| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 前言 | 第14-32页 |
| 1.鱼糜资源 | 第15-17页 |
| 2. 鱼糜的凝胶过程 | 第17-19页 |
| 3. 鱼糜中的酶类 | 第19-25页 |
| 4. 鱼糜凝胶劣化的控制 | 第25-32页 |
| 第一章 蛋白酶抑制剂的筛选 | 第32-54页 |
| 1. 材料 | 第32-33页 |
| 2. 方法 | 第33-37页 |
| ·粗血浆蛋白的制备 | 第33页 |
| ·溴化氢–木瓜蛋白酶–琼脂糖凝胶48 亲和介质的制备 | 第33页 |
| ·蛋白酶抑制剂的纯化 | 第33-34页 |
| ·鲑鱼卵中cystatin 的纯化 | 第33-34页 |
| ·鲑鱼血浆中kininogen 的纯化 | 第34页 |
| ·蛋白酶抑制活性的检测 | 第34-35页 |
| ·半胱氨酸蛋白酶抑制活性的检测 | 第34-35页 |
| ·木瓜蛋白酶抑制活性的检测 | 第34-35页 |
| ·组织蛋白酶L 抑制活性的检测 | 第35页 |
| ·丝氨酸蛋白酶抑制活性的检测 | 第35页 |
| ·电泳 | 第35-36页 |
| ·DS–PAGE | 第35-36页 |
| ·抑制活性染色 | 第36页 |
| ·P AS-染色 | 第36页 |
| ·FPLC | 第36页 |
| ·抑制剂的酸碱稳定性、热稳定性和活性 | 第36-37页 |
| ·蛋白质浓度 | 第37页 |
| ·抑制常数 | 第37页 |
| ·N -端氨基酸测序 | 第37页 |
| 3. 结果与讨论 | 第37-54页 |
| ·半胱氨酸蛋白酶抑制剂的纯化 | 第37-41页 |
| ·鲑鱼卵中抑制剂的纯化 | 第37-39页 |
| ·鲑鱼血浆中抑制剂的纯化 | 第39-41页 |
| ·电泳 | 第41-46页 |
| ·鲑鱼卵抑制剂的纯度与分子量 | 第41-42页 |
| ·鲑鱼血浆抑制剂的电泳结果 | 第42-46页 |
| ·鲑鱼血浆的抑制活性染色 | 第42-43页 |
| ·鲑鱼血浆抑制剂的纯度与分子量 | 第43-45页 |
| ·鲑鱼血浆抑制剂的PAS-染色 | 第45-46页 |
| ·抑制剂的抑制活性比较 | 第46-47页 |
| ·抑制剂的酸碱稳定性与热稳定性和热活性 | 第47-50页 |
| ·抑制剂的酸碱稳定性 | 第47-48页 |
| ·抑制剂的热稳定性 | 第48-50页 |
| ·抑制剂的热活性 | 第50页 |
| ·抑制剂的抑制类型及抑制常数 | 第50-53页 |
| ·鲑鱼卵cyatatin | 第50-51页 |
| ·鲑鱼血浆kininogen | 第51-52页 |
| ·抑制常数的比较 | 第52-53页 |
| ·N -端氨基酸测序 | 第53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| 第二章 鲑鱼卵cystatin 的重组表达及其发酵生产条件优化 | 第54-86页 |
| 1. 材料 | 第54-55页 |
| 2. 方法 | 第55-60页 |
| ·鲑鱼卵cystatin 编码DNA 的合成 | 第55页 |
| ·鲑鱼卵cystatin 编码DNA 在啤酒酵母中的转化 | 第55-56页 |
| ·重组质粒的稳定性 | 第56页 |
| ·重组菌株的培养及重组cystatin 的诱导表达 | 第56-57页 |
| ·R C 的检测 | 第57页 |
| ·R C 的纯化 | 第57-58页 |
| ·亲和纯化 | 第57页 |
| ·乙醇沉淀纯化 | 第57-58页 |
| ·RC 的性质研究 | 第58页 |
