| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-28页 |
| ·引言 | 第10页 |
| ·细胞凋亡和Bcl-2家族蛋白 | 第10-13页 |
| ·Mcl-1蛋白的结构和功能 | 第13-15页 |
| ·Bcl-2家族蛋白的小分子抑制剂 | 第15-21页 |
| ·非广谱抑制剂 | 第16-18页 |
| ·广谱抑制剂 | 第18-21页 |
| ·NMR方法在药物筛选和设计的应用 | 第21-26页 |
| ·NMR蛋白样品的制备和结构解析 | 第22-23页 |
| ·生物NMR用于药物筛选 | 第23-26页 |
| ·本研究工作的指导思想和主要目标 | 第26-28页 |
| 2：Mcl-1蛋白的表达纯化及结构性质鉴定 | 第28-51页 |
| ·引言 | 第28-29页 |
| ·实验材料与试剂 | 第29-30页 |
| ·菌株和载体质粒 | 第29页 |
| ·细菌培养基 | 第29-30页 |
| ·实验仪器 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-39页 |
| ·重组Mcl-1蛋白的基因克隆 | 第30-33页 |
| ·感受态细胞的制备及转化 | 第33-34页 |
| ·Mcl-1蛋白的原核表达纯化 | 第34-36页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳和western blot分析 | 第36-37页 |
| ·Mcl-1蛋白的圆二色谱测定 | 第37-38页 |
| ·~(15)N标记Mcl-1蛋白核磁图谱测定 | 第38-39页 |
| ·结果和讨论 | 第39-49页 |
| ·重组基因的克隆结果分析 | 第39-40页 |
| ·Mcl-1蛋白的表达量分析 | 第40-45页 |
| ·Mcl-1蛋白的分离纯化流程 | 第45-47页 |
| ·纯化的Mcl-1蛋白的结构性质分析 | 第47-49页 |
| ·本章小结 | 第49-51页 |
| 3 小分子抑制剂与Mcl-1蛋白结合模式的HSQC研究 | 第51-68页 |
| ·引言 | 第51页 |
| ·实验部分 | 第51-54页 |
| ·荧光偏振试验(FP) | 第51-52页 |
| ·等温滴定量热(ITC) | 第52-53页 |
| ·分子对接实验 | 第53-54页 |
| ·HSQC滴定实验 | 第54页 |
| ·结果分析 | 第54-66页 |
| ·Mcl-1抑制剂的构效关系的HSQC研究 | 第54-62页 |
| ·S1与Mcl-1蛋白结合模式指导的fragment-based分子设计和构效关系研究 | 第62-66页 |
| ·本章小结 | 第66-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
