-57页
       ·质粒DNA 的酶切鉴定第57页
       ·回收第57页
       ·DNA 序列测定第57-58页
       ·根癌农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备与转化第58页
       ·利用农杆菌介导转化番茄第58-59页
     ·转基因番茄植株的PCR 检测第59-61页
       ·CTAB 法微量法提取基因组DNA第59-60页
       ·转基因植株的PCR 筛选第60-61页
     ·玉米黄质环氧化酶的原核表达及Western 杂交第61-65页
       ·原核表达载体的构建第61页
       ·E.coli BL21 原核表达的诱导第61页
       ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第61-62页
       ·抗体的制备第62页
       ·抗血清效价的测定第62页
       ·Western 杂交第62-65页
     ·转基因番茄生理指标的测定第65-67页
       ·放氧活性的测定第65页
       ·荧光参数测定第65页
       ·P700的820 nm光吸收第65页
       ·叶黄素循环色素组分分析第65页
       ·O_2~· 和H_2O_2的测定第65-66页
       ·丙二醛(MDA)含量的测定第66页
       ·抗坏血酸(Ascorbate)含量的测定第66页
       ·活性氧清除酶的活性测定第66页
       ·可溶性蛋白的测定第66-67页
3 结果与分析第67-103页
   ·番茄玉米黄质环氧化酶基因的分离及表达分析第67-79页
     ·LeZE基因的分离第67-68页
     ·LeZE基因的序列分析第68-73页
     ·LeZE基因编码蛋白的生化特性分析第73-74页
       ·基因编码蛋白的疏水性分析第73页
       ·LeZE基因表达产物跨膜特性分析第73-74页
     ·LeZE基因在番茄中的表达分析第74-75页
       ·LeZE基因在番茄不同器官中的表达第74页
       ·低温弱光和强光处理下LeZE基因在番茄中的表达第74-75页
     ·LeZE基因在大肠杆菌中的表达第75-79页
       ·原核表达载体pET-LeZE的构建第75-76页
       ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳第76-78页
       ·低温弱光和强光下LeZE在蛋白水平的表达特征第78-79页
   ·LeZE在番茄中的遗传转化第79-84页
     ·正、反义表达载体的构建第79页
     ·正、反义表达载体的鉴定第79-81页
     ·转正、反义LeZE基因植株的鉴定第81-83页
     ·番茄 LeZE 基因 Southern 杂交分析第83-84页
     ·转正、反义LeZE基因植株中LeVDE基因的表达第84页
   ·LeZE的过量表达增加番茄PSII光抑制的敏感性第84-92页
     ·转正义基因番茄叶黄素循环组分的变化第84-85页
     ·LeZE 的过量表达对强光胁迫下番茄叶片光抑制的影响第85-87页
       ·LeZE的过量表达对强光胁迫下NPQ的影响第85页
       ·LeZE的过量表达对强光胁迫下叶黄素循环脱环氧化状态的影响第85-86页
       ·LeZE的过量表达对强光胁迫下放氧速率的影响第86-87页
       ·LeZE的过量表达增强了强光胁迫下PSII光抑制的敏感性第87页
     ·LeZE 的过量表达对低温弱光胁迫下番茄叶片光抑制的影响第87-92页
       ·LeZE的过量表达对低温弱光胁迫下NPQ的影响第87页
       ·LeZE的过量表达对低温弱光胁迫下叶黄素循环脱环氧化状态的影响第87-89页
       ·LeZE的过量表达对低温弱光胁迫下放氧速率的影响第89页
       ·LeZE的过量表达增强了低温弱光胁迫下PSII光抑制的敏感性第89页
       ·LeZE的过量表达对低温弱光胁迫下O_2~·和H_2O_2含量的影响第89-90页
       ·LeZE的过量表达对低温弱光胁迫下番茄叶片MDA含量的影响第90-91页
       ·LeZE的过量表达对低温弱光胁迫下PSI光抑制的影响第91-92页
   ·转正义基因番茄对强光的适应第92-94页
     ·在强光下生长的野生型和转基因植株的光合能力增强第92-93页
     ·在强光下生长的野生型和转基因植株的Fv/Fm、ΦPSII和MDA含量第93页
     ·在强光下生长的野生型和转基因植株的抗氧化系统的变化第93-94页
   ·抑制LeZE的表达减轻番茄的低温光抑制第94-103页
     ·转反义基因番茄叶黄素循环组分的变化第94-95页
     ·抑制LeZE的表达对强光胁迫下番茄叶片光抑制的影响第95-97页
       ·抑制LeZE的表达对强光胁迫下叶黄素循环脱环氧化状态的影响第95页
       ·抑制LeZE的表达对强光胁迫下NPQ的影响第95-96页
       ·抑制LeZE的表达对强光胁迫下PSII光抑制的影响第96-97页
     ·抑制LeZE 的表达对低温弱光胁迫下番茄叶片光抑制的影响第97-103页
       ·抑制LeZE 的表达对低温弱光胁迫下叶黄素循环脱环氧化状态的影响第97页
       ·抑制LeZE的表达对低温弱光胁迫下NPQ的影响第97-98页
       ·抑制LeZE的表达对低温弱光胁迫下放氧速率的影响第98-99页
       ·抑制LeZE的表达减轻了低温弱光胁迫下PSII光抑制第99页
       ·抑制LeZE的表达减轻了低温弱光胁迫下PSI光抑制第99-100页
       ·抑制LeZE的表达对低温弱光胁迫下SOD和APX活性的影响第100页
       ·抑制LeZE的表达对低温弱光胁迫下O_2~·和H_2O_2含量的影响第100-101页
       ·抑制LeZE的表达对低温弱光胁迫下番茄叶片MDA含量的影响第101-102页
       ·反义介导的LeZE的下调影响番茄成熟花花瓣的颜色第102-103页
4 讨论第103-110页
   ·LeZE 编码一种玉米黄质环氧化酶第103-104页
   ·过量表达LeZE增加了强光和低温弱光胁迫下PSII光抑制的敏感性第104-106页
   ·在强光下生长的转正义基因植株对强光的适应第106-107页
   ·Z的大量积累不能改变过剩光能胁迫下的非光化学猝灭第107-108页
   ·反义介导的LeZE的下调减轻低温弱光胁迫下番茄叶片光抑制第108-110页
5 结论第110-111页
参考文献第111-128页
攻读学位期间发表的论文第128-129页
致谢第129页

论文共129页,点击 下载论文
上一篇:玉米根系蛋白磷酸酶ZmPP2C2基因的分离、功能鉴定及转基因烟草对逆境胁迫的响应
下一篇:玉米根系蛋白磷酸酶基因ZmPP2C功能分析及遗传转化研究