| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-17页 |
| ·细菌素简介 | 第8-10页 |
| ·细菌素的定义 | 第8页 |
| ·细菌素的历史 | 第8-9页 |
| ·细菌素与抗生素的区别 | 第9页 |
| ·细菌素的分类 | 第9-10页 |
| ·细菌素在食品中的应用 | 第10页 |
| ·Ⅱa 类乳酸菌细菌素 | 第10-13页 |
| ·Ⅱa 乳酸菌细菌素的结构 | 第10-11页 |
| ·Ⅱa 类乳酸菌细菌素的产生菌株 | 第11页 |
| ·Ⅱa 类乳酸菌细菌素的合成与分泌 | 第11页 |
| ·Ⅱa 类乳酸菌细菌素的抗菌机理 | 第11-12页 |
| ·Ⅱa 类乳酸菌细菌素的抑菌谱 | 第12页 |
| ·Ⅱa 类乳酸菌细菌素在食品中的应用及研究进展 | 第12-13页 |
| ·大肠杆菌表达系统的研究进展 | 第13-14页 |
| ·重组蛋白的表达量 | 第13页 |
| ·重组蛋白的表达活性 | 第13-14页 |
| ·乳酸菌细菌素在大肠杆菌中表达的概况 | 第14页 |
| ·重叠延伸PCR 反应技术 | 第14-15页 |
| ·重叠延伸PCR 反应技术的介绍 | 第14-15页 |
| ·重叠延伸PCR 反应技术的应用 | 第15页 |
| ·Ⅱa 类乳酸菌细菌素 pediocin PA-1 和 sakacin P | 第15页 |
| ·Ⅱa 类乳酸菌细菌素pediocin PA-1 | 第15页 |
| ·Ⅱa 类乳酸菌细菌素sakacin P | 第15页 |
| ·研究目的及意义 | 第15-16页 |
| ·研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 细菌素基因的全基因合成和表达载体的构建 | 第17-36页 |
| ·引言 | 第17-18页 |
| ·材料与设备 | 第18-21页 |
| ·菌株与质粒 | 第18-19页 |
| ·实验主要试剂 | 第19页 |
| ·实验仪器 | 第19-20页 |
| ·培养基、溶液的配制及灭菌方法 | 第20-21页 |
| ·培养基的配制及灭菌方法 | 第20页 |
| ·各种溶液配制方法及灭菌方法 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-25页 |
| ·前体肽（pre-sakP）的全基因合成 | 第21-22页 |
| ·载体pGMT-pre-sakP 的构建 | 第22-24页 |
| ·pediocin PA-1 和sakacin P 成熟片段的扩增 | 第24-25页 |
| ·克隆载体(pGMT-sakP，pGMT-ped)的构建 | 第25页 |
| ·表达载体(pET28a-sakP，pET28a-ped)的构建 | 第25页 |
| ·工程菌BL21(DE3) (pET28a-sakP)，BL21(DE3) (pET28a-ped)的构建 | 第25页 |
| ·结果与讨论 | 第25-34页 |
| ·前体肽（pre-sakP）全基因序列的人工合成 | 第25-27页 |
| ·载体pGMT-pre-sakP 构建 | 第27-29页 |
| ·pediocin PA-1 和sakacin P 成熟肽的扩增 | 第29页 |
| ·克隆载体（pGMT-sakP，pGMT-ped）构建 | 第29-32页 |
| ·表达载体（pET28a-sakP，pET28a-ped）构建 | 第32-34页 |
| ·工程菌BL21 (DE3) (pET28a-sakP)和BL21 (DE3) (pET28a-ped)的构建 | 第34页 |
| ·本章小结 | 第34-36页 |
| 第三章 重组蛋白诱导表达及活力的测定 | 第36-46页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·材料与设备 | 第36-38页 |
| ·实验主要试剂 | 第36-37页 |
| ·实验仪器 | 第37页 |
| ·培养基、溶液的配制及灭菌 | 第37-38页 |
| ·菌株 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-41页 |
| ·表达宿主菌的扩增与诱导培养 | 第38页 |
| ·重组Ⅱa 类乳酸菌细菌素样品制备 | 第38-39页 |
| ·Tricine-SDS-PAGE 蛋白电泳 | 第39-40页 |
| ·抑菌活性检测实验 | 第40-41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-45页 |
| ·Tricine-SDS-PAGE 蛋白电泳分析 | 第41-43页 |
| ·蛋白活性检测 | 第43-45页 |
| ·本章小结 | 第45-46页 |
| 第四章 新Ⅱa类乳酸菌细菌素C1的克隆表达 | 第46-57页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·材料与方法 | 第46-47页 |
| ·实验主要试剂 | 第46页 |
| ·实验仪器 | 第46页 |
| ·培养基、溶液的配制及灭菌 | 第46页 |
| ·菌株、质粒和模板DNA | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-49页 |
| ·目标条带NB-C1 的扩增 | 第47页 |
| ·克隆载体pGMT-NB-C1 的构建 | 第47页 |
| ·表达载体pET28a-NB-C1 的构建 | 第47页 |
| ·重组蛋白NB-C1 诱导表达 | 第47页 |
| ·Tricine-SDS-PAGE 蛋白电泳 | 第47-48页 |
| ·抑菌活性的检测 | 第48页 |
| ·重组蛋白诱导表达条件优化 | 第48-49页 |
| ·实验结果与讨论 | 第49-56页 |
| ·克隆载体pGMT-NB-C1 的构建 | 第49-51页 |
| ·表达载体pET28a-NB-C1 的构建 | 第51页 |
| ·Tricine-SDS-PAGE 蛋白电泳的分析 | 第51-52页 |
| ·重组蛋白NB-C1 活性的测定 | 第52页 |
| ·重组蛋白表达条件优化 | 第52-56页 |
| ·本章小结 | 第56-57页 |
| 主要结论 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第65页 |
