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棉花金属硫蛋白基因GhMT3a的功能分析及拟南芥与水稻蛋白质磷酸酶PP2C基因家族分析

英文缩写符号及中英文对照表第1-9页
摘要第9-12页
ABSTRACT第12-16页
1 前言第16-35页
   ·植物抗逆机理研究进展第16-22页
     ·信号转导调节第17-20页
     ·离子平衡和渗透调节第20页
     ·胁迫相关蛋白第20-21页
     ·抗氧化防御系统第21-22页
   ·棉花基因克隆研究进展第22-23页
     ·棉花抗逆相关基因的克隆第22-23页
     ·棉花基因克隆的主要途径第23页
   ·金属硫蛋白的研究进展第23-24页
   ·蛋白磷酸酶的研究进展第24-30页
     ·蛋白磷酸酶的发现第24-25页
     ·蛋白磷酸酶的分类、结构及生化特性第25-26页
     ·植物PP2C的功能第26-30页
   ·生物信息学在基因家族研究中的应用第30-33页
     ·生物信息学常用技术方法第30-32页
     ·基因家族研究进展第32-33页
   ·本课题研究的目的及意义第33-35页
2 材料与方法第35-57页
   ·材料第35-39页
     ·植物材料第35页
     ·植物材料培养与处理第35页
     ·实验引物第35-36页
     ·软件和网络资源第36-39页
     ·其他材料第39页
   ·实验方法第39-57页
     ·RNA的提取第39-41页
     ·RNA的纯化第41页
     ·cDNA第一条链的合成第41页
     ·双链cDNA的合成第41-42页
     ·DNA片段与克隆载体的连接第42页
     ·大肠杆菌DH5α感受态的制备第42-43页
     ·大肠杆菌细胞的转化第43页
     ·质粒DNA的提取第43-44页
     ·凝胶电泳中DNA片段的回收第44-45页
     ·序列测定第45页
     ·Northern杂交第45-46页
     ·酵母表达载体的构建与酵母转化第46-48页
     ·植物表达载体的构建第48-49页
     ·农杆菌介导的烟草的转化第49-50页
     ·原核表达及蛋白质纯化第50-52页
     ·蛋白质结合金属离子能力的测定第52-53页
     ·过氧化氢含量的测定第53页
     ·Clustal的使用第53-54页
     ·Phylip系统发育树第54-55页
     ·Mega3.1构建系统发生树的方法第55页
     ·本地BLAST方法第55-57页
3 结果与分析第57-95页
   ·GhMT3a基因的获得与序列分析第57-58页
   ·棉花金属硫蛋白GhMT3a的功能分析第58-66页
     ·GhMT3a内源表达分析第58-64页
     ·GhMT3a在烟草中表达及转基因烟草抗逆境胁迫分析第64-66页
   ·GhMT3a基因在酵母中表达及抗氧化检测第66-67页
   ·GhMT3a的原核诱导表达及GhMT3a体外结合锌离子能力的测定第67-71页
     ·GhMT3a基因的原核表达第68-69页
     ·GhMT3a蛋白与Zn~(2+)结合检测第69-71页
   ·拟南芥中PP2C基因的鉴定第71-74页
   ·水稻中PP2C基因的鉴定第74-77页
   ·拟南芥和水稻中PP2C基因家族的系统发生分析第77-81页
   ·基因结构及蛋白质元件分析第81-82页
   ·拟南芥和水稻中PP2C基因家族的比较分析第82-84页
   ·拟南芥和水稻中PP2C基因的分布第84-87页
   ·拟南芥和水稻中PP2C基因的表达模式第87-91页
     ·PP2C基因的组织表达模式第87-88页
     ·PP2C基因胁迫条件下的表达模式第88-91页
   ·拟南芥和水稻亚家族A基因的上游调控序列分析第91-95页
4 讨论第95-100页
   ·GhMT3a的结构与功能第95-96页
   ·GhMT3a的信号传导途径第96页
   ·GhMT3a及其同源家族的应用前景及工作展望第96-97页
   ·PP2C基因家族是蛋白质磷酸酶家族的一大类第97-98页
   ·PP2C基因家族组织表达模式第98页
   ·PP2C基因家族的功能第98-100页
5 结论第100-101页
6 参考文献第101-115页
7 附录第115-124页
致谢第124-125页
攻读学位期间论文及专利第125页

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