| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 1 前言 | 第15-40页 |
| ·高等植物中赤霉素的研究及分析 | 第15-30页 |
| ·赤霉素在植物形态发生中的作用 | 第15-23页 |
| ·赤霉素的生物合成与代谢途径 | 第23-25页 |
| ·GA 信号转导通路 | 第25-27页 |
| ·DELLA 蛋白 | 第27-29页 |
| ·DELLA 蛋白与逆境条件下的生长抑制 | 第29-30页 |
| ·bHLH 转录因子 | 第30-32页 |
| ·bHLH 转录因子的特点及研究进展 | 第30-31页 |
| ·bHLH 转录因子介导的生长发育和环境因子响应 | 第31-32页 |
| ·GAMYB 转录因子 | 第32-34页 |
| ·ICE1 介导的低温信号转导 | 第34-38页 |
| ·CBFs/DREB1s 依赖的低温信号通路 | 第34-35页 |
| ·ICE1(inducer of CBF expression 1)基因的鉴定 | 第35-36页 |
| ·ICE1 基因的特征及其基本功能 | 第36-38页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第38-40页 |
| 2 材料与方法 | 第40-65页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·植物材料及生长条件 | 第40页 |
| ·菌株和质粒载体 | 第40页 |
| ·酶、试剂盒、培养基、杂交膜、各种化学药品及仪器 | 第40-41页 |
| ·PCR 引物 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-65页 |
| ·植物组织总RNA 的提取 | 第41-42页 |
| ·反转录cDNA 第一链的合成 | 第42-43页 |
| ·植物基因组DNA 的提取及纯化 | 第43-44页 |
| ·PCR 扩增 | 第44页 |
| ·连接反应 | 第44-45页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第45-46页 |
| ·碱法小量质粒DNA 的提取 | 第46页 |
| ·质粒DNA 的酶切鉴定 | 第46-47页 |
| ·DNA 序列测定 | 第47页 |
| ·目的片段的回收 | 第47-48页 |
| ·根癌农杆菌GV3101 感受态细胞的制备与转化 | 第48-49页 |
| ·表达载体的构建 | 第49-50页 |
| ·拟南芥的栽培、转化及转基因植株分析 | 第50-52页 |
| ·实时定量RT-PCR(Real Time quantitative Reverse Transcription PCR) | 第52-53页 |
| ·Northern 杂交分析 | 第53-56页 |
| ·GUS 染色分析 | 第56-57页 |
| ·扫描电镜观察 | 第57-58页 |
| ·DAPI 染色 | 第58页 |
| ·碱性苯胺蓝染色 | 第58-59页 |
| ·I_2/KI 染色 | 第59页 |
| ·花粉粒体外萌发实验 | 第59页 |
| ·微分干涉差显微照相分析 | 第59-61页 |
| ·染色质免疫共沉淀(CHIP) | 第61-63页 |
| ·高效液相色谱(HPLC)测定植物内源激素 | 第63-65页 |
| 3 结果与分析 | 第65-94页 |
| ·ice1-t 突变体的鉴定 | 第65-66页 |
| ·ice1-t 突变体的低温响应 | 第66-67页 |
| ·ice1-t 突变体第一片真叶的叶柄变长并且植株变高 | 第67-68页 |
| ·ice1-t 突变体具有早花的表型 | 第68-69页 |
| ·内源赤霉素的测定 | 第69-71页 |
| ·ice1-t 突变体表现出部分雄性不育的表型 | 第71-79页 |
| ·ice1-t 突变体花的外观形态 | 第71-72页 |
| ·ice1-t 突变体花粉粒的育性分析 | 第72-75页 |
| ·ice1-t 突变体花粉粒的扫描电镜观察 | 第75-76页 |
| ·ice1-t 突变体花粉粒的DAPI 染色分析 | 第76-77页 |
| ·GAMYB-like 基因在野生型和ice1-t 突变体中的表达分析 | 第77-79页 |
| ·ice1-t 突变体种子发育异常 | 第79-84页 |
| ·ice1-t 突变体成熟种子的外观形态 | 第79页 |
| ·ice1-t 突变体胚的发育过程 | 第79-80页 |
| ·LECs 基因在野生型和ice1-t 突变体中的表达分析 | 第80-81页 |
| ·种子萌发实验 | 第81-84页 |
| ·种子萌发对ABA 的敏感性 | 第84-85页 |
| ·GA 代谢类基因在野生型和ice1-t 突变体中的表达分析 | 第85-87页 |
| ·ICE1 蛋白与 AtGA3ox4 基因启动子的特异结合 | 第87-90页 |
| ·pBIN-ICE1-GFP 融合蛋白表达载体的构建 | 第87-88页 |
| ·染色质免疫共沉淀(CHIP) | 第88-90页 |
| ·ICE1 基因在拟南芥中的遗传转化 | 第90-94页 |
| ·ICE1 基因的分离及其正义表达载体的构建 | 第91页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第91-92页 |
| ·转基因植株的表型分析 | 第92-94页 |
| 4 讨论 | 第94-99页 |
| ·bHLH 转录因子ICE1 影响GA 的生物合成 | 第94-95页 |
| ·ICE1 对拟南芥株高的影响 | 第95页 |
| ·ICE1 通过调节GAMYB 基因的表达影响花药发育和开花时间 | 第95-97页 |
| ·ICE1 通过调节LEC 基因表达影响胚发育 | 第97-98页 |
| ·ICE1 通过调控GA 合成整合GA 和低温信号通路 | 第98-99页 |
| 5 结论 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-120页 |
| 附录 | 第120-130页 |
| 致谢 | 第130-131页 |
| 攻读学位期间完成的学术论文 | 第131页 |