中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-11页 |
1 前言 | 第11-20页 |
·研究背景与科学意义 | 第11页 |
·文献综述 | 第11-18页 |
·胚胎早期发育的相关研究 | 第11-14页 |
·孤雌生殖 | 第14-15页 |
·有关胚胎初次卵裂时间的研究 | 第15-16页 |
·mRNA 差异显示技术 | 第16-18页 |
·研究的目标与内容 | 第18-20页 |
2 材料与方法 | 第20-38页 |
·试验材料 | 第20-23页 |
·孤雌胚胎的培养与收集 | 第20-21页 |
·试验试剂 | 第21页 |
·缓冲液与常用试剂的配制 | 第21-23页 |
·主要仪器设备 | 第23页 |
·试验方法 | 第23-38页 |
·差异表达 mRNA 的筛选 | 第23-26页 |
·差异表达片段的鉴定及测序 | 第26-28页 |
·CPEB2 cDNA 的克隆 | 第28-34页 |
·不同阶段胚胎中 CPEB2 的荧光定量 PCR | 第34-38页 |
3 结果与分析 | 第38-54页 |
·差异表达mRNA 的筛选结果 | 第38-40页 |
·两组胚胎DDRT-PCR 聚丙烯酰胺凝胶电泳的比较结果 | 第38-39页 |
·差异条带的回收及二次PCR 的结果 | 第39-40页 |
·差异条带的鉴定、克隆、测序及生物信息学分析结果 | 第40-43页 |
·探针标记效价的检测结果 | 第40页 |
·反向Northern-blot 鉴定结果 | 第40-41页 |
·阳性片段的克隆及测序 | 第41页 |
·差异表达序列的生物信息学分析 | 第41-43页 |
·CPEB2 cDNA 克隆结果 | 第43-50页 |
·细胞RNA 提取结果 | 第43页 |
·CPEB2 中间片段扩增结果 | 第43-45页 |
·CPEB2 cDNA 5'末端的扩增(5'RACE)结果 | 第45-46页 |
·序列拼接 | 第46页 |
·CPEB2 的生物信息学分析 | 第46-50页 |
·不同发育阶段胚胎 CPEB2 的荧光定量 PCR 结果 | 第50-54页 |
·标准曲线的绘制结果 | 第50-51页 |
·不同阶段胚胎 CPEB2 的定量结果 | 第51-54页 |
4 讨论 | 第54-58页 |
·DDRT-RCR 技术及结果鉴定 | 第54页 |
·试验材料的选择 | 第54-55页 |
·胚胎卵裂时间点的划分 | 第54-55页 |
·孤雌胚胎的选择 | 第55页 |
·关于差异表达mRNA 片段 | 第55-56页 |
·猪 CPEB2 功能的预测 | 第56-58页 |
·猪 CPEB2 cDNA 和蛋白序列分析 | 第56页 |
·不同阶段胚胎中 CPEB2 表达规律 | 第56-58页 |
5 结论 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-69页 |
附录1 | 第69-71页 |
附录2 | 第71-74页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第74页 |