| ·抑制活性 | 第58页 |
| ·酸碱稳定性 | 第58页 |
| ·热稳定性 | 第58页 |
| ·R C 发酵生产的优化 | 第58-59页 |
| ·摇瓶规模RC 生产的优化 | 第58页 |
| ·发酵罐中RC 生产的优化 | 第58-59页 |
| ·验证实验 | 第59页 |
| ·检测分析 | 第59页 |
| ·微生物浓度 | 第59页 |
| ·溶氧检测 | 第59页 |
| ·葡萄糖和半乳糖含量检测 | 第59页 |
| ·数据分析 | 第59-60页 |
| 3. 结果与讨论 | 第60-86页 |
| ·重组用微生物的选择 | 第60页 |
| ·鲑鱼卵cystatin 编码DNA | 第60-61页 |
| ·鲑鱼卵cystatin 的质粒转化及验证 | 第61-63页 |
| ·重组质粒的稳定性 | 第63-64页 |
| ·重组菌株的培养及RC 的诱导表达 | 第64-65页 |
| ·RC 的纯化 | 第65-68页 |
| ·亲和纯化RC | 第65-67页 |
| ·乙醇沉淀纯化RC | 第67-68页 |
| ·RC 的性质研究 | 第68-70页 |
| ·抑制活性的比较 | 第68页 |
| ·酸碱稳定性的比较 | 第68-69页 |
| ·热稳定性的比较 | 第69-70页 |
| ·RC 的生产优化 | 第70-85页 |
| ·摇瓶培养的优化 | 第70-76页 |
| ·星点设计 | 第70-73页 |
| ·培养基pH、诱导时间和诱导辅助剂的添加量对RC 产量的影响 | 第73-75页 |
| ·最佳培养条件的预测 | 第75-76页 |
| ·摇瓶培养优化验证 | 第76页 |
| ·发酵罐培养的优化 | 第76-85页 |
| ·搅动速率的影响 | 第77-81页 |
| ·通气速率的影响 | 第81-84页 |
| ·发酵罐培养优化验证 | 第84-85页 |
| ·小结 | 第85-86页 |
| 第三章 利用 RC 抑制狭鳕鱼糜凝胶劣化的研究 | 第86-98页 |
| 1. 材料 | 第86页 |
| 2. 方法 | 第86-88页 |
| ·R C 对鱼糜降解的抑制能力 | 第86-87页 |
| ·鱼糜凝胶的制备 | 第87页 |
| ·凝胶结构分析 | 第87页 |
| ·凝胶白度检测 | 第87页 |
| ·可榨出水分检测 | 第87-88页 |
| ·鱼糜凝胶中蛋白质溶解度的测定 | 第88页 |
| ·蛋白质图谱 | 第88页 |
| ·数据分析 | 第88页 |
| 3. 结果与讨论 | 第88-98页 |
| ·亲和纯化的RC 对鱼糜凝胶劣化的抑制作用 | 第88-94页 |
| ·R C 对狭鳕鱼糜降解的抑制作用 | 第88-89页 |
| ·R C 对鱼糜凝胶结构的作用 | 第89-91页 |
| ·R C 对鱼糜凝胶可榨出水分含量和白度的影响 | 第91-92页 |
| ·R C 对鱼糜凝胶蛋白质溶解度的影响 | 第92-93页 |
| ·R C 对鱼糜凝胶蛋白质降解的影响 | 第93-94页 |
| ·乙醇沉淀纯化的RC 对鱼糜凝胶劣化的抑制作用 | 第94-97页 |
| ·粗RC 对鱼糜凝胶结构的作用 | 第94-96页 |
| ·粗RC 对鱼糜凝胶可榨出水分含量和白度的影响 | 第96-97页 |
| ·小结 | 第97-98页 |
| 第四章 结论 | 第98-99页 |
| 论文创新点 | 第99-100页 |
| 后续工作计划 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-107页 |
| 个人简历 | 第107页 |
| 论文发表情况 | 第107-108页 |
| 致谢 | 第108页 |
