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发育潜能不同的猪2-细胞期孤雌胚胎差异表达基因的筛选

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-11页
1 前言第11-20页
   ·研究背景与科学意义第11页
   ·文献综述第11-18页
     ·胚胎早期发育的相关研究第11-14页
     ·孤雌生殖第14-15页
     ·有关胚胎初次卵裂时间的研究第15-16页
     ·mRNA 差异显示技术第16-18页
   ·研究的目标与内容第18-20页
2 材料与方法第20-38页
   ·试验材料第20-23页
     ·孤雌胚胎的培养与收集第20-21页
     ·试验试剂第21页
     ·缓冲液与常用试剂的配制第21-23页
     ·主要仪器设备第23页
   ·试验方法第23-38页
     ·差异表达 mRNA 的筛选第23-26页
     ·差异表达片段的鉴定及测序第26-28页
     ·CPEB2 cDNA 的克隆第28-34页
     ·不同阶段胚胎中 CPEB2 的荧光定量 PCR第34-38页
3 结果与分析第38-54页
   ·差异表达mRNA 的筛选结果第38-40页
     ·两组胚胎DDRT-PCR 聚丙烯酰胺凝胶电泳的比较结果第38-39页
     ·差异条带的回收及二次PCR 的结果第39-40页
   ·差异条带的鉴定、克隆、测序及生物信息学分析结果第40-43页
     ·探针标记效价的检测结果第40页
     ·反向Northern-blot 鉴定结果第40-41页
     ·阳性片段的克隆及测序第41页
     ·差异表达序列的生物信息学分析第41-43页
   ·CPEB2 cDNA 克隆结果第43-50页
     ·细胞RNA 提取结果第43页
     ·CPEB2 中间片段扩增结果第43-45页
     ·CPEB2 cDNA 5'末端的扩增(5'RACE)结果第45-46页
     ·序列拼接第46页
     ·CPEB2 的生物信息学分析第46-50页
   ·不同发育阶段胚胎 CPEB2 的荧光定量 PCR 结果第50-54页
     ·标准曲线的绘制结果第50-51页
     ·不同阶段胚胎 CPEB2 的定量结果第51-54页
4 讨论第54-58页
   ·DDRT-RCR 技术及结果鉴定第54页
   ·试验材料的选择第54-55页
     ·胚胎卵裂时间点的划分第54-55页
     ·孤雌胚胎的选择第55页
   ·关于差异表达mRNA 片段第55-56页
   ·猪 CPEB2 功能的预测第56-58页
     ·猪 CPEB2 cDNA 和蛋白序列分析第56页
     ·不同阶段胚胎中 CPEB2 表达规律第56-58页
5 结论第58-59页
致谢第59-60页
参考文献第60-69页
附录1第69-71页
附录2第71-74页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第74页

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