| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-21页 |
| 1、能源现状 | 第9页 |
| 2、生物柴油 | 第9-11页 |
| ·我国生物柴油产业的发展现状 | 第10页 |
| ·利用微生物油脂作为生物柴油原料的必要性 | 第10-11页 |
| 3 微生物油脂的研究状况 | 第11-12页 |
| 4、产油微生物菌种改良 | 第12-14页 |
| 5、转座标签的作用机理及在酵母菌株改良中的应用 | 第14-18页 |
| ·转座子及转座子标签 | 第14页 |
| ·mTn3 转座子标签及应用 | 第14-16页 |
| ·转座子标签插入位点的鉴定方法 | 第16-18页 |
| ·拯救质粒(rescue plasmid)法 | 第16页 |
| ·基于PCR 的分离方法 | 第16-18页 |
| ·直接测序法 | 第18页 |
| ·转座标签技术在菌株改良中的应用 | 第18页 |
| 6、选题依据 | 第18-19页 |
| 7、研究内容及技术路线 | 第19-21页 |
| 第二章 发酵性丝孢酵母2.1368 营养缺陷型的筛选 | 第21-28页 |
| 1 材料与方法 | 第21-23页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·菌种 | 第21页 |
| ·试剂 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-23页 |
| ·菌种活化及扩大培养 | 第22页 |
| ·发酵性丝孢酵母2.1368 生长对数期的确定 | 第22页 |
| ·亚硝基胍诱变筛选2.1368 亮氨酸缺陷型的方法 | 第22-23页 |
| ·紫外诱变筛选2.1368-Leu–尿嘧啶缺陷型的方法 | 第23页 |
| 2 结果与分析 | 第23-27页 |
| ·发酵性丝孢酵母2.1368 生长对数期的确定 | 第23-25页 |
| ·发酵性丝孢酵母2.1368 生长曲线 | 第23-24页 |
| ·发酵验证2.1368 生长对数期最佳菌龄 | 第24-25页 |
| ·亚硝基胍（NTG）诱变筛选2.1368 亮氨酸缺陷型的结果 | 第25-26页 |
| ·紫外诱变筛选2.1368-Leu–尿嘧啶缺陷型的结果 | 第26-27页 |
| 3 本章小结 | 第27-28页 |
| 第三章 转座标签插入突变 | 第28-38页 |
| 1 材料与方法 | 第28-30页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·供试菌株及质粒 | 第28页 |
| ·试剂与溶液 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·试验方法 | 第29-30页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·大肠杆菌转化 | 第29页 |
| ·质粒的提取、纯化和检测 | 第29页 |
| ·酶切和检测 | 第29页 |
| ·纯化酶切产物并检测 | 第29-30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-37页 |
| ·提取的转座标签插入文库质粒及其NotI 酶切结果 | 第30-32页 |
| ·供试酵母2.1368-Leu–高效转化结果 | 第32-35页 |
| ·酵母高效转化最佳热激时间的确定 | 第32-33页 |
| ·纯化插入的DNA 片段以改进酵母高效转化的结果 | 第33-34页 |
| ·酵母菌2.1368-Leu–高效转化得到的转化子情况 | 第34-35页 |
| ·同源重组载体的筛选 | 第35-37页 |
| 3 本章小结 | 第37-38页 |
| 第四章 优良重组子的筛选 | 第38-43页 |
| 1 材料与方法 | 第38-39页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·供试菌株 | 第38页 |
| ·试剂与溶液 | 第38页 |
| ·试验方法 | 第38-39页 |
| ·Cerulenin(浅蓝菌素)初筛高产油脂酵母 | 第38页 |
| ·磷酸香草醛反应筛选高产油脂菌株 | 第38页 |
| ·发酵验证试验 | 第38-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-42页 |
| ·Cerulenin(浅蓝菌素)初筛高产油脂酵母 | 第39页 |
| ·磷酸香草醛反应法分析初筛菌株 | 第39-40页 |
| ·发酵试验复筛高产菌株 | 第40-42页 |
| ·纯糖发酵验证结果 | 第40-41页 |
| ·秸秆糖化液发酵验证结果 | 第41-42页 |
| 3 本章小结 | 第42-43页 |
| 第五章 结论与讨论 | 第43-45页 |
| 1 结论 | 第43页 |
| 2 讨论 | 第43-45页 |
| ·酵母高效转化 | 第43页 |
| ·优良重组子的筛选 | 第43-44页 |
| ·后续研究以及展望 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| ABSTRACT | 第49-50页 |
