摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
引言 | 第10-11页 |
1 文献综述 | 第11-24页 |
·GPS2概论 | 第11-17页 |
·GPS2的发现 | 第11页 |
·GPS2蛋白的结构、基序和特异序列 | 第11-12页 |
·GPS2与多种细胞蛋白的相互作用 | 第12页 |
·GPS2在基因转录过程中的作用 | 第12-15页 |
·GPS2的生物学功能 | 第15-17页 |
·SUMO概述 | 第17-22页 |
·SUMO修饰通路 | 第18-20页 |
·SUMO修饰与磷酸化、乙酰化和泛素化的关系 | 第20-21页 |
·SUMO参与不同的细胞途径 | 第21页 |
·SUMO与人类疾病 | 第21-22页 |
·本论文的选题依据和研究内容 | 第22-24页 |
·选题依据 | 第22页 |
·研究内容 | 第22-24页 |
2 细胞内GPS2 的SUMO修饰 | 第24-34页 |
·引言 | 第24页 |
·仪器与试剂 | 第24-28页 |
·菌种、细胞及质粒 | 第24页 |
·仪器 | 第24-25页 |
·试剂 | 第25-28页 |
·实验方法 | 第28-31页 |
·质粒提取 | 第28页 |
·细胞培养 | 第28页 |
·质粒转染 | 第28-29页 |
·细胞内提取蛋白 | 第29页 |
·免疫共沉淀 | 第29页 |
·免疫印迹(Western Blot) | 第29-31页 |
·结果与讨论 | 第31-33页 |
·COS-7细胞中外源转染GPS2的SUMO修饰 | 第31-32页 |
·IP确定GPS2能够被SUMO修饰 | 第32-33页 |
·小结 | 第33-34页 |
3 K45和K71是GPS2主要的SUMO修饰位点 | 第34-41页 |
·引言 | 第34页 |
·仪器与试剂 | 第34-35页 |
·细胞及质粒 | 第34页 |
·仪器 | 第34-35页 |
·试剂 | 第35页 |
·实验方法 | 第35-36页 |
·细胞培养 | 第35页 |
·荧光素酶报告基因实验 | 第35页 |
·蛋白质定量 | 第35-36页 |
·结果与讨论 | 第36-40页 |
·GPS2的突变体在COS-7细胞中的表达 | 第36页 |
·K45和K71是GPS2的主要SUMO修饰位点 | 第36-37页 |
·SUMO修饰位点突变对GPS2转录抑制活性的影响 | 第37-40页 |
·小结 | 第40-41页 |
4 SUMO修饰调节GPS2的细胞定位及稳定性 | 第41-50页 |
·引言 | 第41页 |
·仪器与试剂 | 第41-42页 |
·质粒与细胞 | 第41页 |
·仪器 | 第41页 |
·试剂 | 第41-42页 |
·实验方法 | 第42-43页 |
·细胞培养 | 第42页 |
·免疫共沉淀 | 第42页 |
·免疫荧光 | 第42-43页 |
·核质分离 | 第43页 |
·蛋白定量 | 第43页 |
·结果与讨论 | 第43-48页 |
·SUMO修饰促进了GPS2在细胞核的聚集 | 第43-46页 |
·SUMO修饰增加了GPS2的稳定性 | 第46-48页 |
·小结 | 第48-50页 |
5 SUMO修饰对GPS2功能的调控 | 第50-57页 |
·引言 | 第50页 |
·仪器与试剂 | 第50页 |
·细胞及质粒 | 第50页 |
·仪器 | 第50页 |
·试剂 | 第50页 |
·实验方法 | 第50-51页 |
·细胞培养 | 第50页 |
·质粒转染 | 第50页 |
·荧光素酶报告基因实验 | 第50页 |
·免疫共沉降 | 第50-51页 |
·MTT比色法 | 第51页 |
·结果与讨论 | 第51-56页 |
·SUMO修饰促进了GPS2对ERα抑制功能 | 第51-53页 |
·SUMO修饰促进了GPS2与SMRT之间的相互作用 | 第53-54页 |
·SUMO修饰增强了GPS2对细胞增殖的抑制作用 | 第54-56页 |
·小结 | 第56-57页 |
结论 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |