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柔嫩艾美耳球虫3-1E基因的原核表达和真核表达质粒的构建及免疫保护性研究

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-12页
1 引言第12-21页
   ·鸡球虫病概述第12页
   ·鸡球虫相关的免疫保护性抗原第12-16页
     ·虫体的持家基因第12-13页
     ·子孢子表面抗原基因第13-14页
     ·配子体抗原基因第14页
     ·裂殖子表面抗原第14页
     ·微线蛋白第14-15页
     ·折光体抗原第15-16页
     ·其它相关的抗原分子基因第16页
   ·宿主对球虫感染的免疫应答第16-17页
     ·细胞免疫在抗球虫感染中的作用第16-17页
     ·体液免疫在抗球虫感染中的作用第17页
     ·黏膜免疫在抗球虫中的作用第17页
   ·细胞因子在鸡球虫病免疫中的作用第17-19页
   ·抗鸡球虫疫苗研究进展第19-20页
   ·研究的目的和意义第20-21页
2 材料与方法第21-39页
   ·试验材料第21-24页
     ·试验动物第21页
     ·载体与菌株第21页
     ·虫株第21页
     ·相关片段第21页
     ·主要试剂第21-22页
     ·主要仪器设备第22页
     ·主要溶液第22-24页
   ·试验方法第24-39页
     ·柔嫩艾美耳球虫重组3-1E基因的原核表达第24-27页
     ·柔嫩艾美耳球虫重组3-1E基因原核表达产物的免疫保护试验第27-30页
     ·柔嫩艾美耳球虫重组3-1E基因真核表达质粒的构建第30-36页
     ·真核表达质粒在鸡体内基因转录及表达的检测第36-37页
     ·柔嫩艾美耳球虫3-1E基因真核表达质粒的免疫保护试验第37-39页
3 结果第39-59页
   ·柔嫩艾美耳球虫重组3-1E基因的原核表达第39-42页
     ·pET-32a(+)-3-1E重组表达质粒的构建第39-40页
     ·pET-32a(+)-3-1E重组表达质粒在大肠杆菌中的表达第40-41页
     ·重组蛋白的Western-blot分析第41-42页
   ·柔嫩艾美耳球虫3-1E基因原核表达产物的免疫保护试验第42-46页
     ·间接ELISA抗原包被浓度和血清稀释度的确定第42页
     ·原核表达产物的免疫保护试验第42-46页
   ·柔嫩艾美耳球虫重组3-1E基因真核表达质粒的构建与免疫保护试验第46-59页
     ·pcDNA3.1(+)-3-1E、pcDNA3.1(+)-IFN-γ、pcDNA3.1(+)-IL-2真核表达质粒的构建第46-48页
     ·pcDNA3.1(+)-3-1E-IFN-γ、pcDNA3.1(+)-3-1E-IL-2真核表达质粒的构建第48-51页
     ·DNA疫苗在鸡体内基因转录及表达的检测第51-53页
     ·柔嫩艾美耳球虫3-1E基因真核表达质粒的免疫保护试验第53-59页
4 讨论第59-66页
   ·E.tenella 3-1E基因的选择第59页
   ·IFN-γ及IL-2作为免疫佐剂的研究第59-60页
   ·融合基因的设计第60-61页
   ·重组3-1E原核表达蛋白的抗球虫作用第61-62页
   ·重组3-1E真核表达质粒的抗球虫作用第62-63页
   ·影响重组蛋白免疫效果的可能因素第63-64页
   ·影响DNA疫苗免疫效果的可能因素第64-65页
   ·小结第65-66页
5 结论第66-67页
致谢第67-68页
参考文献第68-74页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第74页

